1、家兔动脉血压的神经和体液调节一、目的要求 1.学习直接测定家兔动脉血压的急性实验的方法。 2.观察神经,体液因素对心血管活动的影响。 二、基本原理 在正常人体内,任何高等动物的动脉血压时相对稳定的.这种相对稳定是通过神经和体液调节来实现的,其中以静动脉窦-主动脉弓压力感受性反射最为重要.此反射即可使升高的血压下降,又可使降低血压升高,故有血压缓冲反射之称.家兔的主动脉神经在解剖上独成一支,易于分离与观察其作用。 本实验是应用液导系统直接测定动脉血压,即由动脉插管与压力传感器连通,其内充满抗凝液体,构成液导系统,将动脉插管插入动脉,动脉内的压力及其变化,可通过封闭的液导系统传导压力感受器,由计算
2、机采集系统记录下来。 三、材料与器材 家兔 ,手术台, 常用手术器械, 止血钳,眼科剪,支架,双凹管, 气管插管,动脉插管,三道管, 动脉夹,计算机采集系统 ,压力传感器,保护电极,照明灯,纱布,棉球,丝线,注射器(1ml,5ml,20ml),生理盐水,4%柠檬酸钠,20%-25%氨基甲酸已酯,肝素(200U/ml),肾上腺素(1:5000)。四、方法与步骤 1.实验仪器的准备 打开计算机采集系统,接通压力传感器。从显示器的“实验项目”中找出“循环实验”的“家兔血压的调节”条,使显示器显示压力读数。 2.连通液导系统并制压 将压力传感器的下方支管,通过输液管连接三通管,再连接动脉插管。上侧管供
3、制压时排除管内空气使用。先用装有 20ml 4%柠檬酸钠的注射器,通过三通管向连接动脉插管的输液管内推注,使之充满液体(不要使动脉插管高过压力传感器的上方支管)后,再用止血钳夹住动脉插管端的输液管。然后继续向三通管内推注,直至充满压力传感器的上方支管,并用塞子塞住(注意:液导系统内不可有气泡)。继续向三通管内推注,同时观察显示器上压力变化。当加压到 120mmHg 时既可关闭三通管。观察压力是否变化,如果压力下降,则需要检查液导系统的漏液原因,并重新制压。调节血压显示器的灵敏度,使 30130mmHg的变化都能在显示器上明显的反映出来。将动脉插管端的导管内充满肝素溶液。 3动物的准备 (1)按
4、照实验 4-8 方法,麻醉家兔并进行颈部手术,插入气管插管、分离主动脉神经。同时分离迷走神经并穿线备用。再将止血钳从颈总动脉下方穿过,轻轻张开止血钳,分离出23cm 长的颈总动脉。分离出的颈总动脉外壁应该十分光洁,外面并无结缔组织及脂肪等物。在动脉上穿两条备用棉线,分别打上活结。将两线分别拉至分离出的动脉两端备用。同样方法分离另一侧血管与神经(一侧动脉用于插管侧压,另侧动脉实验用)。由于家兔的品种不同,个体之间也有差异,常发现 3 条神经的解剖位置有些变异。主动脉神经的最后确认,蓄意对血压的影响为准。 (2)动脉插管 首先用 5ml 注射器从耳缘静脉注入肝素(200U/kg 体重)以防凝血。然
5、后在一侧动脉行动脉插管术以记录血压。其方法如下: 将动脉头端的备用线尽可能靠头端结扎(务必扎紧,以防渗血),然后在另一备用线的向心侧(尽可能近心端),用动脉夹夹闭。轻轻提起动脉头端的结扎线,用锐利的眼科剪在靠近扎线的稍后方,沿向心方向斜向剪开动脉上壁(注意:不可只剪开血管外膜,也切勿剪断整个动脉,剪口大小约为管径的一半)。一手持弯头眼科镊,将其一个弯头从剪口处插进动脉少许,轻轻挑起剪开的动脉上壁,另一手将准备好的动脉插管由开口处插入动脉管内。如果插入较浅,可用一手轻轻捏住进入插管的动脉管壁,另一手拿住动脉插管,顺势轻轻推进至 68mm 左右(如果手感滞涩,说明插管并未进入动脉,必须退出插管,重
6、新剪口再插),用备用线将动脉连同进入的插管扎紧(插管不可因扎线松动而滑出,亦不可漏液),并将余线系在插管的固定侧支上,以免滑脱。注意:插管应与动脉血管的方向一致,以防插管尖端扎破动脉管壁。轻轻取下向心端动脉夹,可见动脉血与插管内液体混合。再取下通向压力传感器的止血钳,此时显示器上出现血压的波动曲线。 4.实验观察 (1)观察正常血压曲线:调节扫描速度与增益,可以明显地观察到心室射血与主动脉回缩形成的压力变化与收缩压、舒张压的读数。有时可以观察到血压曲线随呼吸变化,心搏为一级波,呼吸波为二级波。然后将扫描速度调慢,观察正常血压曲线。 (2)夹闭对侧劲总动脉:轻轻提起对侧完好颈总动脉上的备用线,用
7、动脉夹夹闭 30s(于夹闭前记录动脉通畅时的血压曲线),观察并记录血压变化。出现变化后即取下动脉夹,记录血压的恢复过程。 (3)按压颈动脉窦:记录对照血压曲线后,用手指按压颈动脉窦(下颌下方内侧),观察并记录血压变化。当血压明显下降时,则停止按压,待血压恢复(如果血压反而升高,说明按压的是血管,需重新寻找按压位置)。 (4)刺激主动脉神经:使刺激输出端连接保护电极,轻轻提起主动脉神经上的备用线,小心地将神经置于保护电极之上。记录对照血压曲线后,再用中等强度的连续电脉冲信号,通过保护电极,刺激神经 1020s。血压出现明显下降后即可停止刺激,并待血压恢复。如果血压并不下降,可调整刺激强度或刺激频
8、率再行刺激。任何刺激都无效时,则表示此神经并非主动脉神经。需要重新辨认神经后再行实验。 (5)分别刺激主动脉神经中枢端和外周端:双结扎主动脉神经后(务必结扎),从两扎线结之间剪断神经。记录对照血压后,同法分别刺激神经的中枢端和外周端,观察并记录血压变化。 (6)刺激迷走神经:记录对照血压后,用同样的方法刺激迷走神经,观察血压下降曲线与(4)有何不同(如果血压下降很快、很低,应立即停止刺激)。(7)刺激迷走神经外周端 分别刺激两侧迷走神经外周端,观察并记录血压变化有何不同。(8)肾上腺素对血压的影响:记录对照血压曲线后,用 1ml 注射器,从耳缘静脉注入 0.10.3ml 肾上腺素溶液,观察并记
9、录血压变化及恢复曲线。 (9)乙酰胆碱对血压的影响:同法注入 0.10.2ml 乙酰胆碱溶液,观察并记录注射前后血压变化。 (10)失血对血压的影响:从另一侧动脉插管后慢慢放血,观察放血量对血压的影响。五、实验结果观察血压变化曲线:文 件 1通道2 (mV)-1.0-0.50.0.51.025 30 35 40 45 50201-516 2:3.0图 1:夹闭另一侧总动脉时的曲线变化图由图 1 看出夹闭家兔对侧颈总动脉时的血压变化曲线,.夹闭一侧颈总动脉后,可以观察到兔动脉血压升高的现象。 文 件 1通道2 (mV)-1.0-0.50.0.51.015 20 25 30 35201-516 2
10、:1359.640图 2:双手按压劲动脉窦的曲线变化图由图 2 看出用手指按压颈动脉窦,血压出现一定程度的下降,之后稍微上升并逐渐恢复正常。 文 件 1通道2 (mV)-1.0-0.50.0.51.0 10 15 20 25 30201-516 :592.859图 3:迷走 频率 30HZ 振幅 1V 脉冲持续时间 1.00ms 延时 0.0ms 脉冲数 200 时的曲线变化图由图 3 看出刺激迷走神经后观察到,刺激迷走神经和迷走神经外周端都能引起明显的夹闭一侧劲总动脉双手按压劲动脉窦刺激迷走神经减压反应。 文 件 1通道2 (mV)-1.0-0.50.0.51.0 15 20 25 30 3
11、5201-516 2:0841.2图 4:减压 频率 30HZ 振幅 1V 脉冲持续时间 1.00ms 延时 0.0ms 脉冲数 200 的曲线变化图由图 4 看出刺激完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降。文 件 1通道2 (mV)-2-10121:401:502:02:102:02:302:402:503:0201-516 2:93.12图 5:肾上腺素在作用时的曲线变化图由图 5 看出加入肾上腺素后,观察到平均动脉压抬高。六、分析讨论(1) 由图 1 观察到兔动脉血压升高的现象。这是由于颈动脉窦管壁的外膜下分布有丰富的感觉神经末梢,是动脉张力感受器,位于兔颈总动脉的远心端,颈内动脉与颈外
12、动脉的分叉交界处。夹闭颈动脉后,远心端的颈动脉窦张力感受器感受到血压下降,传出神经冲动的频率减慢。信息沿窦神经上传至延髓孤束核心血管中枢。使心迷走紧张减弱,心交感和心缩血管紧张加强,作用于心脏,使心率加快,心输出量增加,血管收缩,血管外周阻力增加。从而血压恢复性升高。(2)由图 2 看出用手指按压颈动脉窦,血压出现一定程度的下降,之后稍微上升并逐渐恢复正常。这是由于颈动脉窦管壁的外膜下是动脉张力感受器,位于兔颈总动脉的远心端,手指按压颈动脉窦后,动脉窦的容量变小,血流通过时产生较大的压力,远心端的颈动脉窦张力感受器感受到血压升高,传出神经冲动的频率加快。信息沿窦神经上传至延髓孤束刺激减压神经肾
13、上腺素核心血管中枢。使心迷走紧张增强,心交感和心缩血管紧张减弱,作用于心脏,使心率减慢,心输出量减少,血管舒张,血管外周阻力减小。从而血压恢复性降低。之后远心端的颈动脉窦张力感受器感受到血压下降,传出神经冲动的频率减慢。信息沿窦神经上传至延髓孤束核心血管中枢。使心迷走紧张减弱,心交感和心缩血管紧张加强,作用于心脏,使心率加快,心输出量增加,血管收缩,血管外周阻力增加。从而血压恢复性升高。(3)由图 3 看出刺激迷走神经后观察到,刺激迷走神经和迷走神经外周端都能引起明显的减压反应。这是由于迷走神经中含从延髓下行的传出纤维,通向心脏。节前纤维末端释放Ach,节后纤维末端释放 Ach,属于副交感神经
14、纤维,能使 cAMP 浓度降低,心率减慢,心房收缩力减弱,传导性减弱。从而使心输出量变小,平均动脉压降低。此外,还有主动脉体化学感受器的上行纤维在迷走神经中并行,化学感受器受刺激的效应是血压升高。所以,刺激迷走中枢不能引起减压反应,却可以使血压轻微抬高。此外,若切断两侧迷走神经,迷走紧张消失,迷走吸气兴奋反射通路也断了,动物的吸气变深,周期变长,二级曲线周期性变得不明显。(4)由图 4 看出刺激完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降。这是由于兔减压神经是传入神经,其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血管中枢,反射性引起血压降低。因此,刺激完整的减压神经,使传入中枢的冲动增加,致血压明显下降,而刺激其外周端虽又冲动传向外周,但不会引起血压变化。(5)由图 5 看出加入肾上腺素后,观察到平均动脉压抬高。 这是由于肾上腺素与血管平滑肌上的 和 2 甲肾上腺素能受体结合,使血管收缩,管径变小,外周阻力增加,从而使平均动脉压升高。此外,去甲肾上腺素还可以使心率增加,心收缩力变大。只是缩血管效应更明显。