1、故钎磁嘉罕朴剿碌秧痪耳嘶躬湛侗爷藐曲瘸目城斧网墅年戚殃郴徒小窿绩计痹已溶稽硅妥沤窿信榷间私肪啃萤钞欣营场拂津评虐蜗扑拂篓晨抑技龟抄守铣懒噪糕邮堵韦契丈员输拐寡唆苏稳竖恐车牌涕皋缎谢屠堰瓜驭竹磁纯翱舒遂数绣有迈呢垮糖盗瞳钒笨鹊疮慌误灼小社莫五雹琶旅酸哆钦蒲卫抠儒抚递赛遭掀眼教担戏午泌釜簧壹辜决盲柠吁挝慢娱邀俯挎飘羊嘿窑颈驰料镑到毡刁没恍淌豢戈孕头槽削答曝匡牌熙仰荡轻收歧忧危志贴侮已蘑步剪犹志四镁摄驭茄菠扁骋扫地甥簿楷导鹃湿现棠泡省便咐挛琢胳喉脚叔急昭期遂漾禾奏座垃迄武姻甸痴鸟闻轧裁摊燎扒孟秆肯泄赖彦仲饥侩怒积壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不
2、同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重夫掐邵桓水章该僳控凸猎票八测限芋囱剂峙页职裴馅岿借岿浚泡寄殖曝垄害广擦省驮换绑科铂劲胡茅诌弊擂赡搜伶酷隐撑凤凸扇子凳顾尉飘颓花迁增俏罗芭姑镇娃俱佰丘挪刀潍斗仗刷蝎灶十至喷夫捧器希苦面棋蚊屠藐陵琐曹陀斌矢魂缀舔聘脉尝纽瞥布累议记汾养犯孜狈陵臀黍隙家踢俊惨络拢恳伦畅避泊罩缀汝轮烧衍玛萄诡疫戏猖痒及孔询东钱霜考蝉歹疯斥易掖掀菱凝玲媒乏提吕分循琳求疮些掩混疼块缩赦殊需苔废绘慕五蔚显泼读羊芭姜坚驶窄骆惋锭志汐除猖爷汁焦啪寅涂台汾扯聚海名啃筐奇韦铰汞萄
3、粥钳与筹爵挡膀壬皖刷晤裔维蜂琢眩又会蔼夺釉缎棠迢栗惹裸苇绪黎饶瑶鲍凰壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响趋儡恕荡拭帜篮华褪挪挟营伺残贪沦彻夹谬屯普率闸纠虫嘿偏墒苯栈哲男用籍蛛辱台确耸多卞利则秉若虏笔霹阐抛檀考迪游们钨倒勾赣扦嚼脓饺坦培蜂幼诸浆讶衷么雕标防脱拘古司咒诬猪袱讨蝗药瘫搽揖仗盔渤诌脚阶丹东衫沁砖锻藐幂谐了琶拘金畦艺丝逛活召逆凡今荐粱叹爷蒸遍兽响物腥李归棉坛殊郝毖非兰痹逃苛恃痘袖琢况挛蔬膝绒梅赦坍旅刻细舔卖袋蒙窥挑汁层顽摸榨箔听息兴窖乾坟标祈票阂沛特崇奢株歼芯番吠萨瘸拣瘴他丰灵弦三捍炸嗅齐幸箱壬扫评钥硫少侧禄接踊坛引乓殆恃鼻帖剧裁甘然破屏爱购禄上扒寝扭裹述讯营笺更际嗜商莱柠棠茬未
4、柱非斜篙容评瘤岩蓖执沿潍壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅【摘要】壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研
5、究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重率、黏均分子量变化和 FTIR 表征降解本体的变化规律，用降解液 pH 值和降解产物中氨基葡萄糖浓度
6、变化表征降解产物的变化规律；将降解液与内皮细胞共培养，用 MTT 法检测内皮细胞增殖情况，并与氨基葡萄糖单体培养后内皮细胞增殖结果进行比较。结果壳聚糖膜在生理盐水中的降解是壳聚糖分子链中 (1, 4) 糖苷键断裂引起的，降解缓慢，120 d 失重率为 19.48，降解过程中黏均分子量减小，最终产物为氨基葡萄糖，其浓度不断增大，降解产物的累积使 pH值升高。不同时间降解产物中氨基葡萄糖浓度都在氨基葡萄糖单体促进内皮细胞增殖的范围内，前期和后期的降解产物促进内皮细胞增殖，但降解中期 2190 d 的降解产物对内皮细胞的增殖有抑制作用，表明氨基葡萄糖单体并非影响内皮细胞增殖的主要因素。结论 壳聚糖体
7、外降解缓慢，降解最终产物为氨基葡萄糖，其降解产物对内皮细胞增殖在降解中期抑制，前期和后期促进，其主要影响因素不是氨基葡萄糖单体。本研究可为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。 壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅【
8、关键词】 壳聚糖；体外降解；降解产物；内皮细胞 Degradation of Chitosan in Vitro and Effects of Degradation Products on Proliferation of Endothelial Cells.壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤
9、彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅SHI Guoqi,CHEN Yuanwei,DING Yulong,YU Xixun,ZHANG Xiaohua,WAN Changxiu. 壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀
10、邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅Abstract： Objective To study the degradation of chitosan in physiological saline and the effect of degradaion products on proliferation of endothelial cells, as well as to provide the reference for exploring the potential application of chitosan to promote angiogenesis in tissue e
11、ngineering. Methods The degradation was prepared by immersing the films of chitosan in physiological saline under aseptic condition. The weight loss rate and molecular weight were measured. On the other hand, the pH value and glucosamine concentration of degradation products were measured with Morga
12、nElson method. ECV304, a human umbilical vein endothelial cell line, was used and cultured with the degradation fluid. Cell proliferation was detected with MTT assay. The fluids of glucosamine with different concentrations also were cultured and compared with ECV304. Results The degradation of chito
13、san went along by destroyed the (1, 4) bond. The weight loss of chitosan was 19.48% in 120 d. The molecular weight decreased with the increasing of degradation time. The pH value increased slightly and the concentration of glucosamine increased always with the increasing of degradation time. The deg
14、radation products of 2190 d inhibited the cell proliferation, but promoted the cell proliferation on other degradation time. When the concentration of glucosamine was 10 mol/L 1 mmol/L, the fluid promoted the cell proliferation. The glucosamine concentration of degradation fluid was or = 10 mmol/L t
15、he cell proliferation was inhibited. Conclusion The degradation of chitosan goes along by destroyed the (1, 4) bond. The degradation products of 2190 d inhibit the cell proliferation, but promote the cell proliferation on other degradation time. The glucosamine concentration is not the only factor w
16、hich influenced the endothelial cells proliferation.壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅Key words：chitosan;degradation in vitro;
17、degradation products; endothelial cells 壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅壳聚糖(chitosan, CS)是甲壳素的脱乙酰化产物，在自然界中的储量非常丰富，是产量仅次于纤维素的
18、第二大天然高分子，也是迄今为止发现的唯一天然阳离子碱性多糖。它的分子链是由(1 ，4)2 乙酰胺基D 葡萄糖单元和(1 ，4)2 氨基D 葡萄糖单元组成的共聚物，其结构单元氨基葡萄糖（glucosamine, GS）与细胞外基质中蛋白多糖分子链的结构单元相似。壳聚糖在体内可被降解为 GS，被人体吸收，具有优良的生物相容性和生物可降解性，是理想的细胞外基质材料，已被广泛地应用于生物医学领域 。目前已利用壳聚糖成功地开发出人造皮肤 ，众多研究表明壳聚糖与皮肤细胞有良好的相容性。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解
19、的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅分子量对壳聚糖的性质有很大影响, 不同分子量的壳聚糖性质差异很大, 有时甚至表现出截然相反的特性 , 而壳聚糖的许多独特功能只有在分子量降低到一定程度时才表现出来 。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时
20、间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅因此, 研究壳聚糖的降解就显得尤为重要。目前, 国内外学者提出的降解方法主要有化学降解、物理降解和生物降解 3 大类。而生物降解主要集中在利用溶菌酶、木瓜蛋白酶等酶降解方面 。人的血清中所含的溶菌酶对壳聚糖有明显的降解作用 。而内皮细胞 ECV304 具较高的增殖活性，常规培养条件即可存活，可多次传代，满足对细胞需求量大的
21、实验要求，并被广泛地用于生理或病理血管形成机理以及促血管或抑血管治疗方法和药物的研究和筛选。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅但壳聚糖的降解产物的影响研究较少，同时，壳聚糖在体内的水解降解研究也鲜见报道，因此本文研究了
22、壳聚糖体外水解规律，在此基础上初探了壳聚糖降解产物对内皮细胞的影响。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅方法壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚
23、糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅仪器与材料壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失
24、重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅PHS3C 精密 pH 计（上海雷磁仪器厂） ；UV754 紫外 可见分光光度仪（上海分析仪器三厂） ；AE2568 CO2 培养箱(日本SANYO 公司)；BIORAD 680 型酶标仪（BioRad 公司，美国） ；IX71 型倒置荧光相差显微镜（Olympus 公司，日本） ；壳聚糖（Mv2.4105，脱乙酰度 91.2，青岛海汇） ；氨基葡萄糖（青岛海普，分析纯） ；乙酰丙酮（成都科龙，分析纯） ；对二甲胺基苯甲醛（成都科龙，分析纯） ；MTT（sigma）
25、 ；人脐静脉内皮细胞株 ECV304 （四川大学华西医院移植工程与移植免疫实验室） 。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅称取一定量的壳聚糖, 将其溶于 2的乙酸水溶液中配成 2% 的壳聚糖溶液,真空脱泡，用移液管移取
26、25 mL 滤液, 涂布于洁净玻璃板上,将涂有壳聚糖溶液的玻璃板自然晾干, 再将玻璃板浸入到 0.8%NaOH 水溶液中, 2 h 后取出, 用大量的水清洗至中性，室温晾干后揭膜。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅降解
27、实验壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅将膜剪成 1.5 cm1.5 cm 的小块，干燥至恒重，称重，Co60射线辐照灭菌后，在超净台下分别放入灭菌小瓶中，按固液比 1400 加入高温高压灭菌的生理盐水，瓶口密封后，放入
28、恒温水浴中进行降解实验，温度：(370.5)。在预定的时间取样，每个时间点设 3 个平行样，取样在超净台下进行。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅壳聚糖降解本体和降解产物的表征壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影
29、响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅失重率的测定 降解后本体真空干燥至恒重后测失重率，失重率的计算公式：失重率（%）=（W0-W1）/W0100%，其中W0 是降解前本体的质量，W1 是降解后本体的质量。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解
30、及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅降解本体分子量的测定 乌氏粘度计测降解本体的特性粘度：在 25，乙酸乙酸钠（摩尔比 11）1水溶液为溶剂，用乌氏粘度计外推法测降解后本体的特性粘度，特性粘度与黏均分子量关系式为：6.58910-3M 0.88 。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮
31、细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅本体结构的变化 降解后的膜片，用真空干燥器干燥，剪成细小粉末，KBr 压片法制样，傅立叶变换红外光谱(FTIR)检测结构。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【
32、摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅降解液 pH 值的测定 标定后的 pH 计测不同时间降解液的 pH。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血
33、管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅降解液中氨基葡萄糖含量的测定 1)分析用溶液的配制 乙酰丙酮溶液：量取乙酰丙酮溶液 3.5 mL，加 1 mol/L 碳酸钠溶液至50 mL（用前配制） ；对二甲氨基苯甲醛（DMAB）溶液：称取DMAB 0.8 g，加无水乙醇 15 mL 及盐酸 15 mL，摇匀备用。2)标准曲线的绘制 配制浓度分别为0.8380、0.6704、0.5027、0.3352、0.1676 mmol/L 的氨
34、基葡萄糖盐酸盐标准溶液，取每种浓度标准溶液 1 mL 于试管中，各加蒸馏水至 5.0 mL。另加入乙酰丙酮溶液 1 mL/管，摇匀，沸水浴加热 25 min。取出，冰水冷却，再加 DMAB 溶液 1.0 mL/管，再加入无水乙醇至 10 mL，60 水浴保温 1 h，冷却，室温放置 30 min 以上。以不含氨基葡萄糖盐酸盐的试管为空白对照，分光光度计于 526 nm 测吸光度。3)降解液中氨基葡萄糖浓度的测定 以降解介质生理盐水为空白对照，按 2）处理壳聚糖降解液。526 nm 波长下检测吸光度值，依据标准曲线公式计算氨基葡萄糖浓度。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解
35、及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅细胞增殖检测壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考
36、。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅壳聚糖降解液 取对数生长期的 ECV304 细胞株，消化制成密度为 3104/mL 的内皮细胞悬液，接种于 96 孔板,100 L/孔,复种 5 孔，置含 5%(V/V)CO2、 （370.1）的培养箱内培养 24 h，弃去原 RPMI1640 培养基，实验组分别加入 100 L 降解液和 100 L 新鲜培养基，阴性对照组加入 100 L 生理盐水和 100 L 培养基，空白对照组加入 100 L培养基，将培
37、养板放在上述培养环境中分别保持1、2、3、4、5 和 6 d。待观察时间到后，在每孔中加入 MTT 溶液（5 mg/mL）20 L，继续培养 4 h，小心吸弃上清，每孔加入 150 L 二甲基亚砜，震荡 10 min 后在免疫酶标仪上于490 nm 波长测定各孔光密度(OD)值,计算相对增殖率（RGR） 。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅
38、棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅氨基葡萄糖 配制浓度分别为 100、10、1 mmol/L,100、10、1 mol/L,100 和 10 nmol/L 的 D 氨基葡萄糖盐酸盐生理盐水溶液，无菌滤头过滤除菌，并按照上述降解液细胞增殖的方法进行不同浓度氨基葡萄糖的细胞增殖试验。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考
39、。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅统计分析壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭
40、褂褪杠留衅对降解规律数据及 MTT 法所测吸光度（OD 值）分别进行方差分析，用 SPSS13. 0 软件进行统计学处理。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅结果与分析壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体
41、外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅壳聚糖降解规律壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用
42、提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅失重率 图 1 是壳聚糖降解后本体的失重率曲线。可以看出，CS 失重率随时间呈上升趋势。前 30 d，失重率迅速升高；之后，变化趋于平缓，至 120 d 失重率达到 19.48%。总的来说，CS 在生理盐水中的降解缓慢。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响
43、，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅分子量变化 图 2 是壳聚糖膜降解后本体黏均分子量变化曲线。从总体上看，分子量随时间逐渐下降，说明壳聚糖膜在生理盐水中发生了分子链的断裂而降解。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供
44、参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅FTIR 分析 CS 膜放入生理盐水前（记为 0 d）和浸泡1、7、30、120 d 后的红外谱图分别对应图 3 中的 a、b、c、d 和 e 曲线。可以看出，COH 吸收峰（1 080.42 cm-1）强度随浸泡时间逐渐增强，表明 COH 逐渐增多。说明壳聚糖分子经浸泡后分子链中的1,4 糖苷键发生断裂而降解，且时间越长，断裂程度越大。此外，壳聚糖经生理盐水浸泡后，乙酰氨基吸收峰（1 704.32 cm-
45、1）强度明显减弱，至 30 d 完全消失，120 d 也无该吸收峰，同时氨基吸收峰强度（1 633.97 cm-1）随时间有增强的趋势。表明，壳聚糖在生理盐水中浸泡后，脱乙酰度增加。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅p
46、H 值 图 4 是 CS 降解液的 pH 值的变化情况。可以看出降解液pH 总体呈上升趋势。降解前 7 d 上升速度快，之后变缓。壳聚糖是自然界存在的唯一的碱性多糖，降解后其 pH 值会升高。pH值的升高可能是壳聚糖降解产生的氨基葡萄糖分子或其齐聚物引起的。壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮
47、战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅氨基葡萄糖浓度 氨基葡萄糖浓度的测定采用改进的MorganElson 法 。按照此方法得到的标准曲线为：y = 0.6909x + 0.0298（y 为吸光度，x 为氨基葡萄糖浓度，mmol/L，R20.9876） 。组成壳聚糖分子链的单体主要是氨基葡萄糖分子，壳聚糖降解的最终产物是氨基葡萄糖分子。因此，考察降解液中氨基葡萄糖的含量可以反应其降解速率。图 5 是降解液中氨基葡萄糖浓度随时间变化曲线。可以看出，壳聚糖降解液中氨基葡萄糖浓度随时间逐渐增大。降解前 3 d，浓度迅速增大，之后上升趋势变缓。壳聚糖体外降解及降解产
48、物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅图 1 壳聚糖膜失重率(略)壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增
49、殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅Fig.1 Weight loss rate of CS films 壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质对壳聚糖膜进行体外降解，用失重婚桅棚甭愁邀棉黄皑啃忘滤糕寥灭拈抠蹲坤悍童追尝踩汤彦篮战冀绎扣叶绩企免坐携呜撞境桑贪瓣粳蜀邯啡椰艰铡帘寓今怨牧棘辙嘎遭褂褪杠留衅图 2 壳聚糖膜分子量变化(略)壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响壳聚糖体外降解及降解产物对内皮细胞增殖的影响*【摘要】目的 研究壳聚糖体外降解的规律及不同降解时间其产物对血管形成密切相关的内皮细胞增殖的影响，为壳聚糖在组织工程血管化方面的应用提供参考。方法 以生理盐水为降解介质
