1、浸润性乳腺癌中 CK5/6、EGFR 以及激素受体表达的相关性分析冷冬妮1, 王 海2, 刘英娜1, 张 曙3, 周航波2, 黄 华3, 陆珍凤2Correlation analysisof theexpression of CK5/6, EGFRand hormonereceptorsin invasivebreast carcinomasLENG Dong ni1, WANG Hai2, LIU Ying na1, ZHANG Shu3, ZHOU Hang bo2, HUANG Hua3, LU Zhen feng21Department of Pathology, 454 Hospit
2、al of PLA, Jiangsu Nanjing 210002, China;2Department of Pathology, Nanjing General Hospital ofNanjing Military Command, PLA, Jiangsu Nanjing 210002, China;3Department of Pathology, The Hospital Affiliated Nantong College,Jiangsu Nantong 226001, China【Abstract】 Objective: To observe the expression an
3、d correlation of CK5/6, EGFR and hormone receptors in inva-sive breast carcinomas Methods: One hundred and forty six cases of invasive breast carcinoma were investigated withHE staining and EnVision immunostaining Results: All patients were females, 33 82 years in age ( mean 54 years) Histologically
4、, part of the tumors showed marked cellular pleomorphism and high mitotic index Immunohistochemical-ly, 31 cases were triple negative ( ER /PR /HER2 ) among the 146 cases of invasive breast carcinomas CK5/6was positive in 178% ( 26/146) of invasive breast carcinomas and 548% ( 17/31) of triple negat
5、ive breast car-cinomas EGFR was positive in 653% ( 17/26) of CK5/6 positive breast carcinomas and in 16 6% ( 20/120) ofCK5/6 negative breast carcinomas The expression of Ki 67 was more higher in CK5/6 positive breast carcinomasthan in CK5/6 negative breast carcinomas Conclusion: Basal like breast ca
6、rcinomas have higher incidence in triple negative breast carcinomas; high expression of Ki 67 in basal like breast carcinomas indicates poor prognosis【Key words】breast; basal like carcinoma; immunohistochemistry; EGFRModern Oncology 2010, 18( 06) : 1110 1113【摘要 】 目的 : 了解浸润性乳腺癌中 CK5/6、EGFR 以及激素受体的表达情
7、况及其相关性 。方法 : 采用 HE、免疫组化 ( EnVision 法 ) 检测 146 例浸润性乳腺癌 。结果 : 146 例患者均为女性 , 年龄 33 82 岁 , 平均 54 岁 。组织学上部分肿瘤细胞显著多形性 , 核分裂象多见 。免疫组化 : 146 例浸润性乳腺癌中 31 例为 ER、PR、HER2三阴性乳腺癌 。CK5/6 在浸润性乳腺癌及三阴性乳腺癌中的表达率分别为 17 8% ( 26/146) 和 54 8% ( 17/31) , EGFR 在 CK5/6 阳性和 CK5/6 阴性乳腺癌中的表达率分别为 653%( 17/26) 和 16 6% ( 20/120) 。K
8、i 67 在 CK5/6 阳性乳腺癌中的表达率显著高于 CK5/6 阴性乳腺癌中的表达率 。结论 : 基底细胞样型乳腺癌在三阴性乳腺癌中发病率较高 ; Ki 67 在基底细胞样型乳腺癌中高表达率提示该肿瘤预后差 。【关键词 】乳腺 ; 基底细胞样癌 ; 免疫组化 ; EGFR【中图分类号 】R7379 【文献标识码 】A DOI: 103969/j issn1672 499220100622【文章编号 】1672 4992 ( 2010) 06 1110 04基底细胞样型乳腺癌 ( basal like breast carcinoma,BLBC) 是一组具有肌上皮 /基底细胞基因表达及免疫表
9、型特征的乳腺癌 , 因其具有恶性度高 、侵袭性强 、临床预后差等特点而备受关注 1。免疫组化研究发现 BLBC 表达一种或多【收稿日期 】 2009 09 15【修回日期 】 2010 01 05【作者单位 】1解放军第 454 医院病理科 , 江苏 南京 2100022南京军区南京总医院病理科 , 江苏 南京 2100023南通大学附属医院 , 江苏 南通 226001【作者简介 】 冷冬妮 ( 1978 ) , 女 , 山东荣城人 , 医师 , 主要从事临床病理诊断工作 。E mail: dnleng_107163 com【通讯作者 】 刘英娜 ( 1955 ) , 女 , 江西人 , 副
10、主任医师 , 主要从事临床病理诊断工作 。种基底细胞样标记物 2, 如 CK5/6 等 , 部分病例表达表皮生长因子受体 EGFR, 并且多数 BLBC 不表达激素受体 ER、PR和 HER2 3。BLBC 的诊断需结合典型的形态学表现和免疫组化结果 。本研究观察了 146 例浸润性乳腺癌中 CK5/6、EGFR、ER、PR 以及 HER2 的表达情况 , 旨在综合分析上述抗体免疫表达在诊断和治疗 BLBC 中的意义 。1 材料与方法11 材料收集解放军第 454 医院及南京军区南京总医院和南通大学附属医院 2000 年 2009 年存档及会诊的浸润性乳腺癌146 例 。所有病例均为女性 ,
11、年龄 33 82 岁 , 平均 54 岁 。临床为无意中发现乳房包块而就诊 。所有病例术前均未经放射治疗或化学治疗 。0111 MODERN ONCOLOGY, Jun. 2010, VOl. 18, NO. 612 方法标本用 4%的甲醛固定 , 石蜡切片 , 行 HE 染色 、光镜观察 。免疫组织化学采用 EnVision 二步法 , 高温高压抗原修复 , DAB H2O2显色 。第一抗体为雌激素 ( ER) 、孕激素( PR) 、HER2、CK5/6、表皮生长因子受体 ( epithelial growthfactor receptor, EGFR) 和 Ki 67, 所有抗体均购自福州
12、迈新生物技术开发有限公司 。13 结果判定抗体表达于细胞膜 、细胞质或细胞核 , 呈棕黄色或棕褐色颗粒者为阳性细胞 。每例切片阳性细胞数占同类细胞数的 10%以上者视为阳性 。14 统计学处理抗体表达情况所得数据采用 2检验和 Fisher 精确概率法检验 , 应用 SPSS 100 软件进行分析 。P 0 001 为差异有统计学意义 。2 结果146 例浸润性乳腺癌中 31 例为 ER/PR/HER2 三阴性表达 , 64 例表达 ER、PR 而不表达 HER2, 8 例 ER、PR 阴性而HER2 阳性表达 。17 8% ( 26/146) 的浸润性乳腺癌表达CK5/6( 图 1) 。65
13、 3% ( 17/26) 表达 CK5/6 的肿瘤表达 EG-FR( 图 2) , 而仅 16 6% ( 20/120) 的 CK5/6 阴性的肿瘤表达EGFR( P 0 001, 见表 1) 。26 例 CK5/6 阳性肿瘤中 18 例( 692%) 为浸润性乳腺癌 级 , 肿瘤具有推挤性边缘 ( 图3) , 肿瘤细胞呈巢状或片状生长 , 3 例有大片地图状坏死 ( 图4) , 其中 2 例有中央疤痕 , 另 2 例有粉刺样坏死 。肿瘤细胞呈合体细胞样 ( 图 5) 、基底细胞样或具显著多形性 , 核分裂像及细胞调亡易见 。5 例 CK5/6 阳性为浸润性乳腺癌 级 ,3 例 CK5/6 阳
14、性为浸润性乳腺癌 级 。图 1 基底细胞样型乳腺癌中 CK5/6 阳性表达 ( SP 200)多数 CK5/6 阳性肿瘤具有高增殖活性 , 73% ( 19/26)CK5/6 阳性肿瘤 Ki 67 表达率高于 20%, 而仅 22 5% ( 27/120) CK5/6 阴性的浸润性乳腺癌 Ki 67 表达率高于 20%( P 0001, 见表 2) 。CK5/6 阳性肿瘤中 73%( 19/26) ER 阴性表达 , 692%( 18/26) PR 阴性表达 , 而 CK5/6 阴性肿瘤中ER 和 PR 的表达分别为 20% ( 24/120) 和 30% ( 36/120) ( P0001,
15、 见表 3、4) 。CK5/6 在 ER/PR/HER2 三阴性乳腺癌中表达率为 548%( 17/31) , 而 65 4% ( 17/26) 的 CK5/6 阳性肿瘤 ER/PR/HER2 三阴性表达 , 仅 11 7% ( 14/120) CK5/6 阴性肿瘤 ER/PR/HER2 三阴性表达 ( P 0 001, 见表 5) 。此外 , 具有基底细胞样表型的三阴性乳腺癌中 70 6% ( 12/17) 表达 EGFR, 而仅 8 3% ( 5/60) 的 ER + /PR + /HER2 /CK5/6 肿瘤表达 EGFR( P 0001) 。1111现代肿瘤医学 2010 年 6 月
16、第 18 卷第 6 期表 1 CK5/6 表达与 EGFR 表达的关系 nCK5/6 EGFR 阳性 EGFR 阴性 合计阳性 17 9 26阴性 20 100 120合计 37 109 146表 2 CK5/6 表达与 Ki 67 表达的关系 nCK5/6Ki 67 指数10% 10 20% 20%合计阳性 2 5 19 26阴性 61 32 27 120合计 63 37 46 146表 3 CK5/6 表达与 ER 表达的关系 nCK5/6 ER 阳性 ER 阴性 合计阳性 7 19 26阴性 96 24 120合计 103 43 146表 4 CK5/6 表达与 PR 表达的关系 nCK
17、5/6 PR 阳性 PR 阴性 合计阳性 8 18 26阴性 84 36 120合计 92 54 146表 5 CK5/6 表达与 ER/PR/HER2 表达的关系 nCK5/6ER/PR/HER2阴 /阴 /阴 阳 /阳 /阴 阴 /阴 /阳其它 合计阳性 17 4 1 4 26阴性 14 60 7 39 120合计 31 64 8 43 1463 讨论浸润性乳腺癌是一类高度异质性的恶性肿瘤 , 无论在组织形态 、免疫表型 、生物学行为还是治疗反应上都存在着极大的差异 。传统乳腺癌分类以形态学为基础 , 它不能很好的反应上述差异 。2000 年 , Perou 等 1首先采用含有 8102
18、种人类基因的 cDNA 芯片 , 对 42 例患者的 65 个乳腺肿瘤标本进行基因表达谱分析 , 发现不同的 mRNA 表达水平类型与肿瘤的生物学有相关性 , 这些肿瘤可以根据基因表达类型将乳腺癌分为基底细胞样型乳腺癌 ( basal like breast carcinoma,BLBC) 、管腔型 ( luminal subtype) 、正常乳腺样型 ( normalbreast like subtype) 和 HER2 高表达型 ( HER2 over expres-sion subtype) 1, 4。其中 BLBC 以其独特的基因表型及临床预后差的特点引起广泛的关注 。目前 BLBC
19、尚无统一的形态学诊断标准 。结合文献报道及本组研究所见 , 归纳 BLBC 具有以下形态学特征 : 多数呈现高级别浸润性导管癌形态特点 , 组织学分级为 级 ;肿瘤具有推挤性边缘 , 呈推进性 、非浸润性生长 ; 肿瘤中央瘢痕多见 , 有时可见地图样或粉刺样坏死 ; 肿瘤有时导管结构不明显 , 排列成实性片状 、团块状 、巢状及粗大的带状结构 ; 肿瘤细胞显著多形性或呈合体细胞样 , 界限不清 , 胞质少 , 核质比高 , 核分裂象和细胞调亡多见 ; 肿瘤间质极少 、其间有中等至多量淋巴细胞浸润 5。BLBC 的诊断应结合典型的形态学改变和免疫组化检查 。大量文献报道多数 BLBC 中 ER、
20、PR、HER2 三阴性表达 ,即为三阴性乳腺癌 , 因此临床上 BLBC 与三阴性乳腺癌极易混淆 。Bertucci F 等 6运用基因分析研究 BLBC 与三阴性乳腺癌的差异 , 指出三阴性乳腺癌不能等同于 BLBC, 前者是一组具有较大异质性的肿瘤 , 包含 BLBC( 约 70%) 和非 BLBC( 约 30%) 。Tan 等 7报道约 19%( 6/31) 的三阴性乳腺癌不表达 EGFR 和 CKs, 部分正常乳腺样型乳腺癌也具有 ER、PR、HER2 三阴性表达的特点 4。Kuroda 等 8也认为大多数三阴性乳腺癌为 BLBC, 但二者不能等同 。Lerma 等 3发现约 5% 4
21、5%的 BLBC可表达 ER, 15%的 BLBC 可表达 HER2, 因此并非所有的 BLBC 都是三阴性乳腺癌 。本组研究显示三阴性乳腺癌中 BLBC 发病率为 54 8%, BLBC 中约 65 4%( 17/26) 为三阴性乳腺癌 , 支持上述观点 。本组研究的 146 例浸润性乳腺癌中 65 4% 的 CK5/6 阳性肿瘤 ER/PR/HER2 三阴性表达 , 其组织学表现为高级别浸润性乳腺癌 , 肿瘤细胞异型性明显 、核分裂象多见 , 并见有地图状坏死或粉刺样坏死 。CK5/6 阳性肿瘤中细胞增殖指数 Ki 67 显著高于 CK5/6 阴性肿瘤 , 提示具有基底细胞样表型的乳腺癌预
22、后较差 。EGFR 在具有基底细胞样表型的三阴性乳腺癌中高表达 ( 70 6%) , 提示部分 BLBC 患者可能会受益于 EGFR 靶向治疗 。EGFR 是位于细胞膜的蛋白激酶受体 , 对维持细胞生长 、增殖等起关键作用 。EGFR 过度激活可以促使恶性肿瘤细胞增殖 、血管生成 , 促进转移 、抑制凋亡 9。在近年抗肿瘤分子靶向研究中 , EGFR 是关注最为广泛 、研究最为深入 、也是最有前途的治疗靶点之一 。目前EGFR 靶向治疗已成功应用于肺肿瘤中 , 其疗效得到广泛认可 10。肺癌患者对 EGFR 抑制剂的敏感性与其是否存在EGFR 突变密切相关 11。多数研究发现 EGFR 在 B
23、LBC 中表达增高 3, 9, 本组研究数据显示具有基底细胞样表型的三阴性乳腺癌中约 706%表达 EGFR, 因此推测 EGFR 的酪氨酸激酶抑制剂 , 如吉非替尼 ( gefitinib, Iressa) 和埃罗替尼 ( erlo-tinib, Tarceva) 等对部分 BLBC 患者治疗有效 12。此外 ,BLBC 中 EGFR 高表达与其预后较差密切相关 5, 11, 因此 EG-FR 表达与否可以作为判断 BLBC 预后的重要指标 。【参考文献 】 1 Perou CM, Sorlie T, Eisen MB, et al Molecular portraits of humanb
24、reast tumours J Nature, 2000, 406: 747 752 2 Nielsen TO, Hsu FD, Jensen K, et al Immunohistochemical andclinical characterization of the basal like subtype of invasivebreast carcinoma J Clin Cancer Res, 2004, 10: 5367 5374 3 Lerma E, Peiro G, Ramon T, et al Immunohistochemical heteroge-neity of brea
25、st carcinomas negative for estrogen receptors, progester-one receptors and Her2/neu ( basal like breast carcinomas) J Mod Pathol, 2007, 20: 1200 1207 4 Rakha EA, Reis Filho JS, Ellis IO Impact of basal like breastcarcinoma determination for a more specific therapy J Pathobi-ol, 2008, 75: 95 103 5 Ra
26、kha EA, Reis Filho JS, Ellis IO Basal like breast cancer: acritical review J J Clin Oncol, 2008, 26: 2568 2581 6 Bertucci F, Finetti P, Cervera N, et al How basal are triple nega-tive breast cancers J? Int J Cancer, 2008, 123: 236 240 7 Tan DS, Marchi C, Jones RL, et al Triple negative breast cancer
27、:molecular profiling and prognostic impact in adjuvant anthracycline treated patients J Breast Cancer Res Treat, 2008, 111: 27 44 8 Kuroda N, Ohara M, Inoue K, et al The majority of triple negativebreast cancer may correspond to basal like carcinoma, but triple negative breast cancer is not identica
28、l to basal like breast carcino-ma J Med Mol Morphol, 2009, 42: 128 131 9 Nalwoga H, Arnes JB, Wabinga H, et al Expression of EGFR and c2111 MODERN ONCOLOGY, Jun. 2010, VOl. 18, NO. 6 kit is associated with the basal like phenotype in breast carci-nomas of African women J APMIS, 2008, 116: 515 525 10
29、 Pao W, Miller VA Epidermal growth factor receptor mutations,small molecule kinase inhibitors and non small cell lung canc-er: current knowledge and future directions J J Clin Oncol,2005, 23: 2556 2568 11 Krause DS, Van Etten RA Tyrosine kinases as targets for cancertherapy J N Engl J Med, 2005, 353
30、: 172 187 12 Bhargava R, Gerald WL, Li AR, et al EGFR gene amplification inbreast cancer: correlation with epidermal growth factor receptormRNA and protein expression and HER2 status and absence ofEGFR activating mutations J Mod Pathol, 2005, 18: 1027 1033 ( 编校 : 李鹏超 )食管鳞癌患者手术前后外周血 T 细胞亚群与 NK、NKT 细胞
31、检测的临床意义洪超群1, 陈炯玉1, 杨卫平1, 吴 晓1, 游颜杰2Clinical significance of detecting the levels of T lymphocyte subsets, NK and NKT cellsin peripheral blood of patientswith esophageal squamouscell carcinoma beforeand afteroperationHONG Chao qun1, CHEN Jiong yu1, YANG Wei ping1, WU Xiao1, YOU Yan jie21Cancer Hospit
32、al of Shantou University Medical College, Guangdong Shantou 515041, China;2Medical College of Shantou University,Guangdong Shantou 515041, China【Abstract】 Objective: To analyze the characteristics and clinical significance of T lymphocyte subgroups, NK andNKT cells in peripheral blood of patients wi
33、th esophageal squamous cell carcinoma ( ESCC) Methods: T lymphocytesubgroups NK and NKT cells in peripheral blood of 78 patients with ESCC were measured by flowcytometry ( FCM) Results: Before operation, the level of NKT cells was significantly decreased in high differentiation group than that inmod
34、erate low defferentiation group ( P 005) For patients 14 days after operation, the level of CD8+lymphocytecells was decreased ( P 001) and CD4+/CD8+ratio was increased ( P 001) , compared with that before opera-tion Meantime, the levels of NK cells and NKT cells were also decreased markedly ( P 0 01
35、) Conclusion: Col-lapsed immunological functions could be improved after surgery Analyzing the levels of T lymphocyte subsets, NKand NKT cells will be helpful to evaluate the immunologic conditions of the patients with ESCC and provide valuableclues for clinical therapy【Key words】ESCC; T lymphocyte
36、subgroup; NK cells; NKT cellsModern Oncology 2010, 18( 06) : 1113 1115【摘要 】 目的 : 分析食管鳞癌患者手术前后外周血中 T 淋巴细胞亚群与 NK、NKT 细胞变化规律及其临床意义 。方法 : 应用流式细胞术检测 78 例食管鳞癌患者外周血中 T 淋巴细胞亚群及 NK、NKT 细胞的水平 。结果 :肿瘤切除术前 NKT 细胞水平在中低分化组较高分化组显著下降 ( P 005) ; 术后外周血中 CD8+T 细胞含量明显降低 ( P 001) , CD4+/CD8+比值显著升高 ( P 001) , 同时 NK 与 NKT
37、 细胞水平较术前显著下降 ( P 001) 。结论 : 手术可一定程度改善患者机体免疫功能 , 检查手术前后外周血 T 淋巴细胞亚群及 NK、NKT 细胞水平有助于患者的细胞免疫功能监测 , 为食管鳞癌临床治疗提供依据 。【关键词 】食管癌 ; T 细胞亚群 ; NK 细胞 ; NKT 细胞【中图分类号 】R7351 【文献标识码 】A DOI: 103969/j issn1672 499220100623【文章编号 】1672 4992 ( 2010) 06 1113 03【收稿日期 】 2009 08 21【作者单位 】1汕头大学医学院附属肿瘤医院 , 广东 汕头 5150412汕头大学医学院 , 广东 汕头 515041【作者简介 】 洪超群 ( 1980 ) , 男 , 广东汕头人 , 检验师 , 主要从事肿瘤基础研究工作 。【通讯作者 】 游颜杰 ( 1977 ) , 男 , 河北石家庄人 , 博士 , 主要从事肿瘤分子生物学研究 。E mail: youyanjie163 com3111现代肿瘤医学 2010 年 6 月 第 18 卷第 6 期