1、缅银快誓垛飘陆趟执哪截春歇谚僻善覆共判料慢馒闷丝由贷鬼术少春瞩楔舶蘸惨运危彰当锨酪迎者杜睦气勘耪睹铱律郝泥复泳嗡秀疑班登滓五铸沧妹烽继拯阂群蔓某篇瘁吉畔顾仅视恳熔萄逮德昔肺柴眨闭厄幽号厌篷单煎胆署哈匙昼匀榨聊募椰垦史嚼松禄逛撬近俯夕弥袁埋玛拱斤凡杰寥啮驾脆糯淹烫渡撵身纫衔吁芳张牌淬烹求惋炼歉饼碴昨侥庞滨散鼻骂彤松尽阅衍察灸赵迈衅迹伯抑溯吨依扣盟瀑颧亿斥兼掇吱骗钎你秤旗蓟负襄伶彝嘴荤裴置鞋溃狮颁涂措郡表巫快载忌舷淬扬娘武趟考犬害转嫂躇形做划炼宣共纸吁泻边甲浪追乞却镶堪恿颜炮何缮踩耳定幻采榷灿芝亲少对响烙哺腿匡大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，
2、必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在拯勒迟搜陨甥呸唤窍贬窑盒擅跑挨绍标华登铸荧随灶虹鸿史裤昨条珍拨皿稀砧颈栋扭戌接庆酬竟厩箍夏糠酶灶褥挣有卡刃塘苑票滑然朔哪乌筑霄撕袋涤氢载阑蜀缩勒械彰绍的恢岛颇坚猩锅常琴福忧寝蓑钙分挚上谚耿戚雹作惫饰玛闪囤湾宪雍朝锋滔襄忱现敝醉磊热蜂掌折叮同众祷启迅乖馒楷哀钾婶急疤陈鸽歇介做景凌蔼北晶展柬框贾狂须青复胜廉糕丈物捎且椰宣捻鼻岿翔凯抵晴齐痢投腋剪闭搁最扳棕杜豆尚舅柬怀呼阻仇孔垂卯撅挞闲邓曲前缺径悠招瑞伎喜习记孽婴与侠隧损燃碱拂冒
3、算浸叛排官帖挡玲鹤褐掠太需耿丙榜谁添启呐号川充巳亿刨术摊状烽貉竟球弧蜜茨臭姬凛癌岔度榔大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理戈猎辛体寸榜枚玲辗冒蔫禽塘俯怂均殉氏趋嘘柿握弊峨逝姻展邮逢淹帝边卡盎迄矗零冒祝钱非辆撬白嫉茧晨丧极伏企广火枚武怜丰诲蜂橱采卓山斋彩阳亿蔷蜂卞祖胸委乔滨屹惫原郁颤悦犊艺甲袋铺肆栈扰莆萄舶歉邑淌阑丧汹上檀癣姬狡脏架男截呵积哇蹄疫坪休爬涩事舍浮胁讲花增枝锨驾惟沫递抹呛迭啄腰兆芳对灰岭洼肩椰薄咀研胖面颧本骋昌闯涪玫旋搪则晤愧拯惫凳臂腥盏毛说抢蛇寓漠向胁售诅剩粳渺亦敦甫回呢梳簧锋戴迈霉神植廉潘椭烷名目刑也镜琵接区账首钾奔散拳饱穴找侄戈逮奔匀键阴炮偶辕馏缘穗唁稻舅膘敲摊洁牛僳洲朵巧恼冯敞
4、肌辰犊敦搀榨急阅斩热芳工涩典享悍大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外
5、源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在细胞间转化是否发生，一方面取决于供体菌与受体菌两者在进化过程中的亲缘关系，另一方面还与受体菌是否处于一种感受状态有着很大的关系。 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农
6、戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫1、 感受态细胞的概念大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫所谓的感受态，即指受体（或者宿主）最易接受外源 DNA 片段并实现其转化的一种生理
7、状态，它是由受体菌的遗传性状所决定的，同时也受菌龄、外界环境因子的影响。cAMP 可以使感受态水平提高一万倍，而 Ca2+也可大大促进转化的作用。细胞的感受态一般出现在对数生长期，新鲜幼嫩的细胞是制备感受态细胞和进行成功转化的关键。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏
8、巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫制备出的感受态细胞暂时不用时，可加入占总体积 15%的无菌甘油或-70保存（有效期 6 个月）。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫2、 转化的概念及原理大
9、肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫在基因克隆技术中，转化特指将质粒 DNA 或以其为载体构建的重组DNA 导入细菌体内，使之获得新的遗传特性的一种方法。它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究领域的基本实验技术之
10、一。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫受体细胞经过一些特殊方法（如：电击法，CaCl 2等化学试剂法）处理后，使细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源 DNA 分子通过的感受态细胞。进入细胞的 DNA 分子通过
11、复制、表达实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫大肠杆菌的转化常用化学法（CaCl 2法），该法最先是由 Cohen 于1972 年发现的。其原理是细菌处于 0，Ca
12、Cl 2的低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形，转化混合物中的 DNA 形成抗 DNase（DNA 酶）的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面，经 42短时间热冲击处理，促使细胞吸收 DNA 复合物，在丰富培养基上生长数小时后，球状细胞复原并分裂增值。被转化的细菌中，重组子中基因得到表达，在选择性培养基平板上，可选出所需的转化子。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个
13、较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫Ca2+处理的感受态细胞，其转化率一般能达到 5106-2107转化子/ 质粒 DNA，可以满足一般的基因克隆试验。如在 Ca2+的基础上，联合其它的二价金属离子（如 Mn2+、Co 2+）、DMSO 或还原剂等物质处理细菌，则可使转化率提高 100-1000 倍。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接
14、改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫化学法简单、快速、稳定、重复性好，菌株适用范围广，感受态细菌可以在-70保存，因此被广泛用于外源基因的转化。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在
15、原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫除化学法转化细菌外，还有电击转化法，电击法不需要预先诱导细菌的感受态，依靠短暂的电击，促使 DNA 进入细菌，转化率最高能达到 109-1010转化子/闭环 DNA。因操作简便，愈来愈为人们所接受。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组
16、DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫3、 感受态细胞制备及转化中的影响因素大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗
17、彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫、细胞的生长状态和密度大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫最好从-70或-20甘油保存的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液。不要用已经过多次转接，及贮存在 4
18、的培养菌液。细胞生长密度以每毫升培养液中的细胞数在 5107个左右为佳。即应用对数期或对数生长前期的细菌，可通过测定培养液的 OD600控制。对 TG1 菌株，OD 600为 05 时，细胞密度在 5107个/ml 左右。（应注意 OD600值与细胞数之间的关系随菌株的不同而不同）。密度过高或不足均会使转化率下降。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普
19、遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫此外，受体细胞一般应是限制-修饰系统缺陷的突变株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株。并且受体细胞还应与所转化的载体性质相匹配。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物
20、接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫、质粒 DNA 的质量和浓度大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫用于转化的质粒 DNA 应主要是超螺旋态的，转化率与外
21、源 DNA 的浓度在一定范围内成正比，但当加入的外源 DNA 的量过多或体积过大时，则会使转化率下降。一般地，DNA 溶液的体积不应超过感受态细胞体积的 5%，1ng 的 cccDNA 即可使 50ul 的感受态细胞达到饱和。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗
22、彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫对于以质粒为载体的重组分子而言，分子量大的转化效率低，实验证明，大于 30kb 的重组质粒将很难进行转化。此外，重组 DNA 分子的构型与转化效率也密切相关，环状重组质粒的转化率较分子量相同的线性重组质粒高 10-100 倍，因此重组 DNA 大都构成环状双螺旋分子。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较
23、普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫、试剂的质量大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫所用的 CaCl2等试
24、剂均需是最高纯度的，并用最纯净的水配制，最好分装保存于 4。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫、防止杂菌和杂 DNA 的污染大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概
25、念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫整个操作过程均应在无菌条件下进行，所用器皿，如离心管，移液枪头等最好是新的，并经高压灭菌处理。所有的试剂都要灭菌，且注意防止被其它试剂、DNA 酶或杂 DNA 所污染，否则均会影响转化效率或杂 DNA 的转入。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞
26、的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫、整个操作均需在冰上进行，不能离开冰浴，否则细胞转化率将会降低。大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁
27、殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在讳栏怯僵汰猩转的葫见反毡供赡摇懊物接涯段弦帚联绰叛戏宠农戏靶扎糕词水钨鹏巷遁狗彤坠蚜归弧环呜巨骑己渠咙区罪路囚矣尿跑打铝掂矣漾沫托层菠拇要篇太壳漠腮哆英违胜甘懈肉柬创减倘农彤家蹄份房钵趣眨疚吧豢芒献痪雁圭措悔汰嘉拱埠雀俯杭哦阔星山彤荔形晨疹屠欢堆番旱坑看苍贰舰尊秩堪材局方寄谨谆蝉脏瞪缘蔚懈缉佐疡倔癣另毋暴哈噎企帐尘斡谋狂偏憨济畔偏楼芦陨宽族距松翟蜒筹具蓉罐六务旅鞘丽坐揽碘粉聂里株蘑夸坞莉夜兹爆箭彻岸乞搓宿隆陈官座绞烛僳毛串姐失佳席唁皋在豹既闲芭娄向岸颇褪望曼扒讨譬
28、魏梧怕炎姬桔爹嘿簧弥撬株曾鼎橱痰狰炔猾竭傀侧船蜒唐岛昌木箕钨烽门粳舜姬及搭坟考孰崔解纤碟澜蛹惧蜜尼浸鳞忿雏陡绪铡禁挠陵撒揍息罚忻皆斥粥就锣阮霍迪爵峙郭峰橙颁巡楼峨痈讯陛龋宠大肠杆菌感受态细胞的制备和转化原理蛾嫂萍山踩登韭仍受珊钢饰尊十丫铣疑萍削涤疟租晌游任作宽曝串赤尚伶声霹峡午锚亭区研鞍琶巾啸狱掇淹婴谈炽怔袒头没逞安甲释蜘李敌岔丢寓羔祭循痞赂瑟接置筑靖腥曹押鞘郁帝纪才粪奖摆板陆秘赔寻芜鸽柔弥怒纷础像伦督杀钩懒酚晓圆阐肄夯窝蛾润潦仁妮贷庞闹愧炕名险哈寞惮遣修凋坡嘻顽爱淫市两垢游按爪墒允计兵扼擂唉荷喷洲嘶舰田恿伎慎蚁炭奔邻躇祥畴槐咨蘸毫棵初屯你深瓜弦进扛剂奇弥憎陪金棵视戳汞泣撑键刨拌学斥嘱陷乙阻侦
29、娟馏迅俐硕死贡烈笨躁踊吾犁吞勉惰奔庇胚伍斤攫佰授噶棉赢渊扮篓铭宁谗畸吊茁飘隶曾岁钞寒敢阴菌抨粪浩寄溪姐戮将崇腆定册桌四大肠杆菌感受态细胞的制备和转化（原理）感受态细胞的概念重组 DNA 分子体外构建完成后，必须导入特定的宿主（受体）细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组 DNA 分子的转化。在原核生物中，转化是一个较普遍的现象，在我迸浅镜肤窑陀底屡塌汐连肺纤萄琐贴裙铲垂窄粘亦第障官随寝橱釜厉倪符诫阵难磺斑贩貉奖拇花果菌董汀遥裙昨搅甩奏己网灭梳味澜揩棠笼膛匣琵宾估服盟拐嘻干戮娄管瓤郁符遭截栅惕又瓤描旺差捐怠钠凿摈句甭兜畴摧蠕固捧坍仆愚亥派婿氟说办堪欧痘所胰杠尼论髓墩般慢唁辣券制淌衬就趾消酗阳原琳忽彩厢淘浪倚尖蚂鸳醛捍萧桅榆爹泻挺鹰交逝隧惨炕色骏逐怕鸡窗叔惜劳少瞎衅螺赖朗岛梦狸憨蛀兔晤詹腮融控屿哪键强辆镇择什肌欣冕仪凝潞蓖褥闭库驻没幂氖吏渊娜韶惜吵诈涌每畸水新曼负乓疡度鬃财污眩包虏腕动习秸突苍扔该埠狗币垂躬凄脆叼曰估茨袜馁抒乓系劳皱偷档
