1、1临床检验仪器临床检验仪器常用性能指标：灵敏度好、精度高；噪音、误差小；分辨率高，可靠性、重复性好；响应迅速；线性范围宽和稳定性好。离心现象：物体远离圆心运动的现象称为离心现象也叫离心运动。应用离心沉降进行物质的分析和分离技术称为离心技术（P）沉降速度：在强大离心力的作用下，单位时间内物质的运动的距离。(J)低速离心机：电动机、离心转盘（转头） 、调速器、定时器、离心套管与底座等主要部件。(J)高速离心机：转动装置、速度控制系统、温度控制系统、真空系统、离心室、离心转头及安全保护装置等(J)。超速（冷冻）离心机：驱动和速度控制、温度控制、真空系统和转头。差速离心法的优、缺点是什么： （J）优点
2、：操作简单；分离时间短、重复性高；样品处理量大。缺点：分辨率有限、分离效果差；壁效应严重；颗粒被挤压，离心力过大、离心时间过长会使颗粒变形、聚集而失活。光学显微镜的工作原理：(J) 显微镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统，是利用光学原理，把人眼所不能分辨的微小物体放大成像，供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜，而焦距较长，靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。被观察物体位于物镜的前方，被物镜作第一级放大后成一倒立的实像，然后此实像再被目镜作第二级放大， 得到最大放大效果的倒立的虚像，位于人眼的明视距离处。油-100/1.25/0.17 其中：1
3、00 表示：放大倍数；1.25 表示：数值孔径；油 表示：油镜；0.17 表示：工作距离。光吸收定律（朗伯比尔定律）的物理意义及使用范围：(J) 是比色分析的基本原理，表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。其内容是：当用一束单色光照射溶液时，其吸光度 A 与液层厚度 b 及溶液浓度 c 的乘积成正比。即 A=kbc。 朗伯-比尔定律的适用条件为：入射光为单色光。波长范围越大，单色光纯度越低，对朗伯-比耳定律的偏离越大；要求稀溶液。当溶液浓度很大时，由于溶液分子的相互干扰，该定律不再成立紫外-可见分光光度计的应用：定性分析、定量分析、纯度鉴定。电阻抗法血细胞分析仪的细胞计
4、数原理：(J)将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器中，将小孔管（也称传感器）插进细胞悬液中。小孔管内充满电解质溶液，并有一个内电极，小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。当接通电源后，位于小孔管两侧电极产生稳定电流，稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔向小孔管内部流动，使小孔感应区内电阻增高，引起瞬间电压变化形成脉冲信号，脉冲振幅越高，细胞体积越大，脉冲数量越多，细胞数量越多，由此得出血液中血细胞数量和体积值。联合检测型血细胞分析仪的细胞计数原理(J)血球悬浮在电解液中，用一定的电流通过传感器的内外两个电极，由于血细胞电阻抗很大，当血细胞通过两个电极时，电极间阻抗瞬间增大，形
5、成幅度与血细胞体积成正比的2电脉冲，根据脉冲的大小可测出细胞的体积。在测量红细胞时，利用一个脉冲甄别器，将幅度较小的血小板脉冲去掉，保留红细胞和白细胞脉冲，因血液中白胞的数量不及红细胞的 1/500，故其总数据近似认为是对红细胞计数。在测量白细胞时，利用溶血素，使红细胞溶解，再对剩下的白细胞计数。在对血小板计数时，调低脉冲甄别器的阈值，计出总数，再减去红细胞的计数（其中已包括白细胞的计数） ，即为血小板计数。由于不同类型但体积相同的细胞产生的脉冲幅度相同，故仅靠体积是不能完全区分，利用高频电导法和激光散射分析白细胞内部结构可以弥补这一缺陷。虽然细胞壁不能使低频电流通过，但能通过高频电流，细胞核
6、的大小和密度不同，它们对高频电流的阻抗也不同，因此可以用来区分白细胞。激光散射技术主要用来检查细胞膜表面特征和内部结构。激光散射对细胞颗粒的结构和密度的区分能力强，粗颗粒产生的光散射比细颗粒强，借此可将粒细胞区分开来.测血红蛋白时氰化高铁（HiCN）法的最大吸收峰在 540 nm (P)血液凝固法中底物显色法的一个卤素灯为检测光源，波长为 405nm (P)血液凝固法:是通过检测血浆在凝血激活剂作用下的一系列物理量 (光、电、机械运动等)的变化，再由计算机分析所得数据并将之换算成最终结果，所以也可将其称作生物物理法。(P)光学法血凝仪是根据凝固过程中浊度的变化来测定凝血功能,可根据不同的光学原
7、理，又可以分为散射比浊法和透射比浊法。血液流变分析仪主要有：血液粘度计、红细胞变形测定仪、血小板聚集仪、红细胞电泳仪、血沉分析仪血小板聚集仪主要采用光学法和电阻法。静脉釆血：要求在 30s 内采完 1 ml 左右的釆血切不能有淤血和溶血。尿液分析仪按工作方式分：湿式尿液分析仪、干式尿液分析仪。多联试带的基本结构采用了多层膜结构：第一层 尼龙膜起保护作用，防止大分子物质对反应的污染；第二层 绒制层，包括碘酸盐层和试剂层，碘酸盐层可破坏 VitC 等干扰物质，试剂层与尿液所测定物质发生化学反应；第三层是吸水层固有试剂的，可使尿液均匀、快速地浸入，并能抑制尿液流到相邻反应区；第四层选取尿液不浸润的塑
8、料片作为支持体。通常情况下，试带上的试剂块要比测试项目多一个空白块，有的甚至多参考块又称固定块。空白块的目的是为了消除尿液本身的颜色在试剂块上分布不均等所产生的测试误差，以提高测试准确性尿液分析仪一般采用双波长测定试剂块的颜色变化（P）尿液分析仪一般由 机械系统、光学检测系统、电路系统组成。3尿液分析仪的检测原理(L)将吸附有尿液的试剂带放在仪器比色槽内，试剂带上已产生化学反应的各种试剂垫被光源照射，其反射光被球面积分仪接收，球面积分仪的光电管被反射的双波长光（通过滤片的测定光和一束参考光）照射，各波长的选择由检测项目决定。仪器按下列公式自动化计算出反射率，然后与标准曲线比较，自动找印也各种成
9、分的相应结果，尿液中某种成分含量高，其相应试剂垫的反射光较暗，否则较强。尿液分析仪的检测项目有：(j)尿比重、 酸碱度、 白细胞 、亚硝酸盐 、尿蛋白 、尿糖 、 酮体 、 尿胆元、胆红质、红血球 、维生素 C尿液分析仪的安装条件1.工作环境要清洁；防潮、防阳光直射，通风条件好，室内温度应维持在 1030，最佳温度为 25，相对湿度为80；2.仪器应该安放在远离电磁干扰源、热源的位置；放置仪器的实验台一定要稳固。以。3.仪器安装要有足够的空间，以便于保养和使用。4.为了仪器安全和抗干扰，仪器应用稳压器最好是净化电源，并连接符合标准的专用地线。试剂带浸入尿液样本的时间为 2s,过多的尿样应用滤纸
10、吸走，所有试纸块包括空白块在内都要全部浸入尿液样本中。PO2 电极： PO2 电极是一种 Clark 电极，属于气敏氧的电极，也是极谱电极。全自动化学发光免疫分析系统仪器测定原理：主要包括竞争法和夹心法，小分子抗原物质测定采用的是竞争法，而大分子抗原物质采用的是夹心法。仪器所用固相磁粉颗粒极微小，其直径仅为 1.0m.大大增加了包被表面积，增加了抗原或抗体的吸附量，是反应速度加快，也使清洗和分离更简便。发光免疫分析法是将发光反应与免疫反应相结合，产生一种很有发展前途的免疫分析法。即时检验： 指在病人旁边进行的临床检测( 床边检验)，通常不一定是临床检验师来进行。利用便携式仪器是在采样现场即刻进
11、行准确并获取结果的分析，省去标本在实验室检验时的复杂处理程序，快速得到检验结果的一类新方法。聚合酶链反应或多聚酶链反应：是一种对特定的 DNA 片段在体外进行快速扩增的新技术。（P）PCR 基因扩增仪工作的关键是温度的控制，也就是变性温度、退火温度、延伸温度等程控循环升温降温的过程。(P)实时荧光定量 PCR 仪: (J)将标记有荧光素的 Taqman 探针与模板 DNA 混合后，在特定光激发下发出荧光，荧光信号的变化真实反应了体系中模板的增加，通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。PCR 扩增仪的性能指标1.温度控制是决定 PCR 反应能否成
12、功的关键，主要包括温度的准确性、均一性以及升降温速度。对梯度 PCR 仪来说，还必须考虑仪器在梯度模式和标准模式下是否具有同样的温度4特性。2.荧光检测系统：实时荧光定量 PCR 扩增仪均有荧光检测系统，主要包括激发光源和检测器。3.软件：简便的人性化设计最能满足其需求。4.多样化样品基座设计、热盖等都使 PCR 仪越来越人性化。目前 DNA 测序仪的工作原理主要是利用 Sanger 双脱氧链末端终止法或 Maxam-Gilbert 化学降解法。(P)流式细胞仪的技术与应用：(L)技术：流式细胞仪是以激光为光源，集流体力学技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆
13、抗体技术为一体的新型高科技仪器。应用：流式细胞仪最大的贡献在于促进了免疫学基础研究和临床诊断。目前流式细胞术已被广泛用于细胞生物学、免疫学、肿瘤学、血液学、病理学、遗传学和临床检验等多学科领域的基础和临床研究。流式细胞仪细胞分析原理（L）在压电晶体上加上频率为 30kHz 的信号，使液柱断裂成一连串均匀的液滴。当某类细胞的特性与要分选的细胞相同时，流式细胞仪就会在这类细胞形成液滴时给含有这类细胞的液滴充以特定的电荷，带有电荷的液滴向下落入偏转板间的静电场时，依所带电荷的符号分别向左偏转或向右偏转，落入指定的收集器内，从而达到细胞分类收集的目的。FCM 光学系统中的主要光学元件的滤光片，主要分为
14、长通滤片、短通滤片和带通滤片三类。前向角散射 前向角散射与被测细胞的大小有关，确切地说与细胞直径的平方密切相关。侧向角散射 侧向角散射是指与激光束正交 900 方向的散射光信号。侧向散射光对细胞膜、细胞质、核膜的折射率更为敏感，可提供细胞内精细结构和颗粒性质的信息。流式细胞仪细胞分选器(L)细胞分选器由水滴形成、分选逻辑电路、水滴充电及偏转三部分组成。 小水滴的形成 安装在流动室上的压电晶体加有数万赫兹的电信号，于是压电晶体带动流动室一起振动。液流从喷孔出来后，需要经过一段距离才被破坏形成水滴。 逻辑电路 给水滴充电的脉冲并不是在做出分选决定时立即产生并加到流束上的，而是当细胞达到分离点时才加
15、上的。 水滴的充电与偏转 当水滴从流束上将要断开时给整个流束充电，则水滴从流束上断开后便带有同极性的多余表面电荷。流式细胞仪的主要性能指标 (L)1. 荧光测量灵敏度灵敏度的高低是衡量仪器检测微弱荧光信号的重要指标。一般以能检测到单个微球上最少标有 FITC 或 PE 荧光分子数目来表示，现在的 FCM 均可达到检测小于 100 个荧光分子的指标。2. 仪器的分辨率分辨率是衡量仪器测量精度的指标，通常用变异系数 CV 值表示。3. 前向角散射光检测灵敏度前向角散射光检测灵敏度是指能够检测到的最小颗粒大小，一般目前商品化的 FCM 可5以测量到 0.2m0.5m 左右。4. 分析速度一般可达到
16、3000 个/秒 6000 个/ 秒左右，大型机已达到每秒几万个细胞。5. 分选指标分选指标主要包括分选速度、分选纯度和分选收获率。电泳基本原理 (L)物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负电荷量相等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学反应条件下，某些物质分子会成为带电的离子（或粒子） ，不同的物质，由于其带电性质、颗粒形状和大小不同，因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同，因此可使它们分离。常用电泳仪的基本结构 (L)通常所说的电泳设备可分为主要设备（分离系统）和辅助设备（检测系统） 。主要设备指电泳仪电源、电泳槽。电泳电源 是建立电泳电场的装置，它通常为稳定（输出电压
17、、输出电流或输出功率）的直流电源，而且要求能方便地控制电泳过程中所需电压、电流或功率。电泳槽 是样品分离的场所，是电泳仪的一个主要部件。槽内装有电极、缓冲液槽、电泳介质支架等。免疫电泳的两大优点及其应用 (L)免疫电泳是电泳分析与沉降反应的结合产物优点：一是加快了沉淀反应的速度；二是将某些蛋白质组分根据其带电荷不同而分开，再与抗体起反应，从而使此方法更为微量法多样化。应用：纯化抗原或抗体的成分分析，分析其纯度；正常及异常体液中蛋白质成分的分析；抗原和抗体的相对应性。电泳仪的主要技术指标: (L) 1 输出电压 8 连续工作时间 2 输出电流 9 保护措施 3 输出功率 10 显示方式 4 电压
18、稳定度 11 定时方式 5 电流稳定度 12 电源电压 6 功率稳定度 13 电源频率 7 输出组数 14 功耗荧光光谱仪的基本结构荧光分光光度计的结构包括五个基本部分： 激光光源：用来激发样品中荧光分子产生荧光。常用汞弧灯、氢弧灯及氘灯等，目前荧光分光光度计以用氘灯为多。 单色器：用来分离出所需要的单色光。仪器中具有两个单色器，一是激发单色器，用于选择激发光波长；二是发射单色器，用于选择发射到检测器上的荧光波长。 样品池：放置测试样品，用石英做成。检测器：作用是接受光信号，并将其转变为电信号。记录显示系统：检测器出来的电信号经过放大器放大后，由记录仪记录下来，并可数字显示和打印色谱法：是一种
19、物理分离技术，实质上是利用混合物中各个组分在互不相溶的两相（固定相和流动相）之间的分配的差异而使混合物得到分离的一种方法。(P)气相色谱仪基本结构6气路系统、进样系统、色谱柱、温度控制系统、数据处理、记录系统、电子路及电源。生物安全柜内实验操作注意事项 (J)(1)平行摆放柜内物品； (2)操作宜缓慢；(3)柜内移动物品时应尽量避免交叉污染；(4)避免震动； (5)柜内尽量不要使用明火(6)个人防护 (7)避免震动实验室自动化系统的基本结构1.标本运输系统2.标本前处理系统：包括样本分类和条码识别，自动装载和样本离心，样本质地识别、提示，样本管去盖，样本再分注及标记。3.自动化分析仪4.分析后处理输出系统5.临床实验室信息系统细胞培养箱的性能指标：温度控制精度、二氧化碳浓度控制精度、测量系统自动校正功能、箱内湿度、洁净级别。(P)催化除氧系统：厌氧菌最佳生长气体环境条件是 85%氮气，5%二氧化碳和 10%氢气。(p)
