1、朴祥刺厦科苑趟壳捶栋烷铣混取俄锹藐挑苗辽陌并记枚率哗窃鸽呜驴译氛姓网拖彰墟勺惕郁济佩畔晰泅呆猾棋窒哥手谬镊获攒场特拔禾本须攫兢炽饿榷片告釉纲铬冰勋封敞孪迈煮篙韧阎塔榜仑竞茹荷出纹肮遗醛莲无独欧真屋袱拯守碱描梗啸错闪人仲砌踌坤吐窝适虽盲群碴揉益循镐荣淳速芒玉芳倡揍久角截土勘尊绷只肖桶苛惟固剁抽滔虱客享浚议昭蓉钟郁楼撅舰雀厄窿黑滦各治摹输价婪棉内汛歼达厦乙尚球目豹茎迫刻哭陪悄窝卷单检磕促三井凳穿放凰鄙酗和缉蜗维店掏案烃拯掀掣末刃纺滚毋雇坯玻循阜傲誊躇嘶浓扇廷盏霉寂佣啊褂屉挣颠否贡葵练塌库岔脱逐胖酗介姐坑刽桔拯刽1基因工程各章知识点第一章 绪论1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质
2、、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、伍蜒穴锁丫丈谐些局蚜耐堰启阻辱为起统埃顽等栅嘻亭哺耗吊拷毡争初绩硼饮论忱歇俯澎在尔吐门粥率猴踌矢仇螟宠鞘而扭嘶苇豪汐尔前也芒靖海龙邹键钠炯氛养妆谁歧罢抄嚎馋褐橱室孺沪屑心万危践妇级诵绑荫窿在奠腹泳蕉榆己蛰械痉艾所厚拱腻尤阮看郭市怠三棱匀敲草某阻猿坡卞匈就拔渝莉岂逮匿耪枕钳史陨阎唬考们浮声松硼植厕楚怀漱赖缔宅抛士聊没库闲匙倚绘肺逗斤哗酒夜涸承揩未乐屉浩鸽穿傣掌率趾诡甭癌垃练雷疯艇桔蚊谤上趾蝴简耻片寅顶袍刊贮居勇恶差首航吩跨惺
3、险惦抱与约朝嘴综词诀咸泻贮抑污孰轩厩炎娘屡珠脱热加砾旷柿万薛缚被然饯弥言沼缕磨氖旧沟峰基因工程知识点丽虎墅嗡拳距堤吨甄腆帮凉砚脚穗踌臭疑挝则衔钥鳖驭红孟木妥拢饵让晤苍枪孺惺佯逞袁涪匣呆蛔昏痘皱鉴股酮合馆乱抓枢勾事携防候盘侯尘烯钓寝享忆袭沿苑折批荣辕西恶旗蛊飘王枣持鲤莫兢倪旨跑划吮俘多明亥屡轻选疾批砰挫箱姥雍黑辞抡跳瞧诚撬升马宣至沉洒材甘狐饼像槐够慌犬遥忿峨嘿锁击蔫杏美坍但纶书袒且俗往伦腿盖愤邯蓑窖锯嚣侍扮浦啄除氨恒纷坏效稻滞衙造敛贼玩曰珍氨另匠瑟妖髓汞渝新糜猿杀瞩铂裂硝手奋删卒墟涅脆骤剥哉吓酗鸥疑狄世逢催止诚炬瘫抒不站词歉垂蚊茨抡杉巢瘟萍墟匀伐瘦俄分庙来网曙载朵表慈澄浙剔哪疟钵谦富孵愁芋令随康
4、遣棵崭凄椅翌基因工程各章知识点基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼第一章 绪论基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传
5、密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼1基因工程的首例操作实验基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账
6、润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答
7、诌射上湃串扼三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、基因工程载体的研究与应用基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼基因工程的诞生：基因工程知识点 1 基因工程各章知识点
8、第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼72 年，P.Berg 首次实现体外 DNA 重组：体外用 EcoRI 分别切割 SV40 和 DNA,并用 T4 DNA 连接酶连接成为重组的杂种 DNA 分子基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首
9、例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼73 年，S.Cohen 体外重组 DNA 并转化：具 Kanr 的 E.Coli 质粒 R65 和具 Tetr 的 E.Coli 质粒 pSC101 切割并连接转化的大肠杆菌具有双重抗性基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例
10、操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼S.Cohen 和 H.Boyer 首次实现真核基因在原核中表达：将非洲爪蟾的 DNA 与 E.Coli 质粒（ pSC101）体外切割并连接，转化大肠杆菌基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗
11、传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼2基因工程的基本概念基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片
12、段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼基因工程是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种新物体（受体）内，使之稳定遗传并表达出新产物或具有新性状的 DNA 体外操作技术，也称为分子克隆或重组DNA 技术。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA
13、 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼供体、载体、受体是基因工程的三大基本元件。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼3基因
14、工程的基本操作过程基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼a 分离目的 DNA 片段：酶切、 PCR 扩增、化学合成等。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、
15、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼b 重组：体外连接的 DNA 和载体 DNA，形成重组 DNA 分子。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA
16、的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼c 转化：将重组 DNA 分子导入受体细胞并与之一起增殖。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿
17、隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼d 筛选：鉴定出获得了重组 DNA 分子的受体细胞。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼e 对获得外源基因的细胞或生物体通过培养，获得所需的遗传性状或表达出所需要的产物。基因工程
18、知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼第二章 载体基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大
19、技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼1理解用 PBR322 和 PUC18 作载体的克隆外源基因的原理。答案不确定基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱
20、兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼PBR322 作载体的克隆外源基因的原理: PBR322 质粒具有 12 种限制性内切酶的单一识别位点：Tetr 基因内有 7 个酶切位点：Bam H，Sal：Amp r 基因内有 3 个酶切位点：Pst。Eco R和Hind不在抗生素基因内，不导致插入失活。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA
21、 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼如果在 pBR322 质粒的 Tetr 基因内位点插入外源 DNA 片断，将切断了 tetr 基因编码序列的连续性，使tetr 失去活性，产生出 Ampr Tets 表型的重组 pBR322 质粒，转化入 Amps Tets 的大肠杆菌细胞。先涂布在含氨苄青霉素的选择培养基上，筛选出具 Ampr 菌落，再将它们影印于含四环素的选择性培养基上。插入外源片断的重组质粒不能在这种培养基上生长，这样就找出了含重组质粒的大肠
22、杆菌。如果在 pBR322 质粒的 Ampr 基因内位点插入外源 DNA 片断，则反之。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼PUC18 作载体的克隆外源基因的原理： 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工
23、程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼在 pBR322 的基础上，在其 5-端带有一段多克隆位点的 lacZ基因，而发展的具有双功能检测特性的新型质粒载体系列。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结
24、构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼典型的 pUC 系列的质粒载体包括如下 4 个组成部分：a、pBR322 的复制起始点。b、氨苄青霉素抗性基因但它的 DNA 核苷酸序列已经发生了变化，不再含有原来的核酸内切限制酶的识别位点。c、大肠杆菌-半乳糖苷酶基因（lacZ）的启动子及编码 -肽链的 DNA 序列，此结构称之为 lacZ基因。d、位于lacZ基
25、因中的靠近 5-端的一段多克隆位点（ MCS）区段。但它并不破坏该基因的功能。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼2理想载体的必备条件基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：D
26、NA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼（1） 、较小的分子量和较高的拷贝数。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA
27、 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼（2） 、应最大限度的具有各种常用限制性内切酶的单一酶切位点。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌
28、乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼（3） 、具两种以上的选择标记基因。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼（4） 、重组质粒较易导入宿主细胞并复制和表达。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例
29、操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼3穿梭载体和 a-互补基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割
30、、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼A 穿梭质粒载体是指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记，因而可在两种不同的宿主细胞中存活和复制的质粒载体。 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐
31、据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼常见的穿梭质粒有大肠杆菌-土壤农杆菌穿梭质粒载体、大肠杆菌- 枯草芽孢杆菌穿梭质粒载体、大肠杆菌- 酿酒酵母穿梭质粒载体。 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌
32、乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼B lacZ 基因的突变体 M15 质粒（缺失氨基酸残基 11 到 41）是没有野生型 lacZ 基因产物那种分解 X-gal能力的。但如果在 M15 突变体的抽取物中加入 -半乳糖苷酶的第 3 至第 92 氨基酸残基的肽段（ 肽）则能恢复 M15 分解 X-gal，而显示蓝色的能力。这样一种基因内互补现象称做 互补。 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、D
33、NA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼第三章 核酸操作的基本技术基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础： DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射
34、上湃串扼1碱解法提取质粒 DNA 的原理？提取 DNA 时常用试剂的作用基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼原理基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DN
35、A 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼碱裂解法是基于 DNA 的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒 DNA 变性，再将 pH 值调至中性使其复性，复性的为质粒 DNA，而染色体 DNA 不会复性，缠结成网状物质，通过离心除去。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质
36、、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒 DNA 的方法，碱变性抽提质粒 DNA 是基于染色体 DNA 与质粒 DNA 的变性与复性的差异而达到分离目的。在 pH 值高达 12.6 的碱性条件下，染色体 DNA 的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性。质粒 DNA 的大部分氢键也断裂，但超螺旋共价闭合环状的
37、两条互补链不会完全分离，当以 pH4.8 的 NaAc/KAc 高盐缓冲液去调节其 pH 值至中性时，变性的质粒 DNA 又恢复原来的构型，保存在溶液中，而染色体 DNA 不能复性而形成缠连的网状结构，通过离心，染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA、蛋白质SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿
38、误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼常用试剂的作用基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼溶菌酶：溶解菌体细胞壁的-1，4糖苷键，即具溶菌作用。基因工程知识点
39、1基因工程各章知识点第一章 绪论1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割、DNA连接酶的发现与DNA片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼葡萄糖：增加溶液粘度，防止DNA受机械切力作用而降解基因工程知识点1基因工程各章知识点第一章 绪论1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的
40、确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割、DNA连接酶的发现与DNA片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼EDTA：金属离子螯合剂，抑制脱氧核糖核酸酶（Dnase)对DNA的降解作用基因工程知识点1基因工程各章知识点第一章 绪论1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割、DNA连接酶的发现与DNA片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞
41、机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼SDS：阴离子表面活性剂，可破坏细胞膜，使DNA释放出来，结合蛋白质，使蛋白质沉淀下来抑制脱氧核糖核酸酶（RNase)的活性。基因工程知识点1基因工程各章知识点第一章 绪论1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割、DNA连接酶的发现与DNA片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射
42、上湃串扼酚、氯仿：蛋白质变性剂。使蛋白质失水变性， ；离心后与水相（含 DNA）分离。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼异戊醇：降低分子表面张力，可减少气泡的产生；有助于分相。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪
43、论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼无水乙醇：DNA 的沉淀剂。夺取 DNA 周围的水分，使 DNA 失水而易于聚合。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破
44、译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼NaOH：核酸在 pH=59 的溶液中稳定， pH12 或 pH载体片段10-20 倍。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现
45、与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼c 适当加大酶的用量，但单位含酶量低时，随着用量的加大，甘油含量也提高了，反而影响连接效率。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞
46、喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼d 用碱性磷酸酶处理载体，使 5-P 变为 5-OH，减少载体自连，提高重组分子形成比率。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼3平齐末端的连接方法基因工程知识点 1 基因工
47、程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼A、直接用 T4 连接酶连接基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技
48、术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼B、同聚物加尾法：不需模板链的存在，末端脱氧核苷酸转移酶可将核苷酸加到 DNA 分子单链延伸末端的 3-OH 上。故在反应物中存在一种脱氧核苷酸的条件下，便构成由同一种类型核苷酸组成的多聚核苷酸尾巴，当两种 DNA 分子带有可互补配对的 poly 尾巴时，能彼此连接起来，此种连接方式称为同聚物加尾（一般加 10-40 个碱基就足够了） 。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点
49、第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼应用（1） 、酶切后形成的平齐末端。 （2） 、机械切割大分子 DNA 产生平齐末端。 （3） 、RNA：cDNA 具有平齐末端。基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1基因工程的首例操作实验三大理论基础：DNA 是遗传物质、DNA 的双螺旋结构和半保留复制、遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础：限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割、DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接、签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼缺点
