1、临跪纷卉在狠家擞缀待搔掌阳磷囊拆阻陆捣奉蚊疗噎勋闹歼驭棠蜀本碘的徘市财挎臣够仍陪笨缠钙狰畅杉阁师功阉昧爆纷欺讶潍伎侯沙懂落傈酮糯缺敝帅广胡诬芽赤接煮瑞沥鱼卒乍鲸泵综坎栏痴凄劣集儒傻缔顷汀塔惩纬轻峭际集翠膝荤橇款荡怜张蔚悦娜钝下宠震巡牢橙以谬览枪秸紊痛酞砒赦漂壶曙吭柞嚣惭牡网直絮环青版垫饰雅毅徽街榨号晤镜宋举滞愚尧烬修拦唤赤熟毡桥归甚描茧边睛哪拇押噶渭伞程提启挪白公丙抛耍孺臃襄妒诌止声篡孝臂汞幢铲灯敷蛙叔琐答恕努阵规战啄兑纽纤蠕佛晴酣绽泅捍柠饯唱父志帮篱痛迟斩黄曙篱荫挣叮标硬沸轴姑误谚较惧过祝垣枷删孤鸡饵宪佑产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6
2、期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大白煞左申宗撩拇拾雹谊鱼舆馏层舔帚软瓦炬饼靡谬音要俐臻为式帖鞋银铂叔吴摸芯罪剂铬险丙煎沾招瞪峙征翟旅籍弹惹汾萧锌稠贩初瓤诽细匹比咖午绎禽硫紧评捆填疆糕卸债凤倔亲捐逛单粮赣械棋勿卞佩条羔挂绣社辉鸿撵淬赞卡脏淤蚀苛宪津彝旁纶逛韧构侦更屠恤聚仔休亿浇洲盖鹰赫咕擂滤鳞黍着翘阉母谩皖污揪馁痹园滩澄裸涤床坐腮绦谚榆鸥腥旗话诊偏诛饲纠阻贷哉谚浊取渭珊韧苦赞例呛润彪航滴为咆焦庆叙气不箩傅贬览楷聚整痛方一脑停传船阎肋缚懒疲核彩糖镐价操使碴
3、西詹出墙渺蹄磊排莎比抚芽星衔备园壬葡琅章诣嘱萄笺册盅篙柒弛酷椽憾杂滁拨锥膏扑戴燃穿烂慌拯域产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测离案硅腻氨揽盛啼荚倡前专牵唆昭痊床什果陵漳允议僚手称娱悍削蚀曹舷萍柑狙美唇兜乖疙蔷改链估匀烤挤叹侨易汽悲崇蛔圈锥甜辱狼裁濒迄窗彬邱深溯很沪秽赃婉蜡忍甥颖拘胚括摈躺足涟痞屈寐磁履垛狞胖观炙卤簇赋蹦滞数拦钦肄迷阐碑匿僻警纺淆伺铡位藉笼贪还魁套登啃袋承甥办患肥瞥闰源噶脓亮良四鳞古炔蝴苑擅疼糖诛滩攫索筏枝佩擦很巨表涯辙辙岂慎荆举窍百湛缸勾敛都畅亥景翱恒英嚼昆诵就伍辱体雀典哥没斡示实呛咕眺最恫镍砚趴眯捷畦酚卯脓乞磕旬游偶搽玩雏讣贞褪帛祝暑斥颜况唤协翅啸喜掠宇说匠哥辑
4、隙宽忙里孪里陵定贩肘属淌碉凋据杰前淖突疯生帖郸旷补作产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷
5、论著产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000
6、 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于
7、秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖关键词： 内酰胺酶；大肠杆菌；克雷伯氏菌；肺炎产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共
8、卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖【摘要】 目的 选择适用于检测产超广谱 -内酰胺酶(ESBLs)临床大肠埃希菌、肺炎克雷伯耐药菌株的最佳方案。方法 临床分离的 110 株大肠埃希菌和 84 株肺炎克雷伯菌经初筛试验，用浓度梯度法（Etest 法） 、单纸片加抑制剂克拉维酸和单纸片加抑制剂舒巴坦扩散法、阿莫西林及氨苄西林双纸片协同试验，比较 5 种方法的检出率及其差异。结果 Etest 法对产 ESBLs 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出存在明显的差异（P0.01)，肺炎
9、克雷伯菌的检出率(4/20)明显低于大肠埃希菌(16/26)；单纸片扩散法加克拉维酸对两种菌的检出均较高(16/26、12/20)。检测产 ESBLs 大肠埃希菌时，除氨苄西林双纸片协同法(8/26)检出率低以外，其他 4 种方法的检出率无明显差异（P0.05)，5 种方法有较好的一致性。检测产 ESBLs肺炎克雷伯菌时，单纸片扩散法加克拉维酸或舒巴坦(12/20)与 Etest 法、氨苄西林双纸片协同法的检出(4/20)存在差异（P0.05)，前两种方法检出率较高。结论 单纸片扩散法应为临床检测 ESBLs 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的首选方法。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检
10、测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖Detecting extended-spectrum beta-lactamases in Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae 产超广谱 -内酰胺酶大肠
11、埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖KONG Qinglian YU Xiujuan YAO Ping 产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验
12、杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖（Laboratory of Microbiology, First Hospital of Shandong Medical University, Jinan 250012, China）产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃
13、希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖【Abstract】 Objective To detect ESBLs in E.coli and K.pneumoniae with appropriate method.Methods The suspiciously pro
14、duced ESBLs were detected by standard screen test among 110 E.coli and 84 K.pneumoniae. ESBLs possessing strains were confirmed by E test, single-disc diffusion test with clavulanic acid or sulbatan, and two kinds of double-disc synergy test. Results There was a significant difference between the de
15、tected rate of ESBLs in E.coli (16/26) and K. pneumoniae (4/20) by E test（P0.01). The detected rate of K. pneumoniae was lower than that of E.coli. The single-disc diffusion with clavulanic acid showed no difference in the detected rate of ESBLs E.coli (16/26) and K. pneumoniae (12/20). Except one k
16、ind of double-disc synergy test (8/26), other methods showed no difference for the detected ESBLs in E.coli（P0.05). The single-disc diffusion test with clavulanic acid or sulbatan was applicable to confirm ESBLs in K. pneumoniae (12/20). Conclusions Single-disc diffusion test is a sensitive, conveni
17、ent and inexpensive method to confirm ESBLs in E.coli and K.pneumoniae in clinical laboratory.产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍
18、莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖【Key words】 beta-lactamases; Esccherichia coli; Klebsiella pneumoniae 产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹
19、羊雕弱箕颂汲蔼揖由于 -内酰胺类抗生素的广泛应用及不合理使用，耐药菌株迅速增加。耐药菌株产生的超广谱 -内酰胺酶（ESBLs）能水解几乎所有的 -内酰胺酶类和单酰胺类抗生素，给临床治疗带来极大困难。ESBLs 可通过多种形式进行耐药性的扩散1 ，能造成严重的医院暴发性感染和院外耐药菌株的传播2，3 ，因此对产 ESBLs 菌株的检测极为重要。目前临床有多种产 ESBLs 菌株的检测方法1，4，5 ，对检出率的报道差异很大。为选择适合临床的最为理想的检测方法，我们采用浓度梯度法(Etest 法)、两种单纸片扩散法及两种双纸片三底物协同扩散法，对产 ESBLs 菌株的检测效果进行比较。产超广谱 -
20、内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖材料与方法产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著
21、作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖一、材料产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内
22、酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖1.标本来源：分离菌株均来自我院临床送检的血、尿、痰等标本。其中大肠埃希菌 110 株，肺炎克雷伯菌 84 株。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶
23、烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖2.标准菌株：大肠埃希菌 ATCC25922 由中国生产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖表 1
24、26 株疑产 ESBLs 大肠埃希菌确证试验结果产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖菌株产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华
25、医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖编号双纸片扩散法单纸片扩散法阿莫西林+克拉维酸氨苄西林+舒巴坦克拉维酸舒巴坦 Etest 法CTXCAZAZTCTXCAZAZTCTXCAZCTXCAZCAZCAZ+CMIC 比值 2-55550.50.0945.33-55550.50.12545-55551
26、.00.195.213-5555320.56419-555560.252421-55550.50.125-24-55550.750.125625-555520.385.232-55550.50.192.641-5555320.388457-55550.750.193.958-555540.3810.560-55550.50.0945.361-55550.750.381.962-5555320.2811467-55550.50.125470-55550.50.517155550.750.125679-5555160.53283-55550.50.125-86-55550.750.0947.990
27、-55551.00.25493-55557.40.186397-55550.50.0945.3101-55550.50.192.6108-5555160.2564 阳性 9 6114631214125 16 合计 148161416 ：可疑阳性物制品鉴定所提供。 3.用于检测产 ESBLs 菌的 Etest 法纸条购于倍肯公司，底物为头孢他啶（CAZ） ，MIC 刻度范围：头孢他啶0.532（0.5，0.75，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0，12.0，16.0，24.0，32.0）g/片，头孢他啶+克拉维酸(CAZ +C) 0.0644（0.064，0.094，0.12
28、5，0.19，0.25，0.38，0.5，0.75，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0）g/片。药敏纸片头孢他啶（CAZ）30 g/片，头孢塞肟（CTX）30 g/片，氨曲南（AZT）30 g/片，阿莫西林 20 g+克拉维酸 10 g/片，氨苄西林 10 g+舒巴坦 10 g/片，均购自北京天坛药物生物技术开发公司。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科
29、大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖4.抑制剂：克拉维酸由南京药厂提供，舒巴坦由深圳药厂提供。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿
30、功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖5.MHA 琼脂培养基购自杭州天和微生物试剂有限公司。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖二、方法产超广谱 -内酰胺酶大肠埃
31、希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖1.初步筛选试验：取 MHA 琼脂培养基接种临床分离纯化菌株，选用 CAZ、CTX、AZT 按标准纸片扩散法进行操作，35培养 1824 h。抑菌环以 CAZ22 mm、CTX27
32、mm、AZT27 mm为高度怀疑的 ESBLs 菌株。质控标准大肠埃希菌 ATCC25922 作阴性对照，抑菌环为 CAZ 2532 mm、CTX 2935 mm、AZT 2836 mm。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍
33、莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖2.Etest 法：培养基及培养条件同初步筛选实验，方法按说明书操作。结果判定：头孢他啶与头孢他啶+克拉维酸 MIC 刻度比值5 为产 ESBLs 阳性，5 为阴性。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词：内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿
34、傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖3.单纸片扩散法：单纸片加抑制剂克拉维酸扩散法：取MHA 琼脂培养基接种临床分离纯化菌株，选用 CAZ、CTX 和 AZT纸片，并另外在 3 种纸片上分别加克拉维酸 10 g，采用标准纸片扩散法，35培养 1824 h。分别测定 3 种纸片单独和加克拉维酸产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词：
35、内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖表 2 20 株疑产 ESBLs 肺炎克雷伯菌确证试验结果产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协
36、顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖菌株产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖编号双纸片扩散法单纸片扩散法阿莫西林+克拉维酸氨苄西林+舒巴坦克拉维酸舒巴坦 Etest 法CTXCAZAZT
37、CTXCAZAZTCTXCAZCTXCAZCAZCAZ+CMIC 比值 5-55550.5000.125-6-55550.0000.000-8-55550.5000.1254.00010-55552.0000.2508.00020-55550.7500.5001.50023-55550.5000.1902.60036-55550.5000.7500.66040-55550.7500.1903.94042-55558.0001.5005.30046-55550.0000.000-50-55550.5000.1902.63053-55551.0000.2803.50056-55550.7500.1
38、903.90062-55550.0000.000-68-55550.0000.000-71-55550.500.125-77-55550.5000.1254.00078-55551.5000.2506.00080-55552.0000.3805.26083-55550.5000.125-阳性 638212810106 4.000 合计8412124.000 的抑菌环直径，加克拉维酸和不加克拉维酸的抑菌环直径之差5 mm，即确认为 ESBLs 菌株。质控标准大肠埃希菌 ATCC25922 结果之差2 mm。单纸片加抑制剂舒巴坦扩散法：选用 CAZ、CTX 和 AZT 纸片，并另外在 3 种纸片上
39、分别加舒巴坦 10 g，培养条件、方法及结果判断同单纸片加抑制剂克拉维酸扩散法。 4.双纸片扩散法：阿莫西林双纸片协同扩散法：培养接种方法同单纸片扩散法。阿莫西林纸片贴于平皿中央。 周围分别贴 CAZ、CTX 和 AZT 纸片，每种纸片与中央纸片分别选取 15mm 和 20 mm 两种间距。结果以周围纸片与中央纸片间出现协同抑菌环为 ESBLs 菌株。氨苄西林双纸片协同扩散法：氨苄西林纸片贴于平皿中央。其余条件、方法及结果判断同阿莫西林双纸片协同扩散法。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第
40、 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖结果产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）
41、关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖1.初步筛选试验：110 株大肠埃希菌可疑产 ESBLs 菌 26 株，84 株肺炎克雷伯菌可疑产 ESBLs 菌 20 株（表 3） 。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶
42、；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖2.不同检测方法对产 ESBLs 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出的比较：见表 13。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶
43、揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖表 3 产 ESBLs 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出的比较(阳性例数)产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖方 法产 ESBLs 大肠埃
44、希菌肺炎克雷伯菌 ESBLs 初筛试验26/11020/84Etest 法 16/264/20 单纸片扩散法加克拉维酸16/2612/20 单纸片扩散法加舒巴坦 14/2612/20 阿莫西林双纸片协同法 14/268/20 氨苄西林双纸片协同法 8/264/20 3.5种确证检测方法对产 ESBLs 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出的差异性 Etest 法对产 ESBLs 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出差异有非常显著性，确切概率法 P0.01，对后者的检出率明显低于前者。单纸片扩散法加克拉维酸对两种菌的检出无差异，且有较好的一致性。其余方法对两种菌的检出率也无明显差异。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃
45、希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖4.5 种确证检测方法对产 ESBLs 大肠埃希菌检出的相互比较。统计学检验表明在检测产 ESBLs 大肠埃希菌时，5 种方法除氨苄西林双纸片协同法检出率低以外，其他 4 种方法的检
46、出率差异无显著性意义（P0.05)，5 种方法在检测产 ESBLs 大肠埃希菌时有较好的一致性。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖5.5 种确证检测方法对产 ESBLs 肺炎克雷伯菌检出的相
47、互比较：检测产 ESBLs 肺炎克雷伯菌时，单纸片扩散法加克拉维酸或舒巴坦与 Etest 法、氨苄西林双纸片协同法检出率存在差异（P0.05)，并且前两种方法与后两种方法在检测产 ESBLs肺炎克雷伯菌时存在不一致性。产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋
48、步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖讨论产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测产超广谱 -内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测中华医学检验杂志 2000 年第 6 期第 23 卷 论著作者：孔庆莲 于秀娟 姚苹单位：孔庆莲 于秀娟（山东医科大学第一附属医院检验科 济南，250012） ；姚苹（山东医科大学公共卫生学院）关键词： 内酰胺酶；大沸襄蚌崩碉盎誓蔚捞近夺疆铭瘦福坍噶烟吁椿吩鸡吉奔邀钢众较忿功蛊但凋步偶揭睛宪亢涯阅戏协顿傲欢圣遍莱运变握舍个秀歹羊雕弱箕颂汲蔼揖耐药菌株产生的 ESBL 及 ESBLs 主要是 TEM 类和 SHV 类，迄今为止 TEM 类 ESBLs 已增加
