收藏 分享(赏)

分枝杆菌 微生物学检验.doc

上传人:gnk289057 文档编号:6503540 上传时间:2019-04-14 格式:DOC 页数:3 大小:378.04KB
下载 相关 举报
分枝杆菌  微生物学检验.doc_第1页
第1页 / 共3页
分枝杆菌  微生物学检验.doc_第2页
第2页 / 共3页
分枝杆菌  微生物学检验.doc_第3页
第3页 / 共3页
亲,该文档总共3页,全部预览完了,如果喜欢就下载吧!
资源描述

1、1分枝杆菌1. 分枝杆菌属 (Mycobacterium):(1)一类细长、略带弯曲、呈分枝状生长细菌,革兰染色阳性,无芽胞、无荚膜;(2)抗酸染色阳性,故又称抗酸杆菌;(3)营养要求较高,常用罗琴培养基;(4)生长缓慢,28 周后方可见菌落;(5)G+C mol%为 62%70%;(6)由于结核分枝杆菌的耐药和 AIDS 发病率呈上升趋势,结核病成为危胁人类健康的一个严重的全球性公共卫生问题。2. 主要致病种类:人结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌3. 分枝杆菌属分类(1)典型结核分枝杆菌:人型结核分枝杆菌、牛型结核分枝杆菌、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌 (2)非典型分枝杆菌:(3)其他:

2、副结核分枝杆菌、麻风杆菌、鼠麻风杆菌4. 结核分枝杆菌(1)临床意义A. 本菌抵抗力强,可存活 68 月,随着漂浮于空气中的微滴核被吸入呼吸道,植入肺泡发育繁殖导致结核发生;B. 引起结核病,随社区人群生活状况不同发病率有所差异,全球约有 1/3 人感染,有人类死亡之首和白色瘟疫之称;C. 免疫性:有菌免疫或称传染性免疫,细胞免疫在抗感染免疫中起重要作用。D. 细菌可经血、淋巴,在骨、关节、肾、脑膜等处引起相应的结核病(2)致病物质荚膜:抗吞噬;细胞壁脂质;磷脂:刺激单核细胞增生、结核结节形成、干酪样坏死;分枝菌酸:抗酸性;索状因子:破坏线粒体膜;蜡质 D:诱发 IV 型超敏反应;硫酸脑苷脂:

3、抑制吞噬细胞;蛋白质;致病机制:胞内寄生,细胞免疫为主,在巨噬细胞中存活,引起 型超敏反应。(3)结核结节的形成:A. 是单核细胞参与的炎性肉芽肿反应,是细胞免疫和 IV 型变态反应平衡的结果;B. 细菌的脂质抵抗吞噬,巨噬细胞被破坏,形成原发感染。36 周后,细胞变形,IV型变态反应产生;C. 磷脂刺激巨噬细胞转化为上皮样细胞融合成多核巨细胞。抑制蛋白酶对组织溶解,产生干酪样坏死;(4)Koch 现象(郭霍现象)和 IV 型变态反应:有毒结核分枝杆菌被初次接种豚鼠 1014 天,局部产生小节,形成肿块坏死溃疡侵入附近淋巴结淋巴血流全身播散,经久不愈动物死亡。说明初次感染,机体无免疫力和超敏反

4、应。在 812 周之前先动物接种减毒小量结核分枝杆菌,再次接种结核分枝杆菌后局部反应提早出现,23 天内红肿硬结溃疡痊愈。说明再次感染,机体有免疫力和超敏反应。(5)微生物学检验标本采集: 根据病变部位不同而定 (晨痰、支气管洗液、清晨的中后段尿)运送: 消毒容器直接检查: 萋-尼抗酸染色(热 )、Kinyoum 染色( 冷),金-胺 O 染色2消化: 4%NaOH 37 1530 分钟;胰酶 -新洁尔灭法;4%硫酸法(尿标本)培养分离:罗琴培养基鉴定: 烟酸、硝酸盐还原、触酶药物敏感试验(6)直接涂片染色镜检:痰厚涂片,齐-尼抗酸染色后,至少观察 100 个视野。结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色

5、,其他细菌和细胞为蓝色。结果应报告“找到或未找到抗酸性杆菌” ,而不能报告“找到结核分枝杆菌” 。可用计数法排除其他分支杆菌。(7)结核分枝杆菌形态特征: 细长、略弯曲杆菌,牛型结核分枝杆菌稍短; 排列成团、成堆; 抗酸染色阳性,治疗后菌体呈非抗酸性 G+颗粒,称 much 颗粒(L 型变异) ; 金胺“O”染色菌体 呈黄色荧光;(8)分离培养:标本接种于选择性固体培养基中,常用罗琴培养基,所含的孔雀绿或青霉素可抑制杂菌生长 37,510CO2 培养 8 周,如果出现干燥呈颗粒状、灰白色菌落,涂片染色为抗酸阳性,多数是结核杆菌。鉴定:(1)PCR 反向膜探针杂交 EHSA 法(PCR 杂交梳)

6、; (2)DNA 探针;(3)16s rRNA 基因序列测定; (4)高效液相色谱(HPLC) 检测 ;(9)培养特性:A. 最适温度 3537,最适 pH6.46.8;B. 专性需氧,在液体培养基上形成菌膜,有毒株呈索状生长;C. 营养要求高,专嗜甘油为碳源,常用罗琴培养基( 鸡蛋、甘油、枸橼酸钠、天门冬酸、马铃薯粉、孔雀绿、钾镁离子);D. 繁殖慢,一代需要 18 小时;E. 菜花样菌落,不规则凸起、不透明、粗糙,牛型结核分枝杆菌为光滑型;(10)生化反应:糖类发酵(-) 热触酶(-) Tween 水解(-)热触酶(-) 热磷酸酶(-),为结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌鉴定试验 ,后者阳性

7、烟酸试验(+) 硝酸盐还原 (+) 中性红(+)烟酰胺酶试验(+) 脲酶试验 (+)牛型分枝杆菌均为阴性(11) 结核分枝杆菌鉴别试验(12)结核分枝杆菌抵抗力:温度:菌悬液 805min、痰标本煮沸 5min 完全杀死细菌光线:对紫外线敏感3干燥:对干燥或干热抵抗力强,干燥痰中可存活数周化学因素:75%乙醇 5min,石炭酸、来苏儿、甲醛敏感(13)分枝杆菌属快速鉴定程序:(14)结核分枝杆菌快速鉴定技术A. 快速分离鉴定:采用放射性 C14 棕榈酸的 7H12 培养液,细菌生长后生成 C14O2,能自动显示测定结果,有 Bactec 460 系统、BacT/Alert 等B. 基因检测 C

8、. 核酸探针D. PCR:注意假阳性的存在 E. 核酸指印技术(15)结核菌素试验和卡介苗:结核病是病原体和宿主相互作用,由细胞免疫介导的免疫病理反应和组织损伤的结果。流行病学调查使用 5U 的 OT 和 PPD,若 1TU 呈强阳性,提示有活动性的结核。5. 麻风分枝杆菌(M.leprae)(1)抗酸染色阳性, 短而粗, 呈束状或团状排列, 胞内寄生,胞质呈泡沫状称麻风细胞。(2)迄今尚不能人工培养, 只能动物接种( 犰狳), 也可用小鼠足垫接种, 增代时间约 2030天。(3)麻风病:顽固性感染;瘤型:侵犯皮肤及各脏器;结核样型:自限型;界限类综合征;(4)微生物学检验:直接镜检:组织刮片组织病理学检查

展开阅读全文
相关资源
猜你喜欢
相关搜索
资源标签

当前位置:首页 > 医学治疗 > 检验医学

本站链接:文库   一言   我酷   合作


客服QQ:2549714901微博号:道客多多官方知乎号:道客多多

经营许可证编号: 粤ICP备2021046453号世界地图

道客多多©版权所有2020-2025营业执照举报