1、第十九章 田间检验,一、田间检验的概念田间检验是指在种子生产过程中,在田间对品种真实性进行验证,对品种纯度进行评估,同时对作物的生长状况、异作物、杂草等进行调查,并确定其与特定要求符合性的活动。品种真实性是指供检的品种与文件记录是否相符。什么是文件记录?如标签的品种特征特性说明书,品种审定公告的品种描述等品种纯度是指在品种特征特性方面典型一致的程度。田间检验实质是一种过程控制,不是严格意义上的产品检验。,第一节 概述,品种的特征特性,是指品种的植物学形态特征和生物学特性。植物学形态特征,如高矮、叶色、叶形、花色等;生物学特性,如作物的生育期、光周期、抗逆性等。作物性状分为质量性状和数量性状。质
2、量性状是指由一对或几对基因控制,在分离群体中表现为非连续分布的性状,如花色、水稻颖尖的颜色;数量性状是指由微效多基因控制,在分离群体中表现为连续分布的性状,它可以用数量单位表示,如株高、分蘖、穗、粒数,产量等。在田检过程中,应以质量性状为主,结合使用数量性状。变异分为可遗传变异与不遗传变异。可遗传变异是由于遗传物质发生变化(包括基因突变、染色体畸变和重组)引起的,这种变异遗传给后代。不遗传变异也称表型变异,是由于环境条件影响引起的变异。这里要分清楚不遗传变异与数量性状的关系,两者都会受环境因素的影响,但数量性状是由遗传物质控制的,是可遗传的。杂株率是指检验样区内所有的杂株(穗)占检验样区内本作
3、物的总株(穗)数的百分率。,散粉株率:是指检验区内花药伸出颖壳并正在散粉的植株占供检样区内本作物总株数的百分率。淘汰值:在充分考虑种子生产者利益和较少可能判定失吴的基础上,将样区内观察到的杂株与标准值进行比较,作出有风险接受或淘汰种子田决定的数值。原种:用育种家种子繁殖的第一代至第三代,经确认达到规定质量要求的种子。大田用种:由常规原种繁殖的第一代至第三代,经确定达到规定质量要求的种子,或杂交种子 。,二、田间检验的目的与作用1、目的:核查种子田的品种特征特性是否名副其实,以及影响收获种子质量的各种情况,从而根据这些检查的质量信息,采取相应的措施,减少剩余遗传分离、自然变异、外来花粉、机械混杂
4、和其它不可预见的因素对种子质量产生的影响,以确保收获时符合规定的要求。2、作用:、检查种子田的隔离情况,防止因外来花粉污染而造成的纯度降低。、检查种子生产技术的落实情况,特别是去杂、去雄情况。、检查田间生长情况,特别是花期相遇情况。、检查品种的真实性和鉴定品种纯度,判断种子生产是否符合要求。、通过田间检验,为种子质量谁认证提供依据。,三、田间检验的原则1、田间检验员应识别可区分品种间的特征,熟悉种子生产 方法和程序;2、应建立品种间相互区别的特征特性描述(即品种描述);3、依据不同作物和有关信息(尤其是小区种植鉴定的前控结果),策划和实施能覆盖种子田的、有代表性的、符合规定要求的取样程序和方法
5、。4、田间检验员应独立地对田间状况作出评价,出具检验结果报告。如果检验时某些植株难以从特征特性加以确认,在得出结论之前需要进行第二次或更多次的检验。 四、田间检验员的要求和支持田间检验员要求:1、熟悉和掌握田间检验方法和田间标准、种子生产的方法和程序等方面的知识,对被检作物有丰富的知识,熟悉被检品种的特征特性。2、具备能依据品种特征特性确认品种真实性,鉴别种子田杂株并 使之量化的能力。3、每年保持一定的田间检验工作量,处于良好的技能状态。4、应独立地报告种子田状况并作出评价,检验结果对委托检验的机构负责。田间检验员支持:1、被检种子田的详细信息。2、小区种植鉴定的前控结果。3、被检品种有效的品
6、种标准描述。4、检验必备的其它手段。,一、田间检验项目种子生产田分为常规种子生产田和杂交种子生产田。1、常规种子生产田检验项目前作、隔离条件;品种真实性;杂株百分率;其他植物株的百分率;种子田的总体状况(倒伏、健康等情况)。2、杂交种子生产田检验项目隔离条件;花粉扩散的适宜条件;雄性不育程度;串粉程度;父母本的真实性、品种纯度;适时先收获父本(或母本)。,第二节 田间检验项目与检验时期,二、田间检验时期种子田在生长季节期间可以检查多次,但至少应在品种特征特性表现最充分、最明显的时期检查一次,以评价品种真实性和品种纯度。常规种至少在成熟期检验一次,杂交种花期必须检验23次,蔬菜作物在商品器官成熟
7、期必须增加一次检验。但对于大多数作物来说,花期是品种特征特性表现最充分最明显时期,所以说花期是田间检验的最佳时期,但有时成熟期也是品种特征特性表现充分明显的时期,所以常规品种应至少进行2次田检,杂交种应进行至少3次田检。蔬菜作物视情况而定。,种子田不存在检疫性病虫害,是我国有关法规规定的强制要求。 一、前作 1、同种的其他品种的污染(主要是自生株的花粉污染);2、其他类似植物种的污染(主要是收获时机械混杂而难以清除);3、杂草种子的严重污染。要求:种子生产者提供前作档案,证实种子田不存在自生株;油菜种子生产时,要求种子田前作若为十字花科植物,则至少隔两年;西瓜种子田前作不应有自生株,不允许重荐
8、栽培。 二、隔离条件要求:生产大田常规水稻种空间隔离20m;生产大田杂交水稻种空间隔离200m(籼型)、500m(粳型);杂交玉米空间隔离300m。西瓜种子生产主要为杂交种,基本实行套袋授粉,可以不需要隔离。 三、田间杂株率和散粉株率。水稻大田用种制种田间杂株率父、母本不高于0.1%,任何一次花检散粉株率不超过0.2%或两次花检散粉株率累计不超过0.4%。,第三节 种子田生产质量要求,一、基本情况调查1、了解情况。被检单位地址;作物、品种、类别、面积等。2、隔离情况。围绕一圈检查有无污染源,是否达到隔离距离要求,自生株和杂草的检查。3、品种真实性检查。标签的检查:生产者应保留种子批的两个标签,
9、一个在田间,一个自留;杂交种保留父母本的标签。真实性检查:至少检查100个穗或株,确认品种的真实性与品种描述是否一致。4、种子生产田的生长状况。对于严重倒伏、杂草危害或另外一些原因引起生长不良的种子田,不能进行品种纯度评价,而应该被淘汰。对于中间状态,应借助小区种植的前控结果,作为补充信息进行评价。,第四节 田间检验程序,二、取样1、样区的频率同一品种、同一来源、同一繁殖世代、耕作制度和栽培管理相同而又连在一起的地块可划分为一个检验区。样区大小、样区频率、样区分布为取样的三要素。4N原则:如果规定的杂株标准为1/N,总样本的大小至少应为4N。例如:水稻恢复系(R)品种纯度不低于99.5%,那么
10、其杂株标准为1/200(即0.5%),总样本的大小应不少800株。总样本的大小=样区大小样区频率,如一个样区取100株调查,取了8个样区(样区频率),总样本的大小就是800株。要强调的是:4N原则应是权衡观察样品的费用、时间和产生错误结论的风险,兼顾平衡了各种因素后的最低要求。一般情况下,随着检验区面积增大,总样本的大小应大于4N;原因是检验样本越小,误差就越大,检验结果出现错误的可能性就越大。,一般来说,样区的数目应随种子田大小成比例的增加,由于原种、亲本种子的标准高,这些高纯度作物种子被检植株的数目比大田用种多。,种子田样区计数最低频率,2、样区大小;样区的大小和模式取决于被检作物、田间大
11、小、行播或撒播,自交或异交、以及种子生长的地理位置等因素。大于10公倾的禾谷类常规种子的种子田,取1m20m=20,方向与播种方向成直角;小面积的每样区取500株(穗)。杂交水稻和玉米,父、母本视为不同的田块分别检查和计数。水稻每样区取500株,玉米样区内行内100株或相邻两行各50株。 3、样区分布;应是随机的和广泛的。(P268 图191),三、检验通常是边设点边检验,直接在田间进行分析鉴定。在田间检验过程中,田间检验员应采用主要性状来评定品种真实性和品种纯度,当采用主要性状难以得出结论时结合使用次要性状。田间检验员宜获得相应小区鉴定结果,以证实在前控中发现的杂株。杂株包括与被检品种特征特
12、性明显不同和不明显的植株。利用雄性不育系进行杂交种子生产的田块(如杂交水稻生产),除记录父母本杂株率外,还须记录检查母本雄性不育的质量。如利用显微镜检查不育系(A或s)花粉败育程度,利用纸袋套穗自交检测结实程度。,在检查时,如遇下列情况,可采用一些特殊的处理:如果种子田中有杂株,而小区种植鉴定中没有观察到,必须记录和考虑这些杂株,以决定接受与拒绝该田块。委托检验的机构要对小区种植前控结果和田间检验结果进行核实。如果小区鉴定和田间检验结果有较大的偏离,有必要在小区鉴定和种子田进行进一步的检查,以获得正相关结果。种子田处于难以检查的状态。对于严重倒伏、杂草危害或另外一些原因引起生长不良的种子田,不
13、能进行品种纯度评价,而应该被淘汰。对于中间状态,应借助小区种植的前控结果,作为补充信息进行评价。严重的品种混杂。如果有严重的品种混杂现象,田间检验员只需检查两个样区,取其平均值,推算出群体,查出淘汰值。如果大于或等于淘汰值就淘汰种子田,如果小于则继续检查。在某一样区发现杂株而其他样区并未发现杂株。出现这种情况表明正常的检验程序不是很适宜。这种现象通常发生在杂株与被检品种非常相似的情况下,只能通过非常接近的仔细检查穗部才行。,四、结果计算与表示1、品种纯度淘汰值。对于品种纯度高于99.0%或每公顷低于1000000株或穗,需要采用淘汰值。对于育种家种子、原种是否符合要求,可利用淘汰值确定。对于行
14、播作物(禾谷类等作物,通常采取数穗而不数株),可应用以下公式计算每公顷植株(穗)数:P 1,000,000M/ W 式中:P 每公顷植株(穗)总数;M 每一样区内1m行长的株(穗)数的平均值;W 行宽(cm)。 对于撒播作物,则计数0.5M2面积中的株数。撒播每公顷群体可应用以下公式计算:P 20,000N 式中: P 每公顷植株数;N 每样区内0.5M2面积的株(穗)数的平均值。,总样区面积为200在不同标准下的淘汰值,2、杂株率。对于品种纯度低于99.0%或每公顷超过1000000株或穗,用杂株率表示。,2、其他指标,五、检验报告田间检验员田间检验完成后,应及时填写田间检验报告。报告应包括
15、基本情况、检验结果、检验意见。田间检验员应根据检验结果,签署下列意见(三种):1、如果田间检验的所有要求如隔离条件、品种纯度等都符合生产要求,建议被检种子田符合要求。2、如果田间检验的所有要求如隔离条件、品种纯度等有一部分未符合生产要求,而且通过整改措施(如去杂)可以达到生产要求,应签署整改建议。整改后,还要通过复查,确认符合要求后才可建议被检种子田符合要求。3、如果田间检验的所有要求如隔离条件、品种纯度等有一部分或全部不符合生产要求,而且通过整改措施仍不能达到生产要求,如隔离条件不符合要求、严重倒伏等,应建议淘汰被检种子田。,第二十章 小区种植鉴定,第一节 概述,一、小区种植鉴定的目的一是鉴
16、定种子样品的真实性与品种描述是否相符,即通过对田间小区内种植的被检样品的植株与标准样品的植株进行比较,并根据品种描述判断其品种真实性;二是鉴定种子样品纯度是否符合国家规定标准或种子标签标注值的要求。,二、小区种植鉴定的作用小区种植鉴定从作用来说可分为前控和后控两种。 1、前控:当种子批用于繁殖生产下一代种子时,该批种子的小区种植鉴定对下一代种子来说就是前控,如同我国种子繁殖期间的亲本鉴定。在种子生产,如果对生产种子的亲本种子进行小区种植鉴定,那么亲本种子的小区种植鉴定对于种子生产来说就是前控。 2、后控:通过小区种植鉴定来检测生产种子的质量便是后控,比如对收获后的种子进行小区种植鉴定就是后控。
17、我国每年在海南岛进行的异地小区种植鉴定就是后控。后控也是我国种子质量监督抽查工作前控可在种子生产的田间检验期间或之前进行,据此作为淘汰不符合要求的种子田的依据之一。,前控和后控的主要作用:1、为种子生产过程中的田间检验提供重要信息,是认证种子过程中不可缺少的环节。2、可以判别品种特征特性在繁殖过程中是否保持不变。3、可以鉴定品种的真实性。4、可以长期观察,观察时期从幼苗出土到成熟,随时观察小区内的所有植株。5、小区内所有品种和种类的植株的特征特性能够充分表现,可以使鉴定记载和检验方法标准化。6、能够确定小区内有没有自生植株生长和播种设备是否清洁,明确小区内非典型植株是否来自样品。7、可以比较相
18、同品种不同种子批的种子遗传质量。8、可以根据小区种植鉴定的结果淘汰质量低劣的种子批或种子田。9、可以采取小区种植鉴定的方法解决生产者和使用者的争议。,3、小区种植鉴定的用途 一是在种子认证过程中,作为种子繁殖过程的前控与后控,监控品种的真实性和品种纯度是否符合种子认证方案的要求。 二是作为种子检验的目前鉴定品种真实性和测定品种纯度最重要的方法。因小区鉴定能充分展示品种的特征特性,所以该方法作为品种纯度检测的最可靠、准确的方法。但小区种植鉴定费工、费时。我国实施的小区种植鉴定方式多种多样,可在当地同季:如与大田生产同步种植;当地异季:如在温室或大棚内种植;异地异季:如稻、玉米、棉花、西瓜等作物冬
19、季在海南省,油菜等作物夏季在青海省等进行种植鉴定。,三、标准样品 1、设置标准样品作对照的目的:是为栽培(鉴定)品种提供全面的、系统的品种特征特性的现实描述。GB/T 3543.5要求在鉴定品种真实性时,应在鉴定的各个阶段与标准样品进行比较。 2、标准样品的分类:分标准核准样品和标准样品两类。标准核准样品:是品种审定(登记)或品种保护管理机构掌握(保持和使用)的官方标准样品,主要用于品种特异性、一致性和稳定性测定的对照样品。标准样品:是种子认证机构和检验机构掌握(保持和使用)的官方标准样品,主要作为前控和后控,判定种子样品的品种真实性的对照样品。标准样品的管理主要包括来源、保持和确认三个方面。
20、标准样品可采用育种家种子等级的种子,经确认的标准样品是提供该品种在检测时期的真实描述,是判定检测样品的最可靠标准,它总是与官方的品种描述一起使用,但必须记住,品种描述是有局限性,有时用于品种鉴定往往不是很准确。,一、试验地选择1、前作的要求:前茬无同类作物和杂草的田块。可通过检查该田块的前作档案,确认该田块经过轮作,种子收获时散落在田块的作物种子和杂草种子已得到清除。并注意土壤中休眠种子或未发芽的种子。2、为了使种植小区出苗快速而整齐,除考虑前作要求外应选择土壤均匀、肥力一致、良好的田块,并有适宜的栽培管理措施。,第二节:小区种植鉴定程序,二、小区设计六个方面的考虑: 1、将同一品种、类似品种
21、连同对照的标准样品相邻种植; 2、同一品种同一生产单位生产、同期收获的有相同生产历史的种子批的样品相邻种植; 3、当要对品种特征特性进行测量时,小区设计应采用符合田间统计要求的随机小区设计; 4、条件允许,小区种植鉴定可设重复; 5、要权衡观察样品的费用、时间和产生错误结论的风险,并根据检测的目的而确定种植株数。 6、小区种植的行株间应有足够的距离,能保证植株的正常和生长,必要时采用点播或点栽(如水稻插单本)。,4N原则:一般来说,若品种纯度标准为X%=(N1)100%/N,种植株数4N即可获得满意结果。例:标准规定纯度为96.0%,即N为25,种植4N=100株即可达到要求。(N-1)100
22、%/N 96, 96N 100N100,N 25, 即4N 100同样计算得:98.0纯度,种200株;99.9%纯度,种4000株。如果是要测定品种纯度并与发布的质量标准进行比较(如实施种子质量监督抽查的品种纯度小区种植鉴定),必须种植较多的株数。 如果要求鉴定准确度提高,一般实际操作种植鉴定株数比4N多。如我国实施监督抽查的品种纯度小区种植鉴定,水稻杂交种大田用种(纯度:96.0%)鉴定,一般种植500株。,三、小区管理1、小区种植的管理,要求保持品种的特征特性和品种的差异,做到在整个生长阶段都能允许检查小区的植株状况。2、一般要求如同于大田生产粮食的管理工作。3、小区种植鉴定只要求观察品
23、种的特征特性,不要求高产,土壤肥力中等即可。对于易倒伏作物特别是禾谷类的小区鉴定,应尽量少施化肥,防倒伏。4、避免因使用除草剂和植物生长调节剂等影响植株的特征特性。,四、鉴定和记录 1、小区种植鉴定在整个生长季节都可观察,有些种在幼苗期就有可能鉴别出品种真实性和纯度,但成熟期(常规种)花期(杂交种)和食用器官成熟期(蔬菜种)是品种特征特性表现最明显的时期,必须进行鉴定。 2、记载的数据用于结果判别时,原则上要求花期和成熟期相结合,并通常以花期为主。 3、小区鉴定记载也包括种纯度和种传病害的存在情况。在鉴定变异株时,田间检验员应掌握一个原则:在最后计数时,忽略小的变异,只计数那些非常明显的变异株
24、,从而决定接受或淘汰种子批。,4、杂交水稻几种杂株类型a:不育株(有可能是A),b:早熟株(有可能是B),c:迟熟株(包括“冬不老”),五、结果计算与容许差距品种纯度结果表示有以变异株数目表示和以百分率表示两种方法。 1、变异株数目表示国家标种子质量标准规定纯度很高的种子,如育种家种、原种,是否符合要求,可利用淘汰值。淘汰值是在考虑种子生产者利益和有较少失误的基础上,把在一个样本内观察到的变异株数与标准比较,作出符合要求的种子批或淘汰该种子批的决定。 其可靠程度与样本大小密切相关。GB/T3543.5规定的淘汰值是以变异株数表示。如果变异株大于或等于规定的淘汰值,就应淘汰该种子批。表201例举
25、了不同规定标准与不同样本大小的淘汰值。,表20-1不同规定标准与不同样本大小的淘汰值,表20-1的淘汰值的推算是采用泊松(Poisson)分布,对于其他标准计算可采用下式:其中R为淘汰值,X为标准所换算成的变异株数,计算的R结果舍去所有小数位数,注意不采用四舍五入或六入 如计算纯度99.7%,种植2000株的淘汰值。 1、计算标准所换算成的变异株数X, 不考虑容许差距,纯度为99.7%变异株数为X = 2000(100%-99.7%)= 6, 2、计算淘汰值R, 去掉所有小数,取其整数,得淘汰值为11。,2、以百分率表示将所鉴定的本品种、异品种(非典型株)、异作物和杂草等均以所鉴定植株的百分率
26、表示。小区种植鉴定的品种纯度结果可采用下式计算:我国现行种子质量标准和GB/T3543.5规定: 品种纯度计数以株数为单位。 品种纯度计算结果保留一位小数。,品种纯度是否达到国家种子质量标准、合同和标签的要求,可使用GB/T3543.5容许差距表2进行判定。如果种植的株数不是表中的定数时可用下式进行计算:式中:p 品种纯度的数值; q 100p; N 种植株数。 例如:水稻杂交种大田用种二级,国家标准规定纯度96%, 种植500株,那么p为96,q为4,N为500, 求得其容许差距为T1.5。,6、结果填报结果报告按GB/T 3543.1执行。即田间小区种植鉴定结果除品种纯度外,可能时还填报所发现的异作物、杂草和其他栽培品种的百分率。我国的田间小区种植鉴定的原始记录统一按表20-2的格式填写。,表20-2 真实性和品种纯度鉴定原始记载表(田间小区),