1、法律法规 乳粉检验方法 中华人民共和国国家标准UDC 637.143Analytical methods for milk powder :637.127GB 5413-85本标准适用于喷雾方法所生产的全脂乳粉、全脂加糖乳粉和脱脂乳粉等粉末状乳制品。1 总则1.1 本标准所用的试剂和水,在没有注明其他要求时, 均指分析纯试剂和蒸馏水或相应纯度的水。1.2 本标准分析彡的天平和容量用的玻璃仪器须定期经法定的计量检定校正合格方可使用。1.3 乳品专业用的一些玻璃仪器应符合本标准中各插图的技术要求。1.4 方法选择:每个项目检验所列方法都是可行的 ,各地可根据具体情况选择使用。但每项中第一个检验方法
2、为仲载方法。1.5 测定某一项目时, 须分别称样做平行试验,平行试验符合要求时, 应取平均值作为检验结果报告,否则需重复测定。1.6 测定结果通常以下列四种表示形式1.6.1 百分含量(%):每百克样品中所含物质的克数。1.6.2 千分含量():每千克样品中所含被测物质的克数。1.6.3 百万分含量(ppm):每千克样品中所含被测物质的毫克数。1.6.4 十亿分含量(ppb):每千克样品中所含被测物质的微克数。2 检验方法2.1 铁罐密封性的检验将铁罐除去标签,用温水清洗,仔细擦去罐折和纵缝的污物,排成一排,放入预先煮沸过的热水中,水温不低于 8085,水量是罐重的四倍。罐沉浸水后, 罐上水层
3、应保持 23cm 厚,罐在热水中保持 57min。结果在罐内任何部位出现连续气泡, 则说明它是不密封的。当罐刚刚放入水中,个别地方出现一两个气泡,而后不再出现气泡者,不能认为不密封。2.2 净重测定2.2.1 小铁罐净重测定可在工厂装罐过程中进行,首先将准备分装的洁净、干燥的25 听空罐(带盖)一次称重(G2),而后癣这些罐装上料,并加盖封口,再将其称重(G1)。每个乳品罐头平均净重(G) 按式 (1)计算。G=G1-G2 (1)25式中:G1-25 听装料罐总重,g;G2-25 听带盖空罐总重,g。2.2.2 如果检验成品罐,首先除去商标,洗净外部, 擦拭后放干, 而后称重。 小罐500g
4、以下称量要准确到 0.1g,大罐称量要准确到达 g,而后将罐正确开启, 倒出内容物,仔细地清洗内部,干燥后称量,其准确度同上,按其第一次和第二次称量之差计算其净重。2.3 水分的测定2.3.1 仪器国家标准局 1985-09-28 发布 1986-08-01 实施GB 5413-85带盖铝皿或带盖玻璃皿(直径 5070mm) 。将皿清洗干净,在 98100 烘箱内干燥 0.5h 以上,或将其于电炉上细心烧灼后,置干燥器中冷却 2530min, 称重,准确到 0. 2mg。2.3.2 方法于已恒重的铝皿或玻璃皿中称取约 35g 乳粉,准确到 0.2mg,置 98100 烘箱中干燥 3h,取出加盖
5、,但不要盖紧,置于干燥器中冷却 2530min, 将盖盖紧,称重。再置烘箱中干燥 1h 后取出,冷却 2530min,进行第二次称重。 以后依此烘至最后两次重量相差不超过 2mg 为止。从干燥后失去的重量按式 (2)计算出乳粉水分的百分含量。水分(%)=W1-W2100 (2)W1-W3式中:W1-空皿加样品重量,g;W2-空皿加样品干燥后重量 ,g;W3-空皿重量,g。两次平行试验误差不应大于 0.05%。2.4 脂肪的测定2.4.1 罗兹-哥特里法2.4.1.1 仪器2.4.1.1.1 罗兹-哥特里抽脂瓶。2.4.1.1.2 50ml 烧杯。2.4.1.1.3 100ml 脂肪烧瓶:最好用
6、索氏抽脂器上的脂肪烧瓶,用水乙醇和乙醚依次洗净后,于 100干燥中干燥 30min,取出,冷却后称重备用。2.4.1.2 试剂a. 乙醚:分析纯。b. 石油醚:分析纯,沸程 30 60。c. 95%乙醇:分析纯。d. 浓氨水:分析纯。2.4.1.3 方法称取 1g 样品(准确到 0.2mg)于 50ml 烧杯中,用 10ml 温水(60左右)分数次溶解, 洗入抽脂瓶中, 加入 1.25ml 浓氨水,充分摇匀,置 60 水浴中加热 5min,再摇动 2min,加入 10ml95%乙醇,充分摇匀,经冷水冷却后,加入 25ml 乙醚 , 摇动半分钟, 加入石油醚25ml,摇匀后静置 30min,待液
7、层分离后,读取醚层体积。放出醚层于已知重量的烧瓶中,记录出醚层的体积。蒸馏、回收醚后,置脂肪烧瓶于 98100的烘箱中干燥 1h,取出,于干燥中冷却 2530min,于天平上称重,而后再放入烘箱中干燥 0.5h,冷却、称重 , 直至前后两次重量不超过 2mg,即为恒重。由所得重量按式 (3)算出脂肪百分含量。脂肪(%)=W2-W1100 (3)WV1V0式中:W-样品重量,g;W1-烧瓶重量,g;W2-烧瓶加脂肪重量,g;V0-醚层总量 ,ml;V1-放出醚层量 ,ml。2.4.2 盖勃法2.4.2.1 用盖勃牛乳乳脂计测定2.4.2.1.1 仪器a. 盖勃牛乳乳脂计:见图 1。图 1 盖勃牛
8、乳乳脂计b. 乳脂计架。c. 2550ml 烧杯。d. 25ml 漏斗。e. 恒温水浴锅。f. 盖勃离心机:离心机旋转半径与旋转速度的关系见表 1。表 1半径,mm 转速,r/min 半径,mm 转速,r/min240 1140 265 1090245 1130 270 1080250 1120 275 1070255 1110 300 1020260 1100 325 980注:本规定系以离心因素等于 350 为计算依据。g,硫酸自动吸管:见图 2。图 2 硫酸自动吸管h. 异戊醇自动吸管:见图 3。图 3 异戊醇自动吸管2.4.2.1.2 试剂a. 硫酸:比重为 1.8201.825。b.
9、 异戊醇:沸点 128132 ,比重 0.80900.8115。2.4.2.1.3 方法2.4.2.1.3.1 用硫酸自动吸管向牛乳乳脂计中加入硫酸 10ml。在 50ml 烧杯中称取 1.5g 样品,称量要准确至 10mg,用 10ml7075热水分数次( 用玻璃棒搅拌) 全部洗入乳脂计中。加异戊相离 1ml,再用少量热水调节液位,使其低于乳脂计颈口 46mm 。2.4.2.1.3.2 将乳脂计塞好,小心振荡,再重复倒转数次,使内容物完全混合, 置 6570水浴锅中保持 78mm,使蛋白质完全溶解。从水浴锅中取出乳脂计,转入或转出橡胶塞,使脂肪柱处于乳脂计刻度部分, 然后置离心机中,以本标准
10、 2.4.2.1.1 中 f 内容规定的半径和转速离心 5min,取出乳脂计, 复置水浴锅中 5min,取出,读数。读数时要将乳脂计中的脂肪柱下弯月放在与眼同一水面上,观察时可移动橡皮塞使下弯月面与某一大格刻度相吻合,读取脂肪柱所占的格数。2.4.2.1.3.3 乳粉中脂肪百分含量按式(4)计算。脂肪(%)=11 (4)W式中:-脂肪柱读数( 大格数):W-样品重,g;11-换算系统。两次平行测定误差不应超过 0.1%。2.4.2.2 用盖勃稀奶油乳脂计测定2.4.2.2.1 仪器除用盖勃稀奶油乳脂计(见图 4)外,其他同 2.4.2.1.1 内容。图 4 盖勃稀奶油乳脂计2.4.2.2.2
11、试剂a. 硫酸:比重为 1.501.55。b. 异戊醇:沸点 128132 ,比重 0.80900.8115。2.4.2.2.3 方法2.4.2.2.3.1 在小烧杯内称取 2.5g 样品,要准确至 10mg,加 45ml 比重为 1.50 1.55 的硫酸,用玻璃棒搅拌使其全部溶解,而后通过小漏斗转入奶油乳脂计中,再用上述比重的硫酸冲洗烧杯数次,将样品全部转入乳脂计中,硫酸总耗量约 1819ml, 使液位在乳脂计颈口下 610mm 处,再加 1ml 异戊醇。2.4.2.2.3.2 以后代.4.2.1.3.2 操作至复置水浴锅中 5min, 再于分离机上分离 5min 后,在水浴锅中保温 5m
12、in,取出,立即读数,读数方法同 2.4.2.1.3 内容。2.4.2.2.3.3 将读数乘以 2,即得乳脂肪的百分数,如果取样 2g,则乘 2.5。两次平行测定误差不应超过乳脂计的一个小格,即 0.5%。注:本方法适用于不易溶解的样品的脂肪含量测定。在溶解样品时采用热硫酸溶液,即在测定前用 10ml 水和 30ml 硫酸(比重为 1.8201.825)制成的稀酸液。2.4.3 巴布考克法2.4.3.1 仪器a. 50ml 烧杯。b. 巴布考克乳脂瓶:见图 5。图 5 巴布考乳脂瓶c. 巴氏离心机:离心因素等干 350,其半径与转速关系同 2.4.2.1.1 中 f 内容。2.4.3.2 试剂
13、a. 硫酸:比重为 1.825。b. 冰乙酸:分析纯。2.4.3.3 方法称取样品 23g10mg(准确至 10ml)于 50ml 烧杯中,用 10m 温水分数溶解乳粉,并洗入乳脂瓶中,加 8ml 冰乙酸,充分摇匀,量取 10ml 硫酸,用 5ml 洗涤烧杯,倒入乳脂瓶中,其余硫酸分数次倒入乳脂瓶中;每次加入硫酸后 ,立即旋转、摇动混合液呈深咖啡色时表明硫酸已适量,摇动 2min 后,置巴氏离心机中,以表 1 规定的转速离心 5min,取出,加 80热水至乳脂瓶颈,再离心 2min,最后加水至刻度 4%处,再离心 1min,置 65水浴中保温5min,取出立即读取脂肪柱最高点所占的刻度数(读取
14、方法同盖勃法),而后按式(5) 计算其脂肪百分含量。乳粉中脂肪(%)= 18 (5)W式中:-乳脂计脂肪柱读数;18-换算系数;W-样品重,g。两次平行测定误差不应超过 0.1%。2.5 酸度测定2.5.1 仪器a. 250ml 三角烧瓶。b. 1ml 刻度吸管。c. 50ml 烧杯。d. 5ml 微量滴定管。2.5.2 试剂a. 0.1N 氢氧化钠标准溶液。b. 酚酞指示剂(0.5%酚酞乙醇溶液）：取 0.5g 酚酞，用乙醇溶解，并稀释至 100ml。2.5.3 方法称取约 4g 样品（准确至 10mg）于 50ml 烧杯中，用煮沸过的水 96ml，分数次将样品溶解，洗入 250ml 三角烧
15、瓶中，加酚酞指示剂 1.5ml，摇匀。徐徐滴入 0.1N 氢氧化钠标准溶液，直至溶液呈微红色（参见 GB 5409-85牛乳检验方法2.1.1 中注） ， 在1min 内不消失为止。其结果按式(6)或(7) 计算。酸度(T)=N10V12 (6)W(1-B)乳酸(%)=N10V120.009 (7)W(1-B)=T0.009式中：N-氢氧化钠标准溶液的当量浓度 ml;V-滴定时消耗氢氧化钠标准溶液量,g;T-样品滴定酸度数,T;B-样品中水分含量,%;12-12g 乳粉相当 100ml;鲜乳;0.009-乳酸换算系数,即 1ml0.1N 氢氧化钠标准溶液相当 0.009g 乳酸。两次平行试验结
16、果差值不大于 0.5T。2.6 溶解度测定2.6.1 溶解度指数法2.6.1.1 仪器a. 溶解度指数样品混合瓶：见图 6。b. 样品混合机RH-RJ-1 型溶解度指数搅拌器：见图 7。电机：JX-062 型单项电容电动机。搅拌桨转速：3600r/min。c. 溶解度指数离心管（见图 8)它适应于本项 d 规定的离心机。d. 离心机：离心机旋转半径与旋转速度的关系见表 2。图 6 溶解度指数样品混合瓶图 7 RH-RJ-1 型溶解度指数搅拌器1-轴;2-叶轮图 8 溶解度指数离心管表 2半径,mm 转速,r/min 半径,mm 转速,r/min125 1085 225 809150 991 2
17、50 767175 917 275 732200 858 300 700注:本规定系以离心因素等于 165 为计算依据。旋转半径系由离心机旋转轴中心线至离心管底水平状态时的距离。e. 玻璃虹吸管.2.6.1.2 试剂消泡剂:用离心沉淀后的桂酸二甘醇。2.6.1.3 方法准确量取 100ml240.5的水于样品混合瓶中， 加三滴消泡剂（亦可不加）和 13g全脂乳粉（称量要准确至 0.01g),15.6g 全脂加糖乳粉或 9g 脱脂乳粉。将混合瓶置于混合机上，用搅拌尺以 3600r/min 的转速搅拌内容 90s，立即将内容物均匀地分倒在两只离心管内至 50ml 刻度。将两只离心管对称地放入离心机
18、中，按规定转速离心 5min。离心后立即用虹吸管吸出离沉淀物表面 5ml 以上的澄清液。注意操作勿使沉淀混浊。加约 25ml240.5的水，用一金属丝慢慢搅动沉淀物，并轻轻摇荡使其分散。 再加同样温度的水至 50ml，再转动几次内容物混匀。放入离心机中，再离心 5min，小心取出，保持垂直，合沉淀物界面与眼平齐，读取沉淀物的体积，即刻度数。如果界面倾斜，按上、下界面的平均数读取。所读取的毫升数即为溶解度指数。两次平行试验结果差值不应大于 0.1ml。2.8 乳糖和蔗糖的测定（莱因埃农氏法）2.8.1 试剂2.8.1.1 20%的乙酸铅溶液：取 20g 乙酸铅，溶解于 100ml 水中。2.8.
19、1.2 草酸钾磷酸氢二钠溶液：取草酸钾 3g，磷酸氢二钠 7g，溶解于 100ml 水中。2.8.1.3 费林试液（甲液及乙液）a. 甲液：取 34.639g 硫酸铜，溶于水中，加入 0.5ml 浓硫酸，加水至 500ml。b. 乙液：取 173g 酒石酸钾钠及 50g 氢氧化钠溶解于水中，稀释至 500ml，静止两天后过滤。2.8.1.4 1%次甲基蓝溶液。2.8.1.5 1:1 盐酸溶液。2.8.1.6 30%氢氧化钠溶液。2.8.1.7 0.2%甲基红乙醇溶液：取 0.2g 甲基红，溶于 100ml20%乙醇溶液中。2.8.2 费林试液的标定2.8.2.1 用乳糖标定称取预先在 95烘箱
20、干燥 2h 的纯乳糖约 0.75g（准确到 0.2mg） ，用水溶解并稀释至250ml。用 10m 费林试液（甲、乙液各 l5ml),按 2.8.3.2 和 2.8.3.3 操作，最后用乳糖液滴定至终点，按式(8)和(9)求出测乳糖时费林试液的校正值(f1) 。A1=V1g1100=4V1g1 (8)250f1=4V1g1 (9)AL1式中:a1-实测乳糖数,mg;V1-滴定时消耗配制乳糖量,ml;g2-称取乳糖重,g;AA1-由乳糖液滴定毫升数查表 4 所得的乳糖数,mg。2.8.2.2 用蔗糖标定称陬在 105烘箱中干燥 2h 的蔗糖约 0.2g（准确到 0.2mg） ， 用 50ml 水
21、溶解并洗入100ml 容量瓶中，按 2.8.4.2 操作，得出滴定 10ml 费林氏液（甲、乙液各 5ml ）所消耗的转化糖量。按式(10)和(11)求出测蔗糖时费林试液的校正值(f2) 。A2=V2g21000=10.5263V2g2 (10)1000.95f2=10.5263V2g2 (11)AL2式中:A2-实测转化糖量,ml;V2-滴定消耗转化糖量,ml;g2-称取蔗糖重,g;AL2-蔗糖液滴定毫升数查表 4 所得的转化糖数,mg。2.8.3 乳糖测定方法2.8.3.1 样品处理称取 2.53g 样品（准确到 0.1g)，用 100ml 水分数次溶解并洗入 250ml 容量瓶中，加4m
22、l 乙酸铅、4ml 草酸钾磷酸氢二钠溶液，每次加入试剂时都要徐徐加入，并摇动容量瓶，用水稀释至刻度，摇匀。静置数分钟，用干燥滤纸过滤，弃去最初 25ml，所得样液作滴定用。2.8.3.2 预备滴定在 50ml 滴定管中注入上述待测样液 15ml。取费林试液 10ml （甲、 乙液各 5ml ）于250ml 三角烧瓶中。置电炉上加热，使其在 2min 内沸腾，沸腾后关小火焰， 保持沸腾状态 15s，加入次甲基蓝液 3 滴,徐徐滴入样液至蓝色完全褪尽为止,读取所用样液的毫升数。2.8.3.3 精密滴定取 10ml 费林液（甲、乙液各 5ml） ，一次加入比预备滴定量少 0.51.0ml 的样液，
23、置于电炉上使其在 2min 内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态 2min，加入 3 滴次甲基蓝 液，一滴一滴地滴入样液，待蓝色褪尽即为终点，以此滴定量作为计算的依据（在同时测定蔗糖时，此即为转化前滴定量） 。计算：乳糖(%)=F1f1250100 (12)V1W式中:V1-滴定消耗样液量,ml;W-样品重,mg;F1-由消耗样液的毫升数查表 4 所得乳糖数,mg;f1-费林试液乳糖校正值。2.8.4 蔗糖测定方法2.8.4.1 转化前转化糖量的计算利用测乳糖时的滴定量，自表 4 中查出相对应的转化糖量，按式(13)计算。转化前转化糖量(%)=F2f2250100 (13)V1W式中:F2-由
24、测定乳糖时消耗样液的毫升数查表 4 所得转化糖折数,mg;f2-费林试液蔗糖校正值;V1、W 同式(12) 。2.8.4.2 样瘁的转化及滴定取 50ml 样液于 100ml 容量瓶中,加 20ml 水,再加入 10ml1:1 的盐酸,置 75水浴锅中,时时摇动,在 2min30s 至 2min45s 之间使瓶内升温至 67，自达到 67 后继续在水浴中保持 5min，于此时间内使其温度升至 69.5，取出，用冷水冷却，当瓶内温度至 35时，加甲基红指示剂 2 滴，用 30%氢氧化钠中和呈中性，冷却至 20，用水稀释至刻度，摇匀。并在此温度下保温半小时后再滴定。转化后转化糖量(%)=F3f35
25、00100 (14)V2W式中:F3-由 V2 查得转化糖的数 ,mg;V2-转化后消耗样液量,ml;f2、W 同式(13) 。蔗糖量计算:蔗糖(%)=(L1-L2)0.95 (15)式中:L1- 转化后转化糖的含量,%;L2-转化前转化糖的含量,% 。表 4 乳糖及转化糖因数表(10ml 费林试液)滴定量,ml 乳糖,ml 转化糖,mg 滴定,ml 乳糖,ml 转化糖,mg15 68.3 50.5 33 67.8 51.716 68.2 50.6 34 67.9 51.717 68.2 50.7 35 67.9 51.818 68.1 50.8 36 67.9 51.819 68.1 50.
26、8 37 67.9 51.920 68.0 50.9 38 67.9 51.921 68.0 51.0 39 67.9 52.022 68.0 51.0 40 67.9 52.023 67.9 51.1 41 68.0 52.124 67.9 51.2 42 68.0 52.125 67.9 51.2 43 68.0 52.226 67.9 51.3 44 68.0 52.227 67.8 51.4 45 68.1 52.328 67.8 51.4 46 68.1 52.329 67.8 51.5 47 68.2 52.430 67.8 51.5 48 68.2 52.431 67.8 51.
27、6 49 68.2 52.532 67.8 51.6 68.3 52.5注:“因数”系指与滴定量相对应的数目，可自表 4 中查得。若蔗糖含量与乳糖的比超过 3:1 时，遇在滴定量中加表 5 中的校正数后计算。溶液中乳糖、蔗糖共存时，测定乳糖时应在滴定量中加上的校正数见表 5。表 5滴定至终点时所用的糖液量,ml 用 10ml 费林试液蔗糖对乳糖量的比3:1 6:115 0.15 0.3020 0.25 0.5025 0.30 0.6030 0.35 0.7035 0.40 0.8040 0.45 0.9045 0.50 0.9550 0.55 1.052.9 铜、铅的测定2.9.1 样品处理2
28、.9.1.1 湿法处理取乳粉 5g(准确至 0.2mg)于 500ml 或 250ml 凯氏烧瓶中,先加少许水润湿 , 再加入浓硝酸 20ml、浓硫酸 20ml、玻璃珠数粒,先以小火加热,剧烈反应停止后,加大火力, 分 4次加入 20ml 过氧化氢溶液直至溶液透明或呈淡绿色为止。继续加热数分钟至浓白烟锝逸出，冷却，加入 25ml 饱和草酸铵溶液，继续加热到冒白烟后代谢 min 为止， 冷却内容物，移入 50ml 容量瓶中，以二次蒸馏水稀释至刻度，作分析铜、铅用。同时做空白试验。2.9.1.2 干法处理称取样品 5g（准确至 0.2mg)于瓷坩埚中，加氧化镁 1g 及 15%硝酸镁溶液 10ml
29、， 混 匀，于水浴锅上蒸干，先用微火炭化，至无烟后移至高温炉加热至 550，灼烧 34h，冷却后取出。加水 5ml 润湿灰分，用玻璃棒搅拌， 用少量水冲洗玻璃棒上附着的灰分至坩埚内。再置水浴上蒸干后移至高温炉上于 550 灰化 2h ， 冷却后加水5ml 润温灰分，慢慢加入 6N 盐酸 10ml，最后将溶液移至 50ml 容量瓶内，用 6N 盐酸洗涤坩埚三次，每次 5ml，再用水洗涤三次。每次 5ml，洗 液并入容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。此液每 10ml 相当样品 1g，相当加入盐酸量 1.5ml， 同时做试剂空白试验。2.9.2 铜的测定2.9.2.1 试剂2.9.2.1.1 硝酸:优
30、级纯。2.9.2.1.2 硫酸:优级纯。2.9.2.1.3 柠檬酸铵-乙二胺四乙酸二钠溶液:取柠檬酸铵 20g 及乙二胺四乙酸钠5g 溶于水中,稀释至 100ml。2.9.2.1.4 2N 硫酸溶液：取硫酸 20ml,缓缓倒入 300ml 水中，冷却后稀释至 36ml。2.9.2.1.5 1:1 氨水:浓氨水加水稀释一倍。2.9.2.1.6 酚红指示剂: 0.1%乙醇溶液。2.9.2.1.7 铜试剂溶液: 0.1%二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液,必要时过滤贮于冰箱中,可用一周。2.9.2.1.8 四氯化碳:优级纯。2.9.2.1.9 铜标准溶液:精密称取含 5 个结晶水的硫酸铜 0.1964g,加
31、 2N 硫酸溶液溶解,移入 500ml 容量瓶中,用 2N 硫酸溶液稀释至刻度,混匀(此溶液浓度为 0.1mg/ml)。临用时精密吸取此液 10ml 于 100ml 容量瓶中,加 2N 硫酸溶液稀释至刻度,混匀。 此溶液每毫升相当铜 10g。2.9.2.2 方法2.9.2.2.1 铜标准曲线绘制准确吸取铜标准溶液 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml（相当铜 0、2、4、6、8、 10g） ，分别置于)125ml 分液漏斗中，各加 2N 硫酸溶液 20ml， 柠檬酸铵乙二胺四乙酸钠溶液 5ml 及酚红指示剂 3 滴，混匀。滴加 1:1 氨水调节 pH 为 99.2 （溶液由红变黄再变
32、红后，再多加 2 滴） ，加铜试剂溶液 1ml、四氯化碳 10ml，猛烈振摇 2min，静止分层。将四氯化碳层通过脱脂棉滤于 2cm 比色杯中，以零管调节零点， 于波长440nm 下测吸光度，绘制标准曲线。2.9.2.2.2 样品测定精密吸取消化液或灰化样品和空白液各 10ml,置于 125ml 分液漏斗中，加入柠檬酸铵乙二胺四乙酸二钠溶液 5ml 及酚红指示剂 3 滴，混匀，滴加 1:1 氨水至溶液 pH99.2，随后按标准曲线相同的作法，测定其吸光度，从标准曲线中求得铜含量，再计算出铜含量。铜(mg/kg=(A1-A2)1000 (16)WV21000V1式中:A1-样品消化液中铜的含量,
33、g;A2-空白消化液中铜的含量,g;W-样品重量,g;V1-样品消化液总体积,ml;V2-测定用样品消化液体积,ml;1000-为分子、分母的单位变换倍数,即由 g/g 变为 mg/kg。2.9.3 铅的测定2.9.3.1 试剂配制试剂用水必须是无铅水,必要时加硫酸数滴,用全玻璃蒸馏器重新蒸馏。2.9.3.1.1 1:1 氨水。2.9.3.1.2 氯仿或四氯化碳:不应含氧化物 ,处理方法同 2.10.2.2.9。2.9.3.1.3 酚红指示剂:溶解 0.1g 酚红于 100ml 无水乙醇中。2.9.3.1.4 10%和 1%氰化钾溶液: 必要时进行处理。取 50g 氰化钾, 加水溶解并稀释至
34、100ml,必要时用双硫腙-氯仿溶液除铅,方法同柠檬酸铵溶液。但为了除去残留在氰化钾溶液 中的双硫腙,必须用氯仿提取 1020,分别制成 10%和 1%的氰化钾溶液备用。氰化钾为剧毒药品,使用时不可用嘴吸,使用后洗手,废氰化钾溶液也为可与酸接触,以免发生中毒,处理时可加氢氧化钠和硫酸亚铁,使成铁氰化钾,减低毒性。2.9.3.1.5 20%柠檬酸溶液:溶解 50g 柠檬铵于 100ml 二次蒸馏水中, 加酚红指示剂 2滴,滴加 1:1 氨水使 pH 值为 8.59.0 即溶液呈微红色,将溶液倾入 250ml 分液漏斗中, 加 10ml(100g ml)双硫腙溶液,振摇分出有机层,重复此操作直至双
35、硫腙不变色为止,再用氯仿或四氯化碳抽提残留在水溶液中和双硫腙,二次弃去氯仿层, 转入容量瓶后,加水稀释至 250ml。2.9.3.1.6 20%盐酸羟胺溶液。2.9.3.1.7 铅标准溶液:精密称取硝酸铅 0.1598g,加 1%硝酸 10ml，全部溶解后，放入 100ml 容量瓶中，加水至刻度，混匀，此液含铅量为 1mg/ml。 测定时准确量取此液 1ml 于 100ml 容量瓶中，加水至刻度，此液铅含量为 10g/ml。或溶解 0.1g 铅于 1:1 硝酸溶液中，用二次蒸馏水稀释至 100ml，此液铅含量为 1mg/ml，临用时可用二次蒸馏水配成 10g/ml。2.9.3.1.8 双硫腙氯
36、仿溶液2.9.3.1.8.1 双硫腙贮备液：0.05%氯仿溶液，保存于暗处。必要时双硫腙用下述方法纯化：取双硫腙于研钵中研细，称取 0.5g 溶于 50ml 氯仿中，如不全溶，可用滤纸过滤于 250ml 分液漏斗中，用 1:99 氨水提取双硫腙三次，每次 100ml。将提取液用棉花过滤至 500ml 分液漏斗中，用 6N 盐酸使成酸性，将沉淀的双硫腙用氯仿提取 23 次，每次 20ml。合并氯仿层，用等量水洗涤二次，弃去洗液，在 50蒸去氯仿，精制的双硫腙置硫酸干燥器中备用。或将沉淀出的双硫腙用200、200、100ml 氯仿提取三次，合并氯仿液作贮备液。2.9.3.1.8.2 双硫腙 A 液
37、：用双硫腙贮备液稀释成 0.005%氯仿溶液(50g/ml) 。2.9.3.1.8.3 双硫腙 B 液：用双硫腙贮备液稀释成 0.001%氯仿溶液(10g/ml)。2.9.3.1.8.4 双硫腙应用液：取双硫腙 A 液 1ml，加氯仿至 10ml，混匀。用 1cm 比色杯以氯仿调节零点，于波长 510nm 下测吸光度(D) ，用式 (17)算出配制 100ml 双硫腙应用液（70%透光率）所需双硫腙 A 液的毫升数(V)。V=10(2-lg70)=1.55 (17)D D2.9.3.1.9 1%硝酸溶液。2.9.3.2 方法2.9.3.2.1 样品处理：同本标准 2.9.1。2.9.3.2.2
38、 标准曲线的绘制精密吸取上述标准铅溶液 0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml（相当铅 0、1、3、5、7、9g)，分别置于 125ml 分液漏斗中，各加 1%的硝酸溶液至 20ml，各加柠檬酸铵溶液2ml、盐酸羟胺溶液 1ml、酚红指示剂 2 滴，用 1:1 氨水调节 pH 值至 9.09.5（颜色由黄变红） 。再各加氰化钾溶液 2ml，混匀， 各准确加入双硫腙 B 液或双硫腙应用液10ml，强烈振摇 1min，静止分层后，弃去水层。氯仿层用 10%氰化钾溶液洗涤， 每次 1020ml，至氯仿层没有双硫腙颜色为止。经脱脂棉将氯仿层滤至 1cm 比色杯中，以零管调节零点，于波长 510
39、nm 下测吸光度，做出标准曲线。2.3.2.3 样品测定精密吸取样品消化液 1020ml（相当于样品 12g)和相同量的试剂空白液，分别置于 125ml 的分液漏斗内，各加水至 20ml，以下与做标准曲线的步骤相同。 最后也在同样条件下测吸光度。在标准曲线上查出铅含量，再按式(18)计算铅含量。铅(mg/kg)=(A1-A2)1000 (18)WV21000V1式中:A1、A2- 样品液和空白溶液相当的铅量 ,g;W-样品重,g;V1-样品消化液总体积 ,ml;V2-测定样品消化液体积 ,ml。2.10 汞的测定2.10.1 测汞仪法2.10.1.1 原理汞蒸气对波长 253nm 的紫外光具的
40、强烈的吸收作用。样品经过硝酸-硫酸消化使汞转为离子状态,在强酸性中被氯化亚锡还原成单质汞,以氮气作为载体,将汞吹出,进行紫外光吸收测定,与标准比较定量。2.10.1.2 仪器2.10.1.2.1 测汞仪。2.10.1.2.2 消化装置:500ml 磨口锥形瓶和长 400mm 磨口球形冷凝器。2.10.1.2.3 汞蒸气发生器:见图 9,容积为 50ml,玻璃磨口。图 9 汞蒸气发生器2.10.1.2.4 抽气装置。2.10.1.3 试剂2.10.1.3.1 硝酸:优级纯。2.10.1.3.2 硫酸:优级纯。2.10.1.3.3 30%氯化亚锡溶液 :取氯化亚锡(分析纯)30g, 加少量水 ,再
41、加硫酸(优级纯)2ml,使其溶解后加水至 100ml。2.10.1.3.4 无水氯化钙:干燥用。2.10.3.5 5N 混合酸液：取硫酸（优级纯） 10ml，硝酸（优级纯）10ml ，慢慢倒入50ml 水内，冷却后再加水至 100ml。2.10.3.6 汞标准溶液：精密称取于 105下干燥过的分析纯二氯化汞 0.1354g 加混合酸溶解后，稀释至 100ml，混匀。临用时精密吸取此液 1ml 于 100ml 容量瓶中， 加混合酸液至刻度，混匀。再精密吸取稀释液 1ml 于 100ml 容量瓶中，加混合酸液至刻度，混匀。每毫升相当汞 0.1g。2.10.1.4 方法称取乳粉样品 2.5g（测其他
42、产品的取样量：牛乳 20g，甜炼乳 8g，淡炼乳 6g， 干酪4g),准确至 0.2mg 于 500ml 圆底烧瓶中加玻璃球数粒，连接冷凝器，通水冷却。比冷凝器的上端加硝酸 30ml、硫酸 5ml（牛乳、酸牛乳加 10ml） ，小心转动烧瓶， 防止局部炭化。小火加热。待开始发泡时停止加热，发泡停止后，加热回流 2h，如加热过程中变棕色，再加硝酸 5ml，继续回流 2h，放冷后从冷凝器上端小心加入水 20ml，继续加热回流 10min，放冷后用适量水冲洗冷凝器，将消化液经玻璃棉过滤至 100ml容量瓶中，并用少量水洗圆底烧瓶及过滤器，洗液并入容量瓶内，加水至刻度，混匀。精密吸取此液 10ml 于
43、汞蒸气发生器内，连接抽气装置，沿发生器内壁迅速加入氯化亚锡溶液 2ml，立即通入流量为 1.5L/min 的氮气或经活性炭处理的空气， 将汞蒸气经过氯化钙干燥管进入测汞仪中，读取测汞仪上最大读数。另精密吸取汞标准溶液 0、0.1、0.2、0.3、0.4ml（相当汞 0、0.01、0.02、0.03、0.04g),分别置于试管中，各加混合酸液至 10ml，然后分别倒入汞蒸气发生器内，按上述样品操作，根据读数绘制标准曲线。同时做试剂空白试验。计算：汞(mg/kg)=(A1-A2)1000 (19)W101000100式中:A-样品相当汞微克数;A2-试剂空白相当汞微克数;W-样品重量,g。注：过滤
44、空气所使用的活性炭处理方法：取碘 1g、碘化钾 2g，加水 20ml 溶解后，加入棒状活性炭 10g，搅拌至溶液脱色，取出活性炭于 100烘于 2h，待用。2.10.2 双硫腙法本方法系用硫酸、硝酸将样品消化，使汞转为离子状态，用微氯化亚锡还原为单质汞，蒸馏至高锰酸钾吸收液中，被氧化为离子汞。汞离子在酸性溶液中与双硫腙生成橙色络合物，用有机溶剂提取后与汞标准溶液比较定量。2.10.2.1 仪器a.消化装置：同测汞仪法。b. 1000ml 全玻璃蒸馏器。2.10.2.2 试剂2.10.2.2.1 硝酸：优级纯。2.10.2.2.2 硫酸：优级纯。2.10.2.2.3 40%氯化亚锡溶液：取氯化亚
45、锡（分析纯） 80g，溶于盐酸（优级纯）50ml 中，再加水至 200ml。2.10.2.2.4 吸收液：于水中慢慢加入硫酸 50ml，混匀，放冷后，加高锰酸钾（优级纯）6g，溶解后水至 1000ml。2.10.2.2.5 20%盐酸羟胺溶液：取盐酸羟胺（化学纯） 20g，加水溶解至 100ml， 加双硫腙氯溶液 5ml，振摇洗涤，弃去氯仿层，再加氯仿 10ml， 洗涤至氯仿层无色，弃去氯仿层备用。2.10.2.2.6 双硫腙氯仿溶液（70%透光度）2.10.2.2.6.1 双硫腙贮备液：同本标准 2.9.3 款铅的测定。2.10.2.2.6.2 双硫腙 A 液：制备方法同 2.9.3 款铅的
46、测定。2.10.2.2.6.3 双硫腙应用液（透光率 70%）：取双硫腙 A 液 1ml，加氯仿 10ml， 混匀。用 1cm 比色杯以氯仿调零点，于波长 490nm 下测定吸光度(D) ，用式(20) 算出配制 100ml 双硫腙应用液（70%透光率）所需双硫腙 A 液的毫升数(V)。V=10(2-lg70)=1.55 (20)D D即取双硫腙贮备液 1.55/Dml,加氯仿至 100ml 即可。2.10.2.2.7 汞标准溶液：精密吸取 105干燥过的二氯化汞（分析纯）0.1354g 加1N 硫酸溶液溶解，转入容量瓶，瓶稀释至 100ml，混匀。精密吸取此液 1ml 于 100ml容量瓶中
47、，加 1N 硫酸溶液稀释至刻度，混匀。临用时精密吸取此稀释液 5ml 于 50ml容量瓶中，加 1N 硫酸溶液至刻度，混匀。每毫升相当含汞 1g。2.10.2.2.8 1N 硫酸溶液：取硫酸（优级纯） 5ml，慢慢倒入 150ml 水中，冷却后再加水 180ml。2.10.2.2.9 氯仿（优级纯，不含氧化物）2.10.2.2.9.1 检查方法：取氯仿 10ml，加新煮沸过的水 25ml，振摇 3min，静置分层，取下层水液 10ml，加 16.5%碘化钾溶液及 0.5%淀粉指示剂各数滴， 振摇后不显蓝色。2.10.2.2.9.2 处理方法：于氯仿中加入 1/101/20 体积的 20% 的硫代硫酸钠溶液洗涤，再用水洗，然后加入少量无水氯化钙脱水，进行蒸馏，弃去最初及最后的 1/10蒸馏液，中间蒸馏液备用。2.10.2.2.10 淀粉指示剂：取可溶性淀粉 0.5g，加水 5ml ， 搅匀后慢慢倒入沸水100ml，随倒随搅拌，煮沸成稀薄半透明液，临用时现配。
