1、1,2,同学们好！,3,肝脏疾病有关的实验室检测,4,内容,蛋白质代谢功能检查* 脂类代谢功能检查* 胆红素代谢功能检查* 血清酶学检查* 肿瘤标志物检测* 乙肝病毒标志物的检测*,5,四、血清酶及同工酶检测,P367,6,肝病酶血清浓度变化机理,7,血清酶及同工酶检查,、反应肝实质损害的酶：GOT GPT LDH 、反应胆汁淤滞的酶：ALP GGT 、反应肝实质纤维化的酶 ：MAO 、反应肝合成功能的酶：胆碱酯酶 、协助诊断肝癌的酶：AFP GGT,8,四、血清酶及同工酶检测,（一）血清氨基转移酶测定* （二）碱性磷酸酶测定* （三）谷氨酰转肽酶测定* （四）乳酸脱氢酶* （五）单胺氧化酶测
2、定*,9,（一）血清氨基转移酶测定,氨基转移酶是一组催化氨基转移反应的酶类。 用于肝功能检查主要是： 丙氨酸氨基转移酶(ALT) GPT 天门冬氨酸氨基转移酶(AST) GOT 主要用于肝胆疾病、心肌梗塞、骨骼肌损害的诊断、鉴别诊断、病情观察及疗效判断。,10,（一）血清氨基转移酶测定,ALT主要分布在肝脏 其次是骨骼肌、肾脏、心肌等组织中 AST主要分布在心肌 其次在肝脏、骨骼肌和肾脏组织中。 在肝细胞中ALT主要存在于非线粒体中，而大约80%的AST存在于线粒体中。,11,ALT & AST,丙氨酸氨基转移酶Alanine aminotransferase (ALT) 天门冬氨酸氨基转移酶
3、Aspartate aminotransferase (AST),ALT,80% AST,20% AST,12,血清氨基转移酶测定,是肝脏损伤的敏感指标。 正常时ALT、AST在血清中的含量很低，但当肝细胞受损时，其血清浓度会发生改变。 在轻、中度肝损伤时，肝细胞膜通透性增加，胞浆内的ALT和AST释放入血，导致血液中ALT和AST，此时以ALT显著； 当严重肝细胞损害时，线粒体受损，可导致线粒体内的酶被释放入血，此时以AST更明显，血清中AST/ALT比值。,13,血清氨基转移酶测定,反映急性肝细胞损伤时，以ALT为最敏感，而反映损伤程度时AST较为敏感。,14,参考值,速率法 ALT 10
4、-40 U/L（37 C ） AST 10-40 U/L（37 C ） ALT/AST 1,15,1急性病毒性肝炎,ALT和AST均明显，可达参考值上限的2050倍以上（甚至100倍） 以ALT更明显，ALT/AST 1。 在肝炎病毒感染后12周，氨基转移酶活性达高峰，35周逐渐，ALT/AST比值逐渐恢复正常。,临床意义,16,1急性病毒性肝炎,在急性病毒性肝炎恢复期，如氨基转移酶不能降至正常或再，提示急性肝炎转为慢性。 急性重症肝炎病程初期，氨基转移酶以AST显著。 如在症状恶化时，黄疸进行性加深，酶活性反而，即出现“胆酶分离”现象，提示肝细胞严重坏死，预后不佳。,临床意义,17,2慢性病
5、毒性肝炎,氨基转移酶轻度（100200u）或正常， ALT/AST 1若AST较ALT显著，ALT/AST 1， 提示慢性肝炎进入活动期可能。,临床意义,18,3非病毒性肝病,药物性肝炎、脂肪肝、肝癌等 氨基转移酶轻度或正常 ALT/AST1 酒精性肝病 AST显著，ALT 几近正常。 与酒精具有线粒体毒性有关。,临床意义,19,4.肝硬化,转氨酶活性取决于肝细胞坏死程度 终末期肝硬化转氨酶正常或降低5.胆汁淤积 转氨酶正常或轻度增高,临床意义,20,6.急性心肌梗塞,发病后 68小时，AST 1824小时达高峰 可达参考值上限的410倍 45天后恢复。,临床意义,21,常见肝病转氨酶变化,注
6、：N：正常；：轻度升高；：明显升高；：降低,22,（二）碱性磷酸酶测定,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase ,ALP)为一组在碱性环境中水解单磷酸酯的酶类。 正常人血清中的ALP主要来源于肝、骨、肠 以肝源性和骨源性为主。 胆道疾病由于ALP生成增加而排泄减少ALP ALP的测定主要用于辅助诊断肝胆和骨骼系统疾病。,23,参考值,速率法（37 C）女性 112岁 15岁 40150 U/L 男性 112岁 25岁 40150 U/L,24,1.生理性增高,妊娠、新生儿 骨质生成和正在发育的儿童。,临床意义,25,2病理性增高,胆汁淤积性黄疸： ALP滞留血中而明显，其增高程度
7、与梗阻程度、持续时间成正比 肝病 伴有黄疸的急、慢性肝炎，肝硬化，肝坏死等ALP活性 原发性或继发性肝癌 均能刺激肝细胞产生过多的ALP，使血中ALP活性明显； 骨骼系统疾病： 纤维性骨炎、佝偻病、骨软化症等。,临床意义,26,ALP,碱性磷酸酶 Alkaline phosphatase (ALP),ALP,27,ALT AST,图.急性病毒性肝炎ALT、AST及BIL的变化,ALT,AST,BIL,28,3鉴别黄疸,ALP、转氨酶同时测定有助于黄疸鉴别诊断。 胆汁淤积性黄疸 ALP多明显增高，而ALT仅轻度增高 肝细胞性黄疸 ALT明显增高，ALP正常或稍增高 溶血性黄疸 ALT、ALP可正
8、常,临床意义,29,黄疸时ALP、STB、ALT的变化,注：N：正常 ：增高； ：较明显增高； ：明显增高,30,（三）谷氨酰转肽酶测定,谷氨酰转肽酶(GGT，旧称-GT) 是一种转肽酶，在体内分布较广 主要存在于肝细胞胞质和肝内胆管上皮中。 在各种肝胆系统疾病时，均可明显。 参考值 速率法（37 C）： 50 U/ L,31,临床意义,1.原发性或转移性肝癌 肝癌细胞合成GGT，可使血清中GGT显著，且GGT活性与肿瘤大小及病情严重程度呈平行关系。 GGT的动态观察有助于判断疗效和预后。 2.胆汁淤积性黄疸 肝内或肝外胆管阻塞时，GGT排泄受阻易随胆汁反流入血，使血中GGT明显。 增高程度较
9、肝癌时更明显，且与血清中胆红素、ALP的变化相一致。,32,临床意义,3.病毒性肝炎和肝硬化 中等度增高，持续增高提示预后差。 4.酒精性肝病 GGT多数升高，可达1002000U/L。 5.其他 如药物性肝损害、阿米巴肝脓肿等亦有增高。,33,（四）乳酸脱氢酶测定,（lactate dehydrogenase，LD） 是一种糖酵解酶 广泛存在于机体的各种组织中，其中以心肌、骨骼肌和肾脏含量最丰富，其次为肝脏、脾脏、胰腺、肺脏和肿瘤组织。 由于LD几乎存在于人体各组织中,对诊断具有较高的灵敏度，但特异性较差。,34,参考值,连续检测法 104245 U/L 速率法 95200 U/L,35,临
10、床意义,1.心脏疾病 急性心肌梗塞时活性较高，2472h达到峰值，持续610天。 如急性心肌梗塞病程中LD持续增高或再次增高，提示梗死面积扩大或再次出现梗死。 2.肝脏疾病 急性病毒性肝炎、肝硬化、阻塞性黄疸等LD显著增高。,36,临床意义,3.恶性肿瘤 恶性淋巴瘤、肺癌、结肠癌、乳腺癌、胃癌、宫颈癌等LD均明显增高。 4.其他 贫血、肺梗死、骨骼肌损伤、进行性肌营养不良等LD均明显增高。,37,MAO分布在肝、肾、胰、心等器官 在肝内主要存在于线粒体中。 血清MAO活性与体内结缔组织增生呈正相关. 临床上常用MAO活性测定来观察肝脏纤维化程度。参考值速率法 0-3 U/L （37 C）,（五
11、)单胺氧化酶（MAO）,38,肝脏病变：（肝细胞坏死和纤维化形成） 重症肝硬化、伴有肝硬化的肝癌患者 急性肝坏死 1/2中、重度慢性肝炎 肝外疾病： 慢性充血性心衰、糖尿病、甲亢、系统硬化症等,MAO增高的临床意义,39,思考题,急性病毒性肝炎时酶学检验有哪些异常？ 肝硬化时肝功检查有哪些改变？,40,思考题,急性病毒性肝炎时酶学检验有哪些异常？ (1)ALT和AST均明显升高，以ALT升高更明显，ALT/AST1。 (2)伴有黄疸的急性肝炎ALP活性增高； (3)急性病毒性肝炎LD显著增高。,41,思考题,肝硬化时肝功检查有哪些改变？ （1）血清总蛋白及白蛋白降低,球蛋白增高,A/G倒置。
12、（2）血氨升高 （3）谷氨酰转肽酶升高 （4） MAO增高,42,常见肝胆疾病时常用酶学指标的变化,注：N:正常 ：增高； ：较明显增高； ：明显增高,43,第八章 临床常用免疫学检测,第四节 肿瘤标志物检测 P418,44,甲胎蛋白,甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP或FP） 是在胎儿早期由肝脏合成的一种糖蛋白 正常人出生后AFP合成受抑制，AFP阴性。 当肝细胞或生殖腺胚胎发生恶性病变时，细胞内相关基因被激活，肝细胞重新合成AFP，以致血中AFP含量明显升高。 AFP检测对诊断肝细胞癌及滋养细胞恶性肿瘤有重要的临床价值。,45,甲胎蛋白,参考值 ELISA法和RIA法 定
13、性 阴性 定量 25g/L,46,临床意义,1.原发性肝细胞癌 血清AFP 增高，常 300g/L。 约10%30%原发性肝细胞癌患者AFP阴性。 2.生殖腺胚胎癌（睾丸癌、卵巢癌、畸胎瘤）、胃癌、胰腺癌 血清AFP也可增高。,47,临床意义,3.病毒性肝炎、肝硬化 也有不同程度升高，多在20200g/L。 4.孕妇 妊娠34个月开始升高，78个月达高峰，以后下降。AFP最高时多低于400g/L。,48,第九章 临床常用病原体检测,第四节 病毒性肝炎检测P452,49,病毒性肝炎血清标志物检测,目前已经发现的病毒性肝炎主要有7型，即甲、乙、丙、丁、戊、庚型肝炎及输血传播病毒肝炎。 分别由肝炎病
14、毒甲型（HAV）、乙型（HBV）、丙型（HCV）、丁型（HDV）、戊型（HEV）、庚型（HGV）、输血传播病毒（TTV）所引起。 肝炎病毒标志物主要包括各型病毒肝炎相关抗原、抗体及核酸。,50,目前常用的检测方法有,针对抗原或抗体的酶联免疫法（EIA、ELISA）、放射免疫法（RIA)等； 针对核酸的斑点杂交法、聚合酶联反应法（PCR）等。,51,乙型肝炎病毒标志物检测,52,Hepatitis B Virus,乙型肝炎的病原体 在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感染 中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达9.8%,53,乙型肝炎病毒标志物检测,
15、乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg） 乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs ） 乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg） 乙型肝炎病毒e抗体（抗-HBe） 乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg） 乙型肝炎病毒核心抗体（抗-HBc）,54,参考值,ELISA法和RIA法 阴性,55,（一）乙型肝炎病毒表面抗原,乙型肝炎病毒表面抗原 （hepatitis B virus surface antigen，HbsAg） 在感染后12月出现于血清中，可持续数周、数月甚至数年。,56,（一）乙型肝炎病毒表面抗原,急、慢性乙型肝炎及病毒携带者HbsAg可呈阳性。 如HbsAg阳性持续3个月以上，则易发展为慢性乙型肝炎或肝硬化
16、。 HbsAg本身不具有传染性，因常与HBV同时存在，常作为传染性标志之一。,临床意义,57,（二）乙型肝炎病毒表面抗体,乙型肝炎病毒表面抗体 （hepatitis B virus surface antibody，抗-HBs） 是目前认为针对HbsAg的保护性抗体，对HbsAg有一定的中和作用 是机体具有免疫力的标志。,58,临床意义,抗-HBs约在感染后36个月出现，可持续多年。 抗-HBs阳性 （1）表明既往感染过HAV，现已恢复。 （2）注射过乙肝疫苗或抗-HBs免疫球蛋白者。,59,（三）乙型肝炎病毒e抗原,（hepatitis B virus e antigen，HbeAg） 临床
17、意义 HbeAg阳性表明乙肝处于活动期，提示HBV在体内复制，具有较强的传染性。 如患者HbeAg持续阳性，表明肝细胞损害较重，且可发展为慢性乙型肝炎或肝硬化。 孕妇可引起垂直传播，致90%以上的新生儿HbeAg阳性。,60,（四）乙型肝炎病毒e抗体,（hepatitis B virus e antibody，抗-HBe） 是患者或携带者经HbeAg刺激后产生的一种特异性抗体 继抗-HBs后出现于血液中，其保护性尚未得到确定。,61,临床意义,急性期即出现阳性易进展为慢性乙型肝炎 慢性活动性肝炎出现阳性者可进展为肝硬化 抗-HBe与HbeAg均阳性，且ALP升高时可进展为原发性肝癌。抗-HBe
18、阳性表示大部分乙肝病毒被消除，病毒复制减少，传染性减低，但并非无传染性。,62,（五）乙型肝炎病毒核心抗原,（hepatitis B virus core antigen，HbcAg） 一般情况下在血清中不易检测到游离态。 临床意义 HbcAg阳性提示血清中有感染性的HBV存在。 含量高表示复制活跃，传染性强，预后较差。,63,（六）乙型肝炎病毒核心抗体,（hepatitis B virus core antibody，抗-HBc ） 可分为IgM、IgA和IgG三型。,64,临床意义,(1)抗-HBc总抗体 主要反映的是抗-HBcIgG，其检出率比HbsAg更敏感。 可作为HbsAg阴性的H
19、BV感染的敏感指标； 也可用作乙型肝炎疫苗和血液制品的安全性鉴定和献血员的筛选。 抗-HBcIgG对机体无保护作用，其阳性可持续数十年甚至终身。,65,临床意义,(2)抗-HBcIgM 既是乙型肝炎近期感染指标， 也是HBV在体内持续复制的指标， 并提示患者血液有传染性； 抗-HBcIgM 转阴，预示乙型肝炎逐渐恢复； 抗-HBcIgM 转阳，预示乙型肝炎复发。,66,临床意义,(3)抗-HBcIgG 在发病后1个月升高，可持续终身。 是既往感染的指标 不是早期诊断指标 常用于乙型肝炎流行病学调查。,67,HBV标志物的临床意义,68,HBV标志物检测的临床意义,HBsAg 抗-HBs HBe
20、Ag 抗-HBe 抗-HBc 临床意义,急性或慢性感染(大三阳),+,-,+,-,+,+,+,+,乙肝后期或慢性感染(小三阳),-,-,+,+,-,-,-,潜伏期或急性乙肝早期,-,-,+,+,+,痊愈或恢复期，有免疫力,-,-,-,-,-,+,+,+,-,-,痊愈，有免疫力,疫苗接种或曾经感染过，有免疫力,69,肝功能实验检查项目的选择与应用,70,肝功能检测项目的选择与应用,肝功能实验的临床应用对于诊断、治疗、预后等方面具有重要价值。 肝功能实验种类繁多，但是一种实验只能探查肝脏的某一种功能，无一种实验能全面反映肝脏的所有功能。因此，为了得到比较正确的结论，应做若干种实验，必要时复查。 对
21、肝功能实验的评价，必须结合临床表现全面考虑，避免片面性及主观性。 要注意节约人力、物力及财力，有的放矢地选择必要的检测项目。,71,肝功能实验选择,一、检测肝细胞有无受损 ALT、AST：迄今仍以ALT最为敏感，临床上实用价值最大。 二、检测排泄分泌功能障碍 胆红素检测 胆汁淤积指示酶（包括同工酶）以ALP及-GT应用较多 三、鉴别黄疸 胆红素代谢实验 血清酶 ALP显著升高仅见于肝内外胆汁淤积。,72,肝功能实验选择,四、判断预后 蛋白质代谢实验 血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、白/球比值 血氨 凝血酶原时间（PT）测定,73,选择原则,1.健康查体 ALT、肝炎病毒标志物、A/G比值测定 2.
22、无黄疸性肝炎 急性查ALT、胆汁酸、尿胆原及肝炎病毒标志物。 慢性加查AST、ALP、GGT、TP、A/G、血清蛋白电泳。 3.黄疸 查STB、CB、尿胆原与尿胆红素、ALP、GGT、LP-X、胆汁酸。,74,选择原则,4.原发性肝癌 一般肝功能加AFP、GGT、ALP及同工酶 5.肝纤维化或肝硬化 ALT、AST、STB、A/G、蛋白电泳、MAO等 6.疗效判断及病情随访 急性：ALT、AST、STB、CB、尿双胆； 慢性:加查PT、TP、A/G比值及蛋白电泳。,75,病例分析,某患，男，26岁。 主诉：乏力、厌油腻、恶心、肝区不适伴发热2周。 查体：皮肤、巩膜黄染；肝肋下2cm，质略硬（），有压痛，脾肋下1cm处可触及。应做哪些实验室检查？,化验单,76,检查指标,ALT、AST、ALP及GGT 肝炎病毒免疫学标志物 血STB、CB 尿胆红素及尿胆原,77,78,79,思考题,乙型肝炎病毒标志物检测的临床意义。,80,谢谢！,
