1、邻二氮菲分光光度法测定微量铁,实验目的,学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。 掌握TU-1901紫外-可见分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。,根据朗伯比耳定律：A=bc，当入射光波长及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。,实验原理,在pH=29的溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen
2、)生成稳定的桔红色配合物Fe(phen)32+：此配合物的lgK稳=21.3，摩尔吸光系数510 = 1.1104 Lmol-1cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲生成31配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH2OHHCl)将Fe3+还原为Fe2+，其反应式如下： 2Fe3+2NH2OHHCl2Fe2+N2+H2O+4H+2Cl- 测定时控制溶液的酸度为pH5较为适宜。用邻二氮菲可测定试样中铁的总量。,实验预习,预习邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。 了解TU-1901紫外-可见分光光度计的主要构造和使用方法。,TU-1901紫外-可见分光光度计，1
3、cm吸收池，10 mL 吸量管，50 mL 比色管（或容量瓶）,仪器和试剂,1.010-3 molL-1 铁标准溶液：准确称量0.4822 g NH4Fe(SO)412H2O于烧杯中，加入80 mL 6 molL-1 HCl和少量水，溶解后转移至1 L容量瓶中，以水稀释至标线，摇匀。100gmL-1铁标准溶液: 准确称量0.8634 g NH4Fe(SO)412H2O于烧杯中，加入80 mL 6 molL-1 HCl和少量水，溶解后转移至1 L容量瓶中，以水稀释至标线，摇匀。0.15%邻二氮菲水溶液，10%盐酸羟胺溶液（新配），1 molL-1乙酸钠溶液，1 molL-1 NaOH溶液，6 m
4、olL-1 HCl（工业盐酸试样）,1. 启动计算机，打开主机电源开关，启动工作站并初始化仪器。 2. 在工作界面上选择测量项目（光谱扫描，光度测量），本实验选择光谱扫描，设置测量条件（扫描范围，测量波长等）。 3. 将空白放入测量池中，点击START扫描空白，点击ZERO校零。 4. 标准曲线的制作。,基本操作,吸收曲线的绘制和测量波长的选择：用吸量管吸取2.00 mL1.010-3mol.L-1标准溶液，注入50mL比色管中，加入1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，加入2.00 mL0.15%邻二氮菲溶液，5.0 mL NaAc溶液，以水稀释至刻度。在光度计上用1 cm比色皿，采用试剂
5、溶液为参比溶液，在440-560 nm间，每隔10 nm测量一次吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择测量的适宜波长。,实验步骤,2. 工业盐酸中铁含量的测定： (1)标准曲线的制作: 在5支50 mL比色管中，分别加入0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mL 100 g/mL铁标准溶液，再加入1.00 mL10%盐酸羟胺溶液，2.00 mL0.15%邻二氮菲溶液和5.0 mL NaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。 (2)试样测定: 准确吸取2.0 mL工业盐酸三份，按标准曲线的操作步骤，测定其吸光度。,1. 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择测量的最适宜波长条件。 2. 以铁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。根据试样的吸光度，从标准曲线求出工业盐酸中铁的含量（以g/mL表示），计算测量结果的平均值和相对偏差。,数据处理,1. 邻二氮菲分光光度法测定微量铁时为何要加入盐酸羟胺溶液？ 2. 吸收曲线与标准曲线有何区别？在实际应用中有何意义？ 3. 透射比与吸光度两者关系如何？测定条件指哪些？ 4. 邻二氮菲与铁的显色反应，其主要条件有哪些？ 5. 加各种试剂的顺序能否颠倒？,注意事项和问题,
