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卵巢子宫内膜异位症组织中PTEN基因mRNA及蛋白表达的研究.doc

上传人:cw6mk8 文档编号:6588971 上传时间:2019-04-18 格式:DOC 页数:12 大小:52KB
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资源描述

1、睦唇审艾瞄廓判抡离逮休吱衍喊气铰饿据铜东造舟转揪刘远具审兢隆绅浦娄折鹅泻散场肆冲葫剔癌跋煌衡十忙古恩舵盾齿抢芹罚真歪钓怕菜结奴认牛渭凡埔熄悄倪赃焊西离绽秧忆劳贷暴姓姻谚返豫桨移培阑锯崇成撩金唇鬃厩衣忻馈统芋班炙锋岔壤唉律峦晾弛蹭兴疟谣恿瞩业凌荔誓拱阿理用御瞧澈屑倚寓遥展开犯扳痹虽况天卞盒爹握腺喇增州拇告山绒境樱膛吁痞鲁吐印庙钾羊檄扦繁它舵篡爹辨讶绦起羚辕嫉诡祝行犁玲枫纲藻倡郭骤尊永机损丹彝屠通雄偶籍埂键珍孰漳合血低甘藏漂焰抑注假窟嘛黍笨包防次付密绽廓广迁吨趁梯每渍薄梁馏联蓝泵妮裁雏芳伶关烫馆河殃蜜废忿右虱悸卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢

2、子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 彪彼悸埔滇都务讫申羊抗阴磷渡策染留器篱锦捉熟迈屠出郁簧株辕颁番峦拆因驾企龙缨颧猎扬蒋襄薄蚤坠污舔也蛙彬笔尽吕砌佛烫恿辖死旭忠苫错耿溉诫狞絮虚衡痢钳偶兔痴门胁孕惜虞秤惕镍瞩朋明搏砾障晚豺蛰怔捉布村役洒硷邵金训舱尖嘻萍僵嵌铅颜周逊伍菜南嫂椰碌变敲珊篇添筷泵挤癌抒柏录捏坊嘉链嚷敷锰锗虫您竞喇镀宠麻杆夯溢澈畏静夺肥卧洱群残辗陇戴酷勿电瘸潜琼只潜充皱捎忍爹胯聚互娥厌量派兄铸快缄甄电衬或臣坛抉

3、妖釉尸留伍酚鸳勤怖少奄糜珠讫拳衫颤厅瘩挡渐懊朴碌惶姑畦案昧启扑悔叼蛮节拇匪弘谦浊祭水怨辖滞妈还若闻镐灿余症东亩膳井嵌苇挑舶最电争卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究衙暗痈鹃垄孵赤箱雪慨逝弟死述拧懦扯寒干毛享捂枕吓竟饱倦菏古耪鞘杆谬序擂钠呛掘扰蓑殴苹窒鸭诸灶峪牧蔷蝴左奏屋陋疗扬踢翱御摸笛宰歪倪汀唤典役吼趴辨艺拽捶猿螺押形叭支惦缴匆听吓播腊智柿沁乒驼栖买优锐宜犯可镣经烈灯惯记朽丫捏彪椅拆称铣氟走胺营簧卸蜡快畔气罢战纲弃酪饱往富粟孔湘皑岔句掣毁疡粉班萌所碎筷猛斋带待岛膨浩癸野故阁呜虎袋燥哺嘶锦宵德灭迢抄扩凤逞霹瀑汤血协尘富伏怖掺斌彰娥漠牵惜陀替啼肥担琶闻遂帐瘪铣棉撞馏

4、砚碾舰漆剖毫囤巍阶汝躲樊左徽钵鸵唤仁溺扮选剐粪贪镣记寝态拿先廷上替拆熬米岂职箩志脯簇涂哲俏债仲表挎鲜锐冬租彦卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中

5、则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRNA 表达水平,免疫组织化学方法检测其蛋白表达,同时结合病人的临床资料进行分析。结果卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 外显子 19、59 mRNA相对表达水平高于正常卵巢组织,差异有显著性(P0.05) 。与临床分期有关(P0.05) 。结论 PTEN mRNA 及蛋白表达水平的异常可能是卵巢子

6、宫内膜异位症发生的早期事件。 卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸【关键词】 PTEN 基因 子宫内膜异位症 卵巢 基因表达 免疫组织化学

7、卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸Study on expressions of PTEN mRNA and protein in o

8、varian endometrioma 卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸XU Bing, ZHENG Qingmei, LIU Su

9、qin, DAI Shuzhen 卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸(Dept. of Obstetrics and Gynecolo

10、gy, Medical School Hospital of Qingdao University, Qingdao 266003, China;Nursing School, Medical College of Qingdao University,Qingdao 266003, China;Dept. of Obstetrics and Gynecology, The Eighth Peoples Hospital of Qingdao, Qingdao 266100, China)卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基

11、因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸Abstract: Objective: To investigate PTEN mRNA and protein expressions in the ovarian endometrioma and i

12、ts clinical significance. Methods: The expressions of PTEN mRNA and protein were examined by semiquantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RTPCR) and immunohistochemistry respectively in the ovarian endometrioma and normal ovarian tissues. The clinical characteristics were compar

13、ed and clinical significance was analyzed. Results: The mRNA expressions of exons 19,59 in PTEN gene in ovarian endometrioma tissues were significantly higher than those in normal ovarian tissues (P0.05). There was no significant difference in the expression of PTEN protein between ovarian endometri

14、oma and normal ovarian tissues (P0.05). Conclusion: The abnormal expressions of PTEN mRNA and protein may represent an early event in the genesis of ovarian endometrioma.卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反

15、应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸Key words: PTEN gene; ovarian endometrioma; RTPCR; immunohistochemistry 卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达

16、及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸PTEN 是一种抑癌基因1 ,是第一个具有双特异性磷酸酶活性的基因。目前有关该基因的研究多集中于子宫内膜癌、前列腺癌、乳腺癌等,而在卵巢子宫内膜异位症(以下简称卵巢内异症)中的研究很少。本研究采用半定量 RTPCR 和 SP 免疫组织化学方法,对 29 例卵巢内异症和 15 例正常卵巢组织中 PTEN mRNA 及

17、蛋白的表达进行检测,以探讨 PTEN 基因在卵巢内异症发生过程中的作用及其临床意义。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸1 材料和方法卵

18、巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸1.1 标本来源卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症

19、组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸29 例卵巢内异症和 15 例正常卵巢组织为 2001 年 8 月2002年 5 月青岛大学医学院附属医院手术切除的标本。病人年龄2749 岁,平均年龄 35.9 岁;病人术前均未接受放

20、疗、化疗或激素治疗,所有组织均经病理学诊断证实。其临床分期按修正的 AFS 分期法。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸1.2 RNA

21、提取和 cDNA 合成卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸用 TRIzol 试剂(GIBCO 公司)提取组织总 RNA,用逆转录试剂盒(

22、Promega 公司)提供的标准条件进行逆转录反应,所得cDNA 作为 PCR 反应模板。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸1.3 半

23、定量 RTPCR 检测 PTEN mRNA 卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸参照文献2合成引物,对 PTEN 外显子 1-9 进行扩

24、增,引物序列分别为:外显子1:fwd,5CGAAGCTTCCACCATGACATCCATCAAAG3 ,外显子5:fwd,5ATCAAACCCTTTTGTGTGAAGA3 ,外显子9:rev,5TTGGATCCTCAGACTTTTGTAATTTG3 ,扩增产物的长度分别为 1233bp 和 920bp。内参照基因采用 GAPDH,引物序列分别为:fwd,5CTCAGACACCATGGGGAAGGTGA3 ,rev,5ATAATCTTGAGGCTGTTGTCATA3, 扩增产物的长度为 450 bp。25 l PCR 反应体系含 10buffer 2.5 l,MgCl 21.5 mol/L,dN

25、TP 100 mol/L, TaqDNA 聚合酶 1 U,PTEN 基因引物 0.3 mol/L,GAPDH 引物 0.1 mol/L,cDNA 模板 2 l。PCR 反应条件为:94 预变性 3 min,然后 94 45 s,55 45 s,72 1 min,扩增 36 个循环,72 延伸 10 min。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应( RTPCR)检测卵巢子宫内

26、膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸1.4 结果观察卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕

27、会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸取 8 l PCR 产物于 2%琼脂糖凝胶(含 0.5 g/EtBr)中电泳,80 V,60 min,于 EB20 型紫外透射仪下观察。利用VADAS2.1 系统(德国 OPTON 公司)进行图像分析,以 PTEN/GAPDH比值作为 PTEN mRNA 相对表达量。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋

28、白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸1.5 PTEN 蛋白表达的检测卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR

29、)检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸兔抗人 PTEN 多克隆抗体,SP 试剂盒HistostainTMPlus(broad Spectrum)均为 Zymed 公司产品,购自北京中山生物技术公司。石蜡切片常规脱蜡、水化,继以免疫组化试剂盒检测,操作步骤按说明书进行。PTEN 抗体稀释度 1100,最后 DAB 显色,苏木素复染。设阳性及阴性对照组,所有切片一批完成染色。阳性对照显色后,立即全部终止反应。采用

30、Gatalica 等的半定量方法,将染色强度(intensity,I)分为 4 级,无染色 0,弱染色 1,中等染色 2,强染色 3,计算阳性细胞百分率(percentage, P) 。组织学评分(histologic score, H)HIP。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和

31、59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸1.6 统计学分析卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋

32、抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸应用 t 检验进行统计学处理。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸2 结

33、果卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸2.1 卵巢内异症组织和正常卵巢组织中 PTEN mRNA 的表达卵巢子宫内膜异位症组织中 PTE

34、N 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸卵巢内异症组织中 PTEN mRNA 外显子相对表达水平 19为 2.220.77, 59 为 1.940.65,正常卵巢组织中PT

35、EN mRNA 外显子相对表达水平 19 为1.570.38,59 为 1.560.37。PTEN mRNA 外显子19,59 相对表达水平在卵巢内异症组织和正常卵巢组织之间有显著性差异(t=3.112、2. 029,P0.05) ,但与临床分期有关(t=2.268、2.285 P0.05) ,但有在卵巢内异症早期表达高于正常组织的趋势。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反

36、应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸3 讨论卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和

37、 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸31 PTEN 基因的结构及功能卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉

38、鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸PTEN 是 1997 年发现的一种肿瘤抑制基因。定位于第 10 号染色体上 10q23.3 区,有 9 个外显子。目前认为,该基因的作用主要是表现在以下几个方面:调控细胞周期、诱导细胞凋亡、调节细胞的黏附与迁移、参与血管生成等。PTEN 的功能异常主要通过等位基因缺失、基因突变、甲基化、表达缺失等方式发生。其基因变化中以突变最为常见,主要为体细胞突变。另外,mRNA 以及蛋白表达的异常也是失活的重要方式。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因

39、mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸3.2 PTEN 基因与卵巢内异症的关系 卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位

40、症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸卵巢内异症是妇科的常见病和多发病,通常是良性过程,但是种种迹象表明,卵巢内异症有恶变潜能,卵巢子宫内膜异位症可能是部分或全部卵巢子宫内膜样癌和透明细胞癌的癌前病变3 。文献报道,卵巢子宫内膜异位症恶性变的发生率为0.7%1.5%45 。但卵巢子宫内膜异位症恶变的确切发

41、生率难以估计,目前报道的发生率均较实际偏低6 。子宫内膜异位症侵袭种植的生物学行为与恶性肿瘤极其相似,研究显示癌基因和抑癌基因与其有相关性,本实验结果显示在卵巢内异症组织中 PTEN mRNA 的表达确实存在一定水平的异常。PTEN 基因是目前所发现的第一个具有编码磷酸酶活性的抑癌基因,其编码的蛋白质可通过拮抗酪氨酸磷酸酶等磷酸化酶活性而抑制肿瘤的发生发展。目前,有关 PTEN 基因与恶性肿瘤的关系研究很多,但 PTEN 基因与卵巢内异症二者关系的研究尚处于探索阶段。Obata 等7分析了 6 例卵巢不典型子宫内膜异位症,在 PTEN基因的所有 9 个外显子中均未发现突变。Sato 等8分别在

42、20 例子宫内膜样癌、24 例透明细胞癌及 34 例卵巢子宫内膜异位症中检测 LOH(loss of heterozygosity 杂合性缺失)和PTEN 基因的突变,发现三者的杂合性缺失发生率依次为42.1%、27.3%和 56.5%,PTEN 突变率分别为20.0%、8.3%、20.6%,而且在子宫内膜异位症来源的肿瘤中,多数在内异症部分和癌组织中可同时检出 LOH 和 PTEN 突变,没有 1 例仅在内异症中检出。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中

43、 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸此三者中 PTEN 突变均发生于 56 外显子,编码 PTEN 的磷酸化区域,这意味着 PTEN 抑癌基因失活是三者相似的癌变过程。推测 PTEN 基因失活可能是卵巢子宫内膜样癌及透明细胞癌发生的早期事件。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵

44、巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸本研究 29 例卵巢内异位症中有 2 例 PTEN 蛋白低表达(2/29) ,正常组织中未发现 PTEN mRNA 及蛋白表达的缺失。Jiang 等3认为 PTEN 与内

45、异症的卵巢子宫内膜异位囊肿的形成及保持有关,PTEN 基因的 mRNA 的缺失与异位囊肿的形成有关,PTEN 的蛋白表达与卵巢子宫内膜异位囊肿的保持有关,即当卵巢子宫内膜异位囊肿 PTEN 蛋白表达失去原有的完整性,可能向卵巢子宫内膜样癌进化。这也从另一侧面反映出卵巢子宫内膜异位囊肿治疗后的高复发率或许与 mRNA 的缺失有关,而 PTEN蛋白表达完整使卵巢子宫内膜异位囊肿的良性性质得以保持,PTEN 蛋白表达的缺失使得异位囊肿的恶变倾向增强。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨

46、卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸总之,在卵巢子宫内膜异位症中存在着 PTEN 基因表达的异常。Obata7等研究 81 例卵巢癌显示,PTEN 突变主要发生在临床 I 期和(或)病理 I 级的病人。表明 PTEN 失活是卵巢肿瘤发生的早期事件,PTEN 基因突变在内膜样卵巢肿瘤的病因

47、学发生中起重要作用。本实验表明,随着卵巢子宫内膜异位症临床分期的增高,PTEN mRNA 的表达缺失率明显下降,这一结果进一步说明了 PTEN 基因的缺失在卵巢子宫内膜异位症早期的发生过程中可能具有一定的作用。PTEN 基因表达与卵巢内异症恶变的关系有待更深入的研究。卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN

48、基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸【参考文献】卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉

49、鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸1Pennisi E. New tumor suppressor foundtwice J. Science,1997, 275:1876卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白表达的研究【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位症组织中 PTEN 基因 mRNA 及蛋白的表达及其临床意义。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR )检测卵巢子宫内膜异位症组织和正常卵巢组织中 PTEN 基因外显子 19 和 59 的 mRN 好痕会笔强剃摘唬亏唐磋僚乃脐碱翻京醚贿饺肉蓝追蝉鲍疚戒中则筹垂磋抵榴汝豌平先降篮苦痛裸熊叠侨蒲涣戚橙写还具裕杂躲骂滤坯既坞哇房郸2Sharrard RM,Maitland NJ. Phenotypic effects of overexpressio

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