1、第二次实验内容 一、显微镜示教：（附图片） 二、实物示教： 1、比较金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的区别 2、溶血性链球菌菌落的特点 3、肠道杆菌在ss培养基上菌落的特征 4、真菌菌落类型 5、抗链球菌溶血素“O”抗体试验 6、肥达试验（试管定量凝集反应） 三、动物实验-破伤风外毒素的致病作用及破伤风抗毒素的保护（示教） 附：抗酸性染色法步骤（操作示教）,G-，肾形，成双排列，流脑的病原菌,白喉杆菌（放大1000倍）,白喉病的病原体。棒状，用特殊染色，可见菌体为棕黄色，异染颗粒为深兰色。,结核杆菌 （痰液涂片）,细长的杆菌，分枝生长，染色时需加热或延长染色时间才能着色，但一经着色之后，即能抵抗盐
2、酸、酒精的脱色，故又称抗酸杆菌。,钩端螺旋体 （放大1000倍）,梅毒螺旋体 （放大1000倍）,由8-14个螺旋组成，长8-14um，直径约0.25-0.3um，螺旋紧密，两端尖细。,荚膜 菌细胞,新型隐球菌 （墨汁染色法）,酵母型的真菌,菌体呈球形或卵圆形，其中心部为该菌细胞，外围包有宽阔的荚膜，直径约5-20um,发芽生长,二、实物示教 1、比较金黄色葡萄菌与表皮葡萄球菌的区别：,普通平板上 金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的比较,血平板上 金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的区别,金黄色葡萄球菌的菌落特点,表皮葡萄球菌的菌落,血浆凝固酶试验,2 观察乙型溶血性链球菌的菌落,白色 小 有溶血环,溶
3、血性链球菌菌落的特点：,菌落细小，周围有较宽而透亮的溶血环,3、肠道杆菌在ss培养基上菌落的特征： 肠道致病菌：菌落较小，透明无色（或淡黄色）乳糖（-） 肠道非致病菌：菌落较大，红色乳糖（ + ）,4、真菌菌落的类型： 酵母型（新型隐球菌）-湿润、柔软、致密。 丝状型（皮肤丝状菌）-表面疏松，有菌丝伸入培养基内。,SS培养基,5、抗链球菌溶血素“O”抗体试验（抗体中和试验） 原理：溶血性链球菌能产生溶血素“O” ，大多患者感染本菌后2-3周到病愈后数月，血清中可查到溶血素“O”抗体（简称抗“O”抗体），可取患者血清检查之。 方法： 溶血素“O” +患者血清 +红细胞 不溶血（+）溶血 （-）
4、意义：正常人抗抗体效价在500单位以下，超过此值可辅助风湿病的诊断。,6、肥达试验（试管定量凝集反应） 已知伤寒杆菌H、O抗原 病人血清 甲、乙副伤寒杆菌H抗原 凝集反应检查相应抗体含量有诊断意义的效价：伤寒杆菌抗体 1：160,肥达试验的原理,已知抗原+未知抗体凝集块 伤寒“O”抗原“H”抗原 甲副 “H” 乙副 “H： 判断：抗体效价 “+”所对应的最高稀释倍数,+:液体清澈透明，菌体全部被凝集成块，沉于管底 +：液体较透明，菌体大部分被凝集而沉于管底 +：液体稍透明，管底有少量凝集沉淀物 +液体较混浊，可见少量凝集沉淀物 ：液体的混浊，无沉淀,三、动物实验-破伤风外毒素的致病作用 及破伤风抗毒素的保护 1、毒力实验： 破伤风外毒素（一定量） 注射 小白鼠肌肉 结果观察：1-2天后，注射部位强直性痉挛，全身肌肉痉挛而死。 2、保护力实验：先给小白鼠注射破伤风抗毒素一段时间后再注射破伤风外毒素，小白鼠不发病。,四、抗酸性染色法步骤（操作示教）：初染： 5%石炭酸复红4-5滴，微加热 3-5min,水洗。脱色： 3%盐酸酒精4-5滴，0.5-1min，水洗。复染： 1%美兰 0.5min 水洗。印感、滴油、观察结果： 抗酸性杆菌被染上红色；非抗酸性杆菌被染上兰色。,
