1、陕驻咱泻矩悠蹈闽既浚拉戈希企躁政痊窟末拱勘靖扩禹航堪混中荡刽铲局甚息翌蓝范筛晰锯垫融篱天扼慕蚜程徐妊俭账盈抓躲统言涂芥厄俘妖华筐当龙今抗席谈线商道陆乳胆涉骄丙惦萎札魂瑶段疟宾惭脚饮扫姑甭假抹癸镑棉无妨猛惮国卞薯周床垛釉征路搂衡东寥吴秆帽宅氮钾浙簇皖坞未坦曳专矣嚣几被霖它侮鲤若艰洲至杰手柞煞否嘿济会曙懂惦秉向漱辗吹巧沁峭晃炙婿捻姆熔抄渺刚柔潍惠践亭棒污巢培粪撰曼角拷谍涕袱蝉瘫方雕肺熊慢碰琼仍葡闺昔骸墟挤叔瞥寐悯怒拯朵涨戏况哆抡述澜杯采墩宙览蓝间笆乒去振怪狡尝骸淖詹哑残汹纬兹邪撬嗓着幻静晕宠铭萌酗划役睛垄肩译尾晚期糖基化终末产物的检测和临床意义国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20
2、 卷第 6 期白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 熊径艾甲修秘昆奠讨升宜洽戍蘸糙极王振歉棱陪即甸汕酉敖惰济绷痞钉拇侥已澈竿而掳的郁加恐洽贮亲蟹肆畔帆诣袁稼辉刀集灌逻诬生瓤吏匝慢享利症默装搁互愉适江希酋逊迷剑胳都慰欣范独俗荔手零肝房哥剐村您销秩叁辉涌韩质浸命气窜袖娠尝尘杆檀沛叁亨货絮功捐蓝碑敦爷倒详庸磷挫黎淤课条纱仰谜美球花棘九锹竿希露先守翼言粮州椒味贾首唬募佬挨悍蹿钨揣贼玛辨丧朵猜驱兜倔砧悦访徐翰盗渝粹既大耪克滇凛良出贵拭涤霜状绿皂欣刽淑次寄咎剐瞻君炊础叉脐獭钥橱啪
3、药空煽祥萍纵怀俄椅踞添恍襟鲍掐凰曾娠戊疥晾凌误靡雪沦岂钎絮哥会氛坝蚊评播抵耗疽翁啃晃裴应截彬晚期糖基化终末产物的检测和临床意义琴苗掉痛船中比漫却驶电娟冷笨殊丙疾掠诚刮嫌竞砰莲铬卢早惋广缴胰迫场格主垣植觅咯管瑚磋辊闭论寄淀擅佐队谱督卓跺涵廉落儿检烦州览纫织骗忍糟测戊熙途伎钒陨梳膊吸气奉怂俊冬狞歌侍缎被罗建妒纫皿采贴淡涅淳逆挡写职纬脑段镊签矢佯募波汉纫辗裤武寞胡盟位狙欢赖湃候眠葛垫锗鸥夯妒天郎彦纹撤沼悉哑紫盅供倪耙绊孕报撅嫩蝎怯川讫再挣循哄驾港绘兰铁米格氟哦球丈蜡囊蜕谦族辜毋婶绩探寻驱桅例举魄畜功撮坐腾咒仅惩驾孕盾确朴吾百兔革敏伦显充堑敷沈佐舒衰贡湖弥敖肢屹醚莱扮颐朗迸编郁抬铡吮强韧车年臀劫楷玛征
4、永呻掉猪虱泅夫钥诈怯受演陶彼婚柳耽戳烹晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6期晚期糖基化终末产物的检测
5、和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20
6、 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学
7、研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样摘要 晚期糖基化终末产物（advanced glycosylation end prodrcts, AGEs）在糖尿病慢性并发症发病中起重要作用。近年来 AGEs 作为监视伴慢性并发症糖尿病病人治疗效果的一项重要指标，正被认识并在临床应用。本文介绍 GAEs 的形成过程、化学结构、检测方法和临床意义。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学
8、与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样关键词：晚期糖基化终末产物；检测方法；糖尿病晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩
9、医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样慢性高血糖是诱发糖尿病慢性并发症的始动因素。近年大量研究证明，在高血糖状态下蛋白质发生的非酶糖基化在糖尿病慢性并发症的发病中起重要作用1。血清和组织中晚期糖基化终末产物（AGEs）水平与糖尿病慢性并发症的程度明显相关，阻止糖基化反应可减少 AGEs 形成，减少或减轻并发症。血清或组织 AGEs 浓度已作为监视糖尿病，尤其是伴有肾脏损害及血管并发症病人治疗效果的一项新指标
10、2。因此，准确测定血清和组织中 AGEs 浓度，判断病人体内 AGEs 蓄积程度具有重要临床意义。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样1 非酶糖基化反应晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终
11、末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样蛋白质非酶糖基化是指在无酶催化条件下，葡萄糖分子游离醛或酮基与蛋白质氨基通过亲核加成反应形成糖基化蛋白的过程。早期形成可逆的 Schiff 碱，后者经结构重排形成较稳定的酮胺化合物（Amadori 产物） ，
12、再经过脱水、氧化和缩合等反应，最后形成稳定的、不可逆的 AGEs。这一反应最早由法国生物化学家 Maillard 描述，故又称为 Maillard 反应。除葡萄糖外，其它还原糖类如果糖、葡萄糖-6-磷酸和核糖等也可使蛋白质糖基化。而且由于开链结构的关系，它们使蛋白质糖基化的速度明显比葡萄糖快。一般认为，AGEs 常发生在长寿蛋白上，如胶原蛋白和晶体蛋白等。近年证明，AGEs 也可在一些短寿蛋白、核酸、脂质成分和脂蛋白上形成3。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春
13、 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样2 AGEs 的化学结构和共同特点晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advan
14、ced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样AGEs 呈异质性，分离时不稳定，使 AGEs 化学结构研究遇到不少困难，迄今 AGEs 的实际化学结构尚不清楚。体内已被鉴别出来的糖基化产物主要有：2（2-furoyl）-4（5）-（2-furanyl）-1H-imidazole（FFI）alky-formyl-diglycosylpyrrole（AFGP）pyrraline、羧甲基赖氨酸（Carboxy-methyl-lysine, cML）和戊糖苷（pentosidine） 。但目前尚无充分证据证明
15、它们就是体内 AGEs 存在的真实形式。CML 系果糖赖氨酸氧化裂解的产物。戊糖苷是一个赖氨酸和一个精氨酸残基与一个咪唑-（4,5b）-吡啶翁环的结合物。有研究证明，CML 是抗 AGEs 抗体识别的主要结构。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综
16、撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样虽然 AGEs 的实际化学结构尚不清楚，且呈异质性，但它们具有至少一个共同的结构成分和共同的抗原决定簇。AGEs 的共同特点是，不可逆性，呈棕褐色，具有特征性荧光光谱和同蛋白质等大分子形成交联的能力（交联性） 。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢
17、舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样3 AGEs 的检测方法晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样由于 AGEs 化学结构不明和呈多样性，
18、而且无商品试剂盒可供临床使用，因此血清和组织 AGEs 水平的检测尚有一定困难。检测 AGEs 的主要方法有：（1）放射免疫分析法。它检测 AGEs的灵敏度高，但对抗 AGEs 抗体纯度的要求很严格；（2）放射受体分析法。本方法的特异性、精确性和重复性均很好，但检测时须用较大量放射性同位素，易造成环境污染，故在普通实验室难以应用；（3）荧光光谱法。AGEs 在 Ex370/Em440nm 有特征性吸收光谱，故荧光光谱分析是测定 AGEs 较常用的方法，通过荧光测定可大致估计体内 AGEs 的实际水平，可能与 AGEs的变化趋势，但有时会低估 AGEs 的的实际水平，可能与 AGEs的有些结构不
19、具有荧光性质有关。由于体内尚存在其他荧光物质，可能影响 AGEs 的荧光测定，故荧光光谱法测定 AGEs 尚缺乏特异性。戊糖苷在 Ex338/Em385nm 波长下有特征性光谱，可用以测定戊糖苷水平；（4）酶免疫法。本法是近年来发展起来的 AGEs 检测技术，具有特异性高、精确性好、简便、快速和可在普通实验室应用等优点，已成为目前检测 AGEs 的常用方法。但抗体制备和分析方法的标准化等问题尚有待提高。以下主要介绍用酶免疫技术检测 AGEs 的有关问题。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白
20、求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样4 测定 AGEs 的酶免疫技术晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期
21、糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样4.1 AGE 修饰蛋白质（免疫原）的制备由于 AGEs 的化学结构尚未阐明，很难获得其真正纯品，因此难以直接用 AGEs 作为免疫原。目前多使用在体外糖基化体系（含葡萄糖等还原糖和蛋白质）中制备的 AGE 修饰蛋白质（AGE-Protein）作为免疫原。早年 Nakayama 等用 AGE 修饰钥孔 血蓝素（Keyhloe limpet hemocyanin, KLH） 、牛血清白蛋白（BSA）和核糖核酸酶（RNase）作为免疫
22、原，免疫豚鼠制备出抗 AGE 多克隆抗体，并证明这些抗体对 AGEs 的共同抗原决定簇是特异的，而与早期糖基化产物不发生反应。此后，Horiuchi 等用 AGE 修饰BSA（AGE-BSA）作为免疫原，制备了抗 AGE 多克隆抗体和单克隆抗体。这些抗体与 AGE 修饰的几种蛋白质均发生反应，而与FFI 及 pyrraline 不发生反应，证明 AGEs 中确实存在共同结构。但这种共同结构是什么，迄今未被阐明。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）
23、候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样已经证明，在多种 AGE 修饰的蛋白质中，以 AGE 修饰核糖核酸酶（AGE-Rnase）作为免疫原免疫动物产生和抗体效价高，特异性强4。AGE-Rnase 的制备：一般用 25mg45mg rnase与 1mol/L 葡萄糖溶于 0.2mol/L 磷酸盐缓冲液（Ph7.4）中，除菌后 37，暗处孵育 90 天。制备包被等用的 AGE-BSA 则
24、用50mgBSA 与 0.5mol/L，葡萄糖溶于 0.2mol/L 磷酸盐缓冲液（Ph7.4）中，除菌后 37，暗处孵育 60 天4。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样4.2 抗 AGE 多克隆
25、抗体的制备4 由于以 AGE 修饰蛋白质作免疫原的特殊性，制备抗 AGE 抗体的方法与一般制备抗体的方法有所不同。AGE-Rnase 与完全福氏佐剂等量乳化后，经家兔皮内多点注射，每周 1 次，共 4 次。休息 2 周后，将 AGE-Rnase 与不完全福氏佐剂等量乳化，加强注射 1 次。末次注射后 10 天采血分离血清，检测抗体效价。我们用上述方案制备抗AGE 抗体时，基础免疫共进行 6 次，如强免疫 1 次，所得抗体效价较理想5。为获得高效价、高亲和力的抗体，所用的抗原要纯，免疫过程不能急于求成。原则上应以小量抗原多次注射，较长时间免疫动物。我们体会，由于免疫过程的长短和动物个体差异等原因
26、，所得抗血清的效价往往相差甚大5。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样4.3 用竞争性 ELISA 检测 AGEs 用竞争性 ELISA 检测血清和组织中 AGEs 水平是目前最常用的方法。其基本原
27、理是：固相抗原 AGEs（AGE-BSA）与待测标本中 AGEs 竞争地结合有限量的抗体（抗 AGE-Rnase 抗体） ，结合到固相上抗体的量与标本中AGEs 的量呈逆相关。基本操作步骤是，用 AGE-BSA 包被酶标测定板，封闭，加入待血清和标准物（AGE-BSA） ，再加入抗 AGE-Rnase 抗血清，最后加入碱性磷酸酶（ALP）标记的羊抗兔 IgG和酶作用底物，显色后用酶标测定仪测定吸光度。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭
28、焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样有人用时间分辨荧光分析法检测血清 AGEs 浓度。其原理同竞争性 ELISA 法，只是把 ALP 的作用底物改为 5-氟水杨酸磷酸酯（FSAP） ，后者在 ALP 作用下水解为 5-氟水杨酸（FSA） 。FSA与三价铽（Tb3+）形成具有强荧光的三元螯合物，再在时间分辨荧光分析仪上测定其荧光值。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临
29、床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样竞争性 ELISA 也可用于测定循环中血红蛋白-AGE（Hb-AGE） 。Hb-AGE 是体内组织被 AGEs 长期修饰的标志，它作为更长期的血糖控制状况的指标比 HbAlc 更优越6，有可能作为一项新的糖基化指标在临床上应
30、用。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样4.4 AGEs 的表示单位和标准化 目前使用竞争性 ELISA检测 AGEs 最大的限制是，尚无通用的 AGEs 表示单位和绝对标准。以往用两种方法定义 A
31、GEs 单位：一种是 AGE-蛋白质浓度法，即 1U aGEs 等于 1g AGE-BSA 的 B/Bo试验管 OD-背景OD（不加抗 AGE 抗血清）/总 OD（不加标准 AGE-BSA）-背景OD。另一种是 50抑制法，即将引起抗 AGE 抗体结合到吸附AGE-蛋白达 50抑制的 AGEs 量，定义为 1U aGEs。这两种表示AGEs 单位方法的主要缺陷是，不同批次或不同实验室所测得的AGEs 结果难以比较。为克服上述缺陷，Mitsuhashi 等7提出用正常人血清（NHS）来标准化 AGEs 测定。因为 NHS 中 AGEs 水平处在狭窄的范围，可用正常人血清平均 AGEs 值作为通用
32、的AGEs 测定标准。NHS 法定义的 AGEs 单位是在竞争性 ELISA 中等于 1：5 稀释的 NHS 引起抑制的量，即 NHS 中 AGEs 值被定义为5U/ml。用 NHS 法定义 AGEs 单位的优点是，NHS 中 AGEs 是自然形成的。不象前述两种定义方法，此法定义 AGEs 单位不取决于吸附性抗原和 AGE-蛋白质，也不取决于抗 AGE 抗体。而且这种标准品易于获得，所测得 AGEs 值在测定批次之间或实验室之间具有可比性。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学
33、基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样4.5 抗 AGEs 单克隆抗体由于单克隆抗体（单抗）具有高度特异性和均一性，抗 AGE 单抗可能比抗 AGEs 多克隆抗体（多抗）优越。然而，由于 AGEs 呈多样性，其真实化学结构不明，抗AGEs 单抗不能识别目前已提到的一些 AGEs 结构。另外，单抗仅能识别单一抗原位点，进行微量抗原（如 AGEs）检测时，
34、其灵敏度往往不如多抗。我们的研究也证明，用 AGEs 单抗测定血清 AGEs 时灵敏度不及多抗。但在免疫组织化学研究中，AGEs单抗似优于多抗。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样4.6 组织中 A
35、GEs 定量和定位 应用抗 AGEs 抗体和竞争性ELISA 法可测定组织中 AGEs 水平，检测前组织标本须进行预处理3。利用抗 AGEs 单抗或多抗及免疫组织化学方法，可对组织中 AGEs 的分布进行定位检查。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝
36、爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样5 AGEs 的致病作用和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样AGEs 具有广泛的致病作用。AGEs 形成后引起蛋白质分子间广泛交联，致使
37、蛋白质结构、机械强度、溶解性和配位结合等性质均发生改变。体内多种蛋白质糖基化可从多个方面影响机体，如引起血管通透性增大、血管基底膜增厚和细胞外基质积聚等。AGEs 与其细胞表面受体（RAGE）结合，通过趋化和活化单核巨噬细胞，激活转录因子 NF-KB，促进细胞因子和组织因子的释放，灭活一氧化氮和产生氧自由基等途径，参与糖尿病慢性并发症的发生和发展3,8,9。由于 AGEs 的不可逆性，即使高血糖被纠正后，AGEs 水平也不能回复到正常，而继续在组织中累积。从组织 AGEs 自然解释出的反应中间物，如不能经肾脏消除，可再次结合到其他结构上，发生 AGEs 的“第二次”或“第三次”生成3。晚期糖基
38、化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样糖基化反应在正常机体即缓慢进行，AGEs 水平随年龄增长而缓慢增加。但在老化过程，特别是在糖尿病持续高血糖情况下，这一反应的速度显著加快，AGEs 形成量明显增多。现已证
39、实，AGEs 在动脉粥样硬化、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、早老性痴呆（Alzheimer 氏病）和老化性病变的发生中起重要作用10。体内 AGEs 慢性蓄积与动脉粥样硬化之间有明显因果关系，AGEs 能启动和/或加重动脉粥样硬化，而不取决于糖尿病或血脂异常11。血清 AGEs 水平与糖尿病肾病早期肾小球形态改变即明显相关，并且血清 AGEs 浓度可预示本早期肾脏病变12。给予 AGEs 的体内研究证明，AGEs 能直接损害肾脏功能和结构，引起类似人类糖尿病肾病的肾脏改变13,14。皮肤AGEs 水平与临床前期的糖尿病肾病及早期视网膜病变程度密切相关15。近年研究还证明，在终末期肾脏疾病的糖尿
40、病患者和非糖尿病患者，其血清和组织 AGEs 水平均明显升高3，可能由于 AGEs 经由肾脏清除减少，致使体内 AGEs 蓄积。最近有人16报道，类风湿性关节炎患者的血清戊糖苷水平明显增高。可见 AGEs 在体内蓄积并不仅仅见于糖尿病高血糖状态。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概
41、女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样AGEs 在糖尿病慢性并发症和某些疾病发生中的作用已引起人们重视。作为一项新的临床指标，AGEs 检测对阐明这些疾病的发病机制和判定治疗效果有一定价值。晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确
42、遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样参考文献晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样1 brownlee M. Diabetes Care, 1992；15:183
43、5-1843 晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样2 wu JT. J Clin Lab Anal, 1993；7:252-255 晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意
44、义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样3 vlassara H. Kidney Int, 1996； 49:1795-1840 晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册1999 年第 20 卷第 6 期
45、白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样4 makita Z, Vlassara H, Cerami A, et al. J Biol Chem, 1992；267:5135-5138 晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基
46、础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样5 候芳玉，李才，苗春生，等。中国实验诊断学，1998，2（5）：262 晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130
47、021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样6 wolffenbuttel BHR, Ciordano D, Founds HW, et al. Lancet, 1996；347:513-515 晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李
48、才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样7 mitsuhashi T, Vlassara H, Founds HW, et al. J Immunol Methods, 1997；20；79-88 晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审
49、校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样8 vlassara H, Bucala R, Striker L. Lab Invest, 1994；70:138-151 晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（130021）李才审校 摘要 晚期糖基化终末产物（advanced g 估妥者孪童亏毡矩抬燕姚庞悉菲巢舷谚侍物木钟概女事然拄确遣喜霄忙勒爵巢啮畜埔丝爷综撅想铬淤断俗糙仰递鞭参裔篓僵殴价翻跑痕教巴啊狗样9 bucala R, Vlassara H. Am J Kid Dis, 1995；26:875-885 晚期糖基化终末产物的检测和临床意义晚期糖基化终末产物的检测和临床意义 国外医学临床生物化学与检验学分册 1999 年第 20 卷第 6 期 白求恩医学大学基础医学院（长春 130021）候芳玉 郭焱综述 白求恩医科大学应用基础医学研究所（13002
