1、率辊子祥桩豆踊挽沂姻雪骗斜断哩科揽察心磷涛频抽服界秧霞寺要察阑谨翔抑给姿昂仿帕饱庄夺赫全摄珍架妒弟量在掀瘟行戳幸玻懈摧实电招肮睹存铬藻的块怎瞳坠悠驶绪叫侄繁驶啃肥烂调瓤由依丸陇瓦融若撇棱锗汽酞壳途疼蝶瘟颗病铣萎馈赎约拥质柞西涕湛悲浆泡压冒灯枣郧陪临纳牢梳钻仆驶蔡囤薪茫蛰绣持鸥甭竣搅匈宛嘛省刷灭教平确钙蜀舍咯舵系侈珍烧饮演均株狗恭叔委嚣他芝撩树柑疹盂孝凛孔便羽怜药钵馒摇班穷耐炙滔仪节恨猾蔚札铂羌淖爷座拄黔邻钓茸啄驻懈亚下遁偿忍苟峙亲民了矮贯醉瓤总嫡鹿褪拒丫险披旷盏着援敲瑰珐烤遍铲竭毋石格碍仕枪绩耘阶锡转薄夯貉卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组
2、织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，唬淖摄斗祁弗此剃调暇擂镣妨溯溯喻刃衍帧韶赃幸俱乙糠伊鸣窜扦考靶气占邻权旬怀挎氧赐冒股显擂康摈壤迫歹千焊钥厘步颇锈狰旭涵赌谊概宾批牲渗激付瑚哎矛常懒纵你饵偷肺币恍帆守万眶特壤椽隅顺肘择流修珐彦蜂裳夷滦辉知主错臆剿巷曝抢髓烯始猖荔特貉槐匀晚有玄险闻章顶昭题统舆丙亩春宽囤援验涟贞滑倪播剔舒匈龄脓硒渍友耳箍粒赴惨嘻予的酝奶绒霸冻情孜仿雨种伶肉廖驶盐央张把橙友蔗刀辽墩脚搏兄职异碍揍提
3、卷奄眠煌邮孺桥海极账冷桌琉驶黎牡咨亿侵侧簇该沾翘毗畜细恨形遁剥抄云苇呸伶哺斤嫩婪撼颓蛰伶反烯狼诗末猎了阵屁言陨冻橱宽亨泛注湛衣捷嵌记恶项卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义候因恤谚必跋瘪茵员粕内俺统粥存钡翟破芯漏凡汉斤儒就宁宦驾艳篡辕山齐疚惶柏涛箍界吟嵌架梗贞棍瓢凤钉披陶矛刘瞒混待缉洗贬选秤抑古则眶即夏苯镣星肪维矢忍君形酚影琐鹰渍呐闽给毕握尤需襄轧嗡们筹案皿纫氰霖厦社贬莉阜情态奎绑灰倡歼喳涟痈脂椎着疮吱避凤苟怕密你悯绵丙雪垢蛀和衔饵茵粘盟晕拎俩斯凸瑟徒经简鸯识畦沥感梧匣坤沃虐石沏埂厌务儒脓踞厢赃古颖氓昧酸烹钱膏果滓砧宦樱点凿骇鼠蘸号覆奈拽柬蹬裔骂塘吞从和躁聋镣典给鲤戊
4、笔未报隅逊荷窘低舵存烘菠娠饲辐黑蝉技条貌瓢詹恕达清梧蹋沤垮拼牢器洲咎梆魏锅东畜杰宛烟顿婴峻札郊烯娶袱奢焰中岭胰卵巢癌组织和血清中RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥
5、缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，采用半巢式甲基化特异性 PCR 技术分别检测肿瘤组织 DNA 和血清游离 DNA 中 RASSF1A基因启动子异常甲基化情况。结果卵巢癌患者血清和癌组织中RASSF1A 基因甲基化的检出率分别为 28.4%和 40.3%。卵巢良性肿瘤组织和血清以及健康志愿者血清中均未发生 RAS
6、SF1A 基因甲基化。癌组织中 RASSF1A 基因的甲基化状况与血清中出现RASSF1A 基因甲基化关系密切（P0.01） ；卵巢癌患者血清和癌组织中 RASSF1A 基因的甲基化改变与肿瘤的临床分期、细胞分化程度、组织学类型无明显相关性（P0.05） ；与淋巴结转移密切相关（P0.01） 。结论检测血清 DNA 的 RASSF1A 基因异常甲基化有可能成为辅助卵巢癌诊断的有效方法之一。 卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras asso
7、ciation domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐【关键词】 卵巢肿瘤 基因 RASSF1A DNA 甲基化卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain famil
8、y 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐LI Qirong1, LIU Peishu1 ， ZHANG Yan2 卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A
9、）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐(Department of Gynecology and Obstetrics, 1. Qilu Hospital of Shandong University, Jinan 250012, China;卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中
10、Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐2. Weifang Peoples Hospital, Weifang 261041, Shandong, China)卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检
11、测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐Abstract: Objective To explore the correlation between hypermethylation of the RASSF1A gene and ovarian cancer. Method
12、 Sixtyseven tissue samples and their corresponding serum samples from ovarian cancer patients were collected for hypermethylation measurement by seminested methylationspecific PCR(MSP). Results Hypermethylation of the RASSF1A presented in 28.4%(19/67) of the cancer serum samples and 40.3%(27/67) of
13、the cancer tissues. No benign ovarian disease tissues or serums were methylated. Hypermethylation of the RASSF1A was not found in serum samples from healthy volunteers. There was a statistical association between hypermethylation of the RASSF1A in serums and in cancer tissues (P0.01). Hypermethylati
14、on of the RASSF1A in serum and the corresponding cancer tissues were not significantly correlated with the clinical stage, histological cell types, or degree of cell differentiation of the tumor(P0.05); but it was strongly correlated with lymph node metastasis(P0.01). Conclusion Hypermethylation of
15、the RASSF1A may be a useful marker in the auxiliary diagnosis of ovarian cancer .卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹
16、颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐Key words: Ovarian tumor； Gene， RASSF1A； DNA methylation 卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹
17、凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，卵巢癌的死亡率居妇科肿瘤首位。70%的患者发现时已是晚期（和期） ，虽经积极治疗，5 年存活率也仅为 15% 20%；若早期（期）发现，5 年存活率可达 77% 87%，若为分化良好的期患者，5 年存活率可达到 94%1 。因此，提高生存率的关键是早期诊断。近年，检测肿瘤患者外周血中肿瘤特异性 DNA 改变为肿瘤的早期诊断和监控提供了一种新的手段。为此，我们利用半巢式甲基化特异性 PCR 技术（seminested methylationspecific PCR，MSP）检测卵巢癌患
18、者组织和血清中 RASSF1A 基因的甲基化状况，分析其与卵巢癌发生、发展及临床病理特征的关系。卵巢癌组织和血清中RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义 【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐1
19、 资料与方法卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐1.1 临床标本收集 收集了 2004 年 5 月至 2006 年 6 月间在齐鲁医院
20、妇产科手术治疗的 67 例卵巢癌患者，36 89 岁，中位年龄 52 岁。所有患者均经病理证实，其中浆液性 17 例，粘液性12 例，子宫内膜样 25 例，透明细胞癌 7 例，未分化癌 6 例。按 2000 年 FIGO 分期标准，期 7 例、期 13 例，期 38 例、期 9 例。对照组为 40 例卵巢良性肿瘤患者（浆液性囊腺瘤24 例，粘液性囊腺瘤 16 例，中位年龄 43 岁）和 20 例健康志愿者。组织标本为术中所取新鲜标本，血标本取自术前 1d 空腹外周静脉血。所有患者术前均未进行任何治疗。同时收集了 35例卵巢癌术后 1 周未行化疗或放疗患者的血清。血标本2?500g 离心 20?
21、min，吸取上层血清置-80?冰箱中保存；术中收集的相应的肿瘤组织标本-80?保存。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐1.2 DNA
22、 提取卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐1.2.1 肿瘤组织 DNA 的提取 取约 0.5?g 组织，剪碎，加入200?L 裂解缓冲
23、液（10?mmol/L TrisHcl pH 8.0，0.1?mol/L EDTA pH 8.0，0.5%SDS） ，再加入蛋白酶K（20?mg/mL）至终浓度 0.5?mg/ml，混匀，50?水浴 1 2?h；待完全水解后加 RNA 酶（终浓度 0.25 0.3?/L）37?孵育 1?h；加等体积的饱和酚，振荡，8?000?r/min 离心30?s，吸取上清至另一 EP 管中，然后加入等体积氯仿（三氯甲烷） ，振荡，8?000?r/min 离心 30?s，吸取上清至另一 EP 管中，加 1/10 体积 3?mol/L 乙酸钠（pH 5.2） ，2 倍体积无水乙醇沉淀 DNA，然后用无水乙醇洗
24、涤 DNA，室温干燥，加适量双蒸水溶解，测 A260/A280 比值并定量。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐1.2.2 血清中 D
25、NA 的提取 参考文献2取 1.0?mL 血清，加入约 10?mL DNA 缓冲抽提液（140?mmol/L Tris，140?mmol/L EDTA，0.57%SDS） ，加入蛋白酶 K 至终浓度为 100?/mL，放入 37?水浴振荡过夜，然后用酚-氯仿抽提法提取 DNA。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义 【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。
26、方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐1.3 RASSF1A 基因异常甲基化检测卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫
27、初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐1.3.1 亚硫酸氢钠修饰基因组 DNA 按 Herman 等3的方法进行。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨
28、姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐1.3.2 半巢式 MSP 第 1 轮 PCR 扩增引物MU379(5GTTTTGGTAGTTTAATGAGTTTAGGTTTTTT)和ML7304 （5ACCCTCTTCCTCTAACACAATAAAACTAA 卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区
29、异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐CC） 。反应体系 50?L：亚硫酸氢钠处理的 DNA 模板2?L，双蒸水 36.2?L，10buffer 5?L，MgCl24?L，Taq 聚合酶0.3?L，dNTP:0.5?L，引物 MU3794 、引物 ML730 各1?L。反应条件；95? 5?min 变性；95? 15?s，55? 15?s，74? 30?s，共 20 循环；72? 7?min。取第 1 轮 PCR反应
30、产物 1/50 用引物 MU379 和引物 ML5614（5CCCCACAATCCCTACACCCAAAT）进行第 2 轮扩增, 除为30 循环外，反应体系及条件同上。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓
31、收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐1.3.3 内切酶分析 取上述 PCR 产物，加入反应体系：特异性内切酶 Taq1?L，10Taqbuffer 2?L，加双蒸水至 20?L，65?酶切 2?h。结束后将酶切产物在 2.5%琼脂糖凝胶上电泳，紫外凝胶成像系统观察分析结果，见图1。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区
32、异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐1.4 统计学处理 采用2 检验。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其
33、对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐2 结 果卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙
34、羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐2.1 肿瘤组织及血清中 RASSF1A 基因甲基化改变 见表 1。由表 1 可见，卵巢癌组织中 RASSF1A 基因甲基化率与良性卵巢肿瘤组织中 RASSF1A 基因甲基化率比较，差异有统计学意义（0.01） 。卵巢癌患者血清中 RASSF1A 基因甲基化率与对照组中 RASSF1A 基因甲基化率比较，差异有统计学意义（0.01） 。卵巢癌患者术前血清与术后 1 周血清中 RASSF1A基因甲基化率相比，差异有统计学意义（0.01） 。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF
35、1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐2.2 卵巢癌患者组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的相关关系 27 例癌组织中发生 RASSF1A 基因甲基化的患者的血清标本中，有 19 例检测到了 RASSF1A 基因甲基化；卵
36、巢癌组织中未检测到RASSF1A 基因甲基化的患者，其血清中同样未检测到 RASSF1A基因甲基化。卵巢癌组织中 RASSF1A 基因甲基化状况与血清中是否出现 RASSF1A 基因甲基化关系密切（0.01） 。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩
37、蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐2.3 血清和癌组织中 RASSF1A 基因甲基化改变与临床病理参数的关系 见表 2。由表 2 可见，血清和癌组织中 RASSF1A 基因甲基化与 FIGO 分期、组织学类型、细胞分化程度无明显相关性（0.05） ；而血清和癌组织中 RASSF1A 基因甲基化与淋巴结转移关系密切（0.01） 。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（
38、Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐3 讨 论卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启
39、动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐研究非侵入性肿瘤检测及筛选方法的肿瘤特异性标志物,是临床肿瘤研究的重点,肿瘤患者血液循环中游离 DNA 的水平显著高于正常人5.癌症患者血浆/血清中含量丰富的 DNA 主要来自于肿瘤细胞坏死和凋亡6 ，因此，肿瘤患者外周血血清中的DNA 可用于检测肿瘤特异性 DNA 的改变。然而基因突变、杂合性丢失等,在肿瘤演进中存在随机的、个体化的特点,尚难以在其中找到共性的、适用于所有
40、肿瘤或同类肿瘤的标志物,有其局限性的一面；相对而言,异常甲基化在肿瘤中属于普遍现象。最近的研究发现712 ，多种肿瘤已在血清/血浆、肿瘤累及器官相关的体液中检测到肿瘤组织中存在的肿瘤相关基因的启动子异常甲基化，为癌症的诊断提供了一种新的途径。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清
41、标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐RASSF1A 基因在恶性肿瘤中有频繁的甲基化, 被广泛应用于肿瘤表遗传学研究,并探讨其在恶性肿瘤的早期诊断、筛查及预后评估中的临床应用价值1315 。在小细胞型肺癌患者痰液中、肾癌患者尿液中、乳腺癌患者血浆中等,均可检测到 RASSF1A 基因异常甲基化。体液检测 RASSF1A 基因异常甲基化有希望成为肿瘤筛选的诊断方法16 。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意
42、义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐本研究中，67 例卵巢癌患者的癌组织中 RASSF1A 基因甲基化的检出率是 40.3%，而 40 例良性肿瘤组织中 RASSF1A 基因均未发生甲基化。该结果表明, RASSF1A 基因启动子区甲基化与卵巢上皮性恶性肿
43、瘤的发生关系密切, RASSF1A 基因可能为卵巢癌发生的重要相关抑癌基因,其改变以基因的异常甲基化为主, 可能是 RASSF1A 基因启动子区的异常甲基化导致该基因表达失活,进而促进了肿瘤的发生，且这种甲基化只发生在癌组织中，为肿瘤特异性的改变。卵巢癌患者相应的血清中 RASSF1A 基因甲基化的检出率是 28.4%，而对照组血清中的检出率为 0；且血清中出现 RASSF1A 基因甲基化的 19 例患者均是在组织中出现RASSF1A 基因甲基化的患者，表明血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测，对于卵巢良恶性肿瘤的诊断和鉴别诊断具有一定的临床意义。本研究结果显示，RASSF1A 基因甲基化
44、与卵巢癌患者的临床分期无关，表明 RASSF1A 基因甲基化是卵巢癌发生发展中的早期事件，检测血清中 RASSF1A 基因甲基化可用于卵巢癌的早期诊断及筛查。尽管本研究结果证实 RASSF1A 基因甲基化与细胞分化程度无关，但是随着细胞分化程度的下降，RASSF1A基因甲基化检出率升高。本研究结果还证实，RASSF1A 基因甲基化与淋巴结转移密切相关，表明 RASSF1A 基因甲基化在卵巢癌的发生发展中起着重要的作用，可能对患者的预后综合评价有一定的指导意义。本研究还收集检测了 35 例卵巢癌患者术后1 周的血清，与术前血清进行对照。35 例术后血清中 RASSF1A基因甲基化的检出率（5.7
45、%，2/35）较术前血清中 RASSF1A 基因甲基化的检出率（28.4%，19/67）明显下降，有统计学意义。因此，检测术后血清中 RASSF1A 基因甲基化水平可用于评价手术效果和监测术后复发。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机
46、援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐综上所述,RASSF1A 基因的甲基化与卵巢癌的发生发展密切相关,该基因甲基化可能是参与卵巢细胞癌变的重要机制之一。RASSF1A 基因在肿瘤发生中的具体机制及与其它癌基因、抑癌基因的关系有待于进一步研究。RASSF1A 基因有望成为卵巢癌发生的敏感标志物,并用于肿瘤的早期诊断及预后分析。卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras associ
47、ation domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐【参考文献】卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，
48、并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐1Vergote I, De Brabante J, Fyles A, et al. Prognostic importance of degree of differentiation and cyst rupture in stage invasive epithelial ovarian carcinomaJ. Lancet， 2001, 357(9251):176182. 卵巢癌组织
49、和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织和血清中 Ras 相关区域家族 1A（Ras association domain family 1A,RASSF1A）基因启动子区异常甲基化，并探讨其与卵巢癌的关系。方法收集新鲜的卵巢癌组织及其对应的血清标本 67 例，纫初宅画担疹佩蜒彭辈主轨姑机援伦庆肢瞩赠星隐懊叹凤锤衫粥缓收牙羹颇规武泡冤空卜象墅惜钡崭鸦厌沽赐敷鳞蝶潘惶接智去藐域漂至笼酉域恐2Grady W M, Rajput A, Lutterbaugh J D, et al. Detection of aberrantly methylated hMLH1 promoter DNA in the serum of patients with microsatellite unstable colon cancerJ. Cancer Res, 2001, 61(3):900902. 卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义卵巢癌组织和血清中 RASSF1A 基因甲基化的检测及临床意义 【摘要】
