1、前言： 双氯芬酸钠 1为非甾体抗炎药，是具有较强的抗炎、解热和镇痛功效的苯基乙酸衍生物，其镇痛作用比阿司匹林和吲哚美辛强，约为阿司匹林的 2650 倍 2，系外周型镇痛药。阿司匹林为非甾体镇痛抗炎药 3。主要是通过抑制前列腺素及其其他能使痛觉对机械性或化学性刺激敏感的物质（如缓激肽、组胺）的合成，属于外周性镇痛药 4。但不能排除中枢镇痛（可能作用于下视丘）的可能性。通过抑制前列腺素或其他能引起炎性反应的物质的合成而起抗炎作用。抑制溶酶体酶的释放及白细胞趋化性等也可能与其有关。IC 50 COX-2/IC50 COX-1 比值越小，不良反应越少，阿司匹林该项比值为 173，双氯芬酸钠仅为 0.7
2、0。 摘要：研究双氯芬酸钠片剂对镇痛、抗炎动物模型的影响。采用热刺激小鼠疼痛、醋酸致扭体、二甲苯致小鼠耳肿胀等实验方法研究双氯芬酸钠肠溶片的阵痛及抗炎作用。关键词 双氯芬酸钠 阿司匹林 二甲苯 冰乙酸动物 健康昆明种小鼠 120 只药物 双氯芬酸钠肠溶片 阿司匹林泡腾片 0.6%醋酸（0.3g冰醋酸，加蒸馏水定容至 50mL） 二甲苯 0.9%生理盐水（称取 0.9 克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100 毫升） 仪器 电子天平 打耳器 热板仪 烧杯 一次性注射器 6 号注射针头 镊子 组织剪 实验步骤1、镇痛实验1.1 双氯芬酸钠对冰醋酸致疼痛 5的影响1.1.1 选取健康小鼠40只，雌
3、雄各半。1.1.2 将动物随即分为4个组，空白组、阿司匹林组(5mg/10g)、分别灌胃双氯芬酸钠实验组（0.05mg/10g、0.1mg/10g、1mg/10g） ，每组8只。各组给药剂量 均为0. 1 mL/ 10 g，空白组灌胃生理盐水。0.1mg/10g=0.001g/mL= 0.001g 的药物溶解到100mL 水中。1.1.3 于药后 45min 后，每组腹腔注射0.2m/只0.6%冰醋酸，观察给冰醋酸后15min 内小鼠发生扭体现象的次数，比较组间差异。1.1.4 将给药组与对照组相比，以给药后扭体次数减少50% 为有效镇痛作用指标, 计算药物对扭体反应的抑制率。抑制率= 对照组
4、平均扭体次数- 给药组平均扭体次数) 对照组平均扭体次数 抑制率= ( 对照组平均扭体次数- 给药组平均扭体次数) / 对照组平均扭体次数 100%组别 剂量(mg/10g) 数量 (只) 15min 内扭体次数双氯芬酸钠低剂量组 0.05 8双氯芬酸钠中剂量组 0.1 8双氯芬酸钠高剂量组 1 8 阿司匹林组 5 8空白对照组 0.9 81.2 热板法 6测双氯芬酸钠对疼痛的影响1.1.1 动物筛选 将热板仪调至 550.5 ，将小鼠置于热板上，密切观察小鼠反应，以舔后足为痛觉敏感指标。秒表记录从置于热板上到舔后后足的时间，共两次，每次间隔 5min,取其为该鼠的痛阈值，用此法筛选痛阈值在
5、30s 以内的小鼠供实验用。 1.1.2 药物实验 （1）取筛选出的小鼠 40 只，称重，随机分成五组：阿司匹林组，空白对照组，双氯芬酸钠高、中、低剂量实验组，并编号标记。（2）小鼠分别腹腔注射双氯芬酸钠溶液 0.1ml/10g,（0.05mg/10g 0.1mg/10g 1mg/10g） 和空白对照组小鼠腹腔注射同等剂量的生理盐水 0.1ml/10g。阳性对照组阿司匹林同上（3）给药后 15min、30min、45min 60min 依次测定各鼠痛阈值，如小鼠在 60s 内仍无产生疼痛反应，应立即取出不再刺激，按60s 计算。1.1.3 实验结果处理 (1) 将给药前后小鼠平均痛阈值及痛阈改
6、变百分率填入表中（热板法测定药物镇痛作用实验记录） 组别 给药前平均痛阈值 给药后平均痛阈值 痛阈改变百分率（%） 15min 30min 45min 60min 15min 30min 45min 60min 生理盐水双氯芬酸钠高剂量组双氯芬酸钠中剂量组双氯芬酸钠低剂量组阿司匹林组注：痛阈改变百分率=(用药后平均痛阈值用药前平均痛阈值)/用药前平均痛阈值（2）根据全实验室结果，以痛阈改变百分率为纵坐标，时间为横坐标，画出时效曲线，比较阿司匹林的镇痛强度、作用开始时间及维持时间。【注意事项】 1 不同个体对热板刺激反应有不同表现，多数为舔足；有些动物反应为跳跃而 不舔足。舔足反应为保护反应，而
7、跳跃则为逃避反应，故实验中宜只选其一为指 标。实验前动物应先筛选，正常痛域值30 s ，10 s 以及喜跳跃小鼠应弃用。 2 热板法应选用雌性小鼠，雄性小鼠遇热时阴囊松弛下垂，与热板接触影响实 验结果。 3 动物体重对结果有影响，小鼠的体重以 20g 左右为宜。 4 室温以 18左右为宜，此温度小鼠对痛刺激的反应较稳定。 5 测痛阈时若 60 s 无反应立即取出，以免烫伤足部，其痛阈值按60 s 计2、抗炎实验2.1 双氯芬酸钠对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响2.1.1 取小鼠 40 只，雌雄各半，随机分成五组，每组 8 只。分为空白对照组（.氯化钠注射液组） ；实验组（双氯芬酸钠组 0.05m
8、g/10g、0.1mg/10g、1mg/10g）.；阳性对照组（阿司匹林组 5mg/10g） 。2.1.2 各组小鼠于右耳前后涂以二甲苯 0.1只，以左耳作对照。0.5h 时间后，按上述给药剂量灌胃给药，给药量0.1ml/10g.2.1.3.后颈椎脱臼处死小鼠，沿耳廓基线剪下双耳，将A4 纸垫于桌面,以直径打孔器于两耳相同部位冲出耳片，电子天平称量，以两耳质量差为肿胀度，并比较各组差异。组别 动物数（n） 耳肿胀度(g) 肿胀率（%）双氯芬酸钠低剂量组 双氯芬酸钠中剂量组双氯芬酸钠高剂量组阿司匹林组生理盐水组参考文献：1 中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005 年版，一
9、部，p.602USAMA H.RAMADHAN and NIRAN J.AL-SALIHI.The study of the Effect of Histidine Derivatives as a Novel Antinociceptive and Anti-Inflammatory ActivityJE-Journal of Chenistry.2011,8(4),1832-18423Komoike Y.Takeeda M,Tanaka A,Kato S,Takeuchi K Prevention by parenteral aspirin of indomethacin-induced
10、gastric lesions in rats:mediation by salicylic acid.Dig Dis Sci 2002;47:1538-15454Pyoung Ju Seo,Comparison of Indomethacin,Diclofenac and Aspirin-Induced Gastric Damage according to Age in Rats.Gut and Liver,Vol 6,No.2,April 2012,pp.210-2175Jones PJ, Kafonek S, Laurora I, Hunninghake D. Comparative
11、dose efficacy study of atorvastatin versus simvastatin,pravastatin,lovastatin and fluvastatin patients with hypercholesterolaemia Am J Cardiol 1998 ; 81 : 582 7.6Kerman, Study of The Anti-Inflammatory and analgesic effect of Novel rigid Benzofuran-3, 4-Dihydroxy Chalcone J Pak. J. Pharm. Sci., Vol.22, No.4, October 2009, pp.395-401药理学实验结题论文组长：张子雨、邹思宇组员：井敏、丁菲菲、刘芳张俭玲、张锦、郝相楠
