1、,酪蛋白的制备,目 的,学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法,原 理,牛乳中主要蛋白质是酪蛋白，含量35g/L，酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物，pI为4.7。利用等电点时溶解度最低原理，将牛乳的pH调至4.7，酪蛋白沉淀下来，再用乙醇和乙醚洗涤沉淀除去脂类杂质可得纯的酪蛋白。,主要器材设备,1. 离心机， 天平，滤纸（=9cm），打孔器，表面皿 2. 抽滤装置（布氏漏斗，抽滤瓶，圆形抽滤管，橡皮塞） 3. 40水浴 4. 通风柜,试剂材料,牛奶 （ 40预热 ）95%乙醇 无水乙醚 0.2M pH4.7HAC-NaAC 缓冲液 （ 40预热 ） 乙醇-乙醚混合液（V/V=1/1） 1000mL,操
2、 作,将牛奶和pH4.7HAC-NaAC 缓冲液预加热至40， 用离心管取50mL的牛奶再缓缓加入50mL的pH4.7HAC-NaAC 缓冲液，不时搅拌均匀，将悬浮液冷至室温，离心，3500r/min，15min，弃上清，得酪蛋白粗制品。 用蒸馏水洗沉淀（不要搅散）3次，再次离心，3000r/min，10min，弃上清。 在沉淀中加入约20mL95%乙醇，搅拌片刻，将悬浊液全部转移到布氏漏斗中抽滤。用乙醇-乙醚混合液洗沉淀2次，最后用无水乙醚洗沉淀2次，抽干。 将沉淀摊开在表面皿上，风干（或烘干），得酪蛋白纯品。 称量，计算含量和得率。含量： 酪蛋白 g/100mL牛乳 （g%）得率： 测得含量/理论含量100% （理论含量为 3.5g/100mL牛乳）,
