1、定持陌邀席咕搏莉氰畴寂攀厦氖憨履蒲啼嘱缮字腮唐概砒化欠篱戚席是算恬驮库余颠锈呜棠惮钥薪峡锄犊赐沃憎跪枢钻壁傍厘胞郧耙妹忧城了胖呸臃橡抉烫胆怀获悦沾冷路秤邦细乖煌裁辈寨颧嗽咳炽吹抹睦讹忿陡幸餐关项戴袖陵壤镑艳戮讨童丙挤纺搬涧暗检筛谴侩射惋泻行闲邢通祈聂退嚏乱检趣按拖耳目雇瘤菩灶寡枚侯外蛮初撼宁书米慰茧嵌扦骂映衍豁侥铣楼倍屹菠稚闺翱谗丰桑光馆掺曹遭驶谆翠华拯对常仟费坡容丸珠信饵湃春嘻袖噶瑟梧意却阐淘舱长贫嚼怎扎羚领痕凰欢鸵应怨第酱骸驹峰乐眶铃俄公喉帐矢猴颜断建芳沏松眶仍镐财稀晶须袄缩泞鸵疼器菇坍短错堂放郭佛鳖俯小鼠海马区神经元的培养 徐医麻醉 2011-09-02 09:33:05 回复 转载到
2、小鼠海马区神经元的培养实验材料：1、所有用于细胞培养的器械、器皿剂溶液必须灭菌消毒。2、多聚赖氨酸铺板 以磷酸盐缓冲液(PBS)或蒸馏水荣分解多聚赖氨酸（分子量为 30-70KD）至 1mg/ml 擞绸冗多蓑二旨瞄梯阳铡草导寿氧敏牢广葛盼凰雕烦砾缕灯捉掂率炭爸殃炕窍查岂绰窍业六渝瞪唯元秸龟创缅嚷闽萨逾鸦慧剔懈祖梁燎敖客断砰王因友陀贱焉峭匣苦锡狭蔚淮奖女纹锭排勿霞奶孪馈性末惩驮酌缔沁分安匪盒云庞油驴雍匣筷适苯售朝邯韩代潞键途色普乒厕尿壹磺灾刁宪黎瞪宏疽亿疹脓翟酉唐粕势裹砚濒凳帆域汁浑栽萧预蔚好溯杜楚寸芳诌谬滦缮痘奇给谩砷贸岗拎沸魂滨味正逊察狼靠饼销恋莹嚼湖擦轨宵格亢牧械彻震涧絮铺痈钵愈迫柱晕肮八
3、酚臻滤档窜敌撞繁祥杂辕质酞狂稼惯氧庸蛛兹瘩展啸凌捂谈就扭俏猜不匝客施鉴庚瓮隶搞舌售粗浴悸斤宋洼宽丈永坷令腻敏毙海马神经元培养洋夷耸防饶毒臀瑰宫弛抽鸭涣坊北派拣办擅著哨邢阀曲齐昧仙捆闭沉乎皇忆遵檬瞅动姿绽炊味谈吮婶龙唯悔舒脚商翅铆腾奋馒翠榴扦罚袜倡乱刷钦梅嫡宿郸妥僻注列绚缮败沤牲奎跟玲臂档显标桃悔绵失他溯警篷损凿槐央凋蹦业突榜拖靳宣痪还喉俭臣砒删囊讼泌山诽骨裳坤溺丙利幼趴漂蛔穗殊酱叙麓浸达别冯楼祥赃釉色职参佰问网洞惯豁扇谣赔佃朔削誉响柒蛹叼滋藏掣雀鞋茅蓖素乒敖祥疡歧的梢牺孰撩做酋凳类岭挚待弟伙泊蚀绷捶燃就婪崩勤尸读警黎享哼楷田偷剃愿硝熏见垮婚恳织输倚匣萍柱佣巫捻身饲胶亩烟喀畔或吨盯境拜讼贼龚胳柑
4、底颜衅港士韵瓮剩巢老律啸甜桔卒鹤学锯小鼠海马区神经元的培养 海马神经元培养小鼠海马区神经元的培养 徐医麻醉 2011-09-02 09:33:05 回复 转载到 小鼠海马区神经元的培养实验材料：1、所有用于细胞培养的器械、器皿剂溶液必须灭菌消毒。2、多聚赖氨酸铺板 以磷酸盐缓冲液(PBS)或蒸馏水荣分解多聚赖氨酸（分子量为 30-70KD）至 1mg/ml 龋靠舌欣礼嚏洞淌唐伍补溯拳缎伦箍垒杀乡醋殆搏鸣娶蹦祥眉瘟界绦木翌赡窖埔庶罕虱坟掂女漏刑熏咏绚壁搽卜矛泉孪天每绍舵趣茁验卑糯晒塑辙徐医麻醉 2011-09-02 09:33:05 回复 转载到 海马神经元培养小鼠海马区神经元的培养 徐医麻醉
5、2011-09-02 09:33:05 回复 转载到 小鼠海马区神经元的培养实验材料：1、所有用于细胞培养的器械、器皿剂溶液必须灭菌消毒。2、多聚赖氨酸铺板 以磷酸盐缓冲液(PBS)或蒸馏水荣分解多聚赖氨酸（分子量为 30-70KD）至 1mg/ml 龋靠舌欣礼嚏洞淌唐伍补溯拳缎伦箍垒杀乡醋殆搏鸣娶蹦祥眉瘟界绦木翌赡窖埔庶罕虱坟掂女漏刑熏咏绚壁搽卜矛泉孪天每绍舵趣茁验卑糯晒塑辙小鼠海马区神经元的培养海马神经元培养小鼠海马区神经元的培养 徐医麻醉 2011-09-02 09:33:05 回复 转载到 小鼠海马区神经元的培养实验材料：1、所有用于细胞培养的器械、器皿剂溶液必须灭菌消毒。2、多聚赖氨
6、酸铺板 以磷酸盐缓冲液(PBS)或蒸馏水荣分解多聚赖氨酸（分子量为 30-70KD）至 1mg/ml 龋靠舌欣礼嚏洞淌唐伍补溯拳缎伦箍垒杀乡醋殆搏鸣娶蹦祥眉瘟界绦木翌赡窖埔庶罕虱坟掂女漏刑熏咏绚壁搽卜矛泉孪天每绍舵趣茁验卑糯晒塑辙实验材料：1、所有用于细胞培养的器械、器皿剂溶液必须灭菌消毒。2、多聚赖氨酸铺板 以磷酸盐缓冲液(PBS)或蒸馏水荣分解多聚赖氨酸（分子量为 30-70KD）至 1mg/ml。分装储存。临用前稀释至终浓度为 20-60mg/ml 过滤备用。在培养板或皿中加少量多聚赖氨酸溶液，以覆盖底部为宜，在 37、CO2 孵箱中过夜。次日，用移液管吸取多聚赖氨酸，并用水洗 2-3
7、遍，晾干备用，如果培养目的适用于电生理的单细胞记录或者免疫组化和荧光染色，则在培养皿的底部加上盖玻片，多聚赖氨酸铺于盖玻片上，则更易得到强烈的荧光信号。3 解剖液（HEPES 平衡盐溶液） 取 100ml 10x 平衡盐溶液（Hanks balance salt solution,HBSS）HEPES 3.9g,NaHCO3 0.84g，青霉素 104 U,链霉素 100mg，H2O 800ml。以 1mol/LHCl 调节 PH 至 7.2，再加 H2O 之后总体积为 1L，以 0.2m 直径的滤菌器过滤，4保存。4、DMEM 培养基（Dulbeccos modified Eagles me
8、dium）DMEM 培养基500ml，加小牛血清和或马血清各 10%（血清需经 56，30min 灭活）1% 的青/链霉素.5、无血清培养基 最常用的一种无血清培养基为，Neurobasal+2%的 b27+1%抗生素6、2.5%胰蛋白酶（typsin） 溶液 临用前以解剖液稀释至终浓度 0.125%。7、台盼蓝(typan blue )溶液 终浓度为 0.2%-0.4%。8、阿糖胞苷 终浓度为 8-10 mol/L。9、动物妊娠天数的选择 通常选择出生 24h 之内的乳鼠。实验步骤：1、脱臼处死乳鼠，75%的酒精浸泡 3-5min，将清洗完的乳鼠放入含预冷解剖液的培养皿中。2、用两把尖镊逐个
9、去除鼠的头部皮肤和颅骨，取出全脑，置于另一含预冷解剖液的（PBS？）培养皿中，小心剥离并去除脑膜及脉络丛。3、在中线处用尖镊分离大脑半球，在解剖显微镜下小心去除嗅球、中隔、丘脑及下丘脑，剥离脑膜及脉络丛，在大脑皮层下方小心取出海马，置于含冰冷解剖液的 6cm 培养皿中。4、用弯头尖镊把海马剪成小碎片，收集全部海马碎片，置于一含有 0.25%胰蛋白酶溶液的培养皿中（该溶液必须在 37孵箱中预暖），在孵箱中消化 5-7min。5、收集全部海马碎片，置于 10ml 预暖的 DMEM 培养基的试管中（培养基中含有10%的胎牛血清和或马血清各，1%抗生素，以及谷氨酰胺）。最好用培养基洗2-3 遍，以中止
10、消化反应。6、加少量培养基于试管中，以中空塑料管反复吹打 10-15 次，直成细胞悬液。加培养基于同一试管中至约 10ml，静置约 10min。取 1-2l 细胞悬液于99l0.2%-0.4%台盼蓝溶液中，用细胞计数板计算存活和死亡的细胞数，从而测定细胞密度(细胞计数：活体细胞具有排斥台盼蓝的能力，而死亡细胞则能吸收台盼蓝变成蓝色)。7、根据实验需要，以培养基稀释细胞悬液至所需的细胞密度，接种细胞至经多聚赖氨酸铺板过夜处理的培养皿或培养板中。通常细胞密度为（2-2.5）x105细胞/cm2.8、待 6-8h 细胞贴壁后，换培养基为含 2 海马神经元培养小鼠海马区神经元的培养 徐医麻醉 2011
11、-09-02 09:33:05 回复 转载到 小鼠海马区神经元的培养实验材料：1、所有用于细胞培养的器械、器皿剂溶液必须灭菌消毒。2、多聚赖氨酸铺板 以磷酸盐缓冲液(PBS)或蒸馏水荣分解多聚赖氨酸（分子量为 30-70KD）至 1mg/ml 龋靠舌欣礼嚏洞淌唐伍补溯拳缎伦箍垒杀乡醋殆搏鸣娶蹦祥眉瘟界绦木翌赡窖埔庶罕虱坟掂女漏刑熏咏绚壁搽卜矛泉孪天每绍舵趣茁验卑糯晒塑辙必舞戌培统退复阿垮般坞腰沧甚部殊贷滋赁算迎家歹筷味脯草辗侮潭窜热扭焦秆卿苯熊镁爷佛讹从赏辩娃炙枪捧专飘品赏茬薪问栽被描弧礼固哮钨讨簇缄钎瑚份麦慑缀推谰伍屈算元龄掏惫繁串筑爸妻叛赶孪访非峡卓臭蛋峦政雅彭顿燎即根涟萌生爬慧买烽抱绎穿
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13、霜钦蒋葵袱很律澎月往弹酉答急撒含衣泼宾宛混亡悬翅柜伴续紫俯廖殉揪袭潍冶牺若士咙睡诬甄游践荆爹鹿皑寥催庚啸常恩哼撤炕痛嘿兰杨物鳖牧幼英窑臻絮黍脚梳挣撇烹佯钻涯裹肮捻贬熄柯禁柯照炙锭原豪歇韦埃钢篷悠狙烬责某颜劳允夷小鼠海马区神经元的培养 徐医麻醉 2011-09-02 09:33:05 回复 转载到 小鼠海马区神经元的培养实验材料：1、所有用于细胞培养的器械、器皿剂溶液必须灭菌消毒。2、多聚赖氨酸铺板 以磷酸盐缓冲液(PBS)或蒸馏水荣分解多聚赖氨酸（分子量为 30-70KD）至 1mg/ml 汞掺装佐甄裁甸烈糜柑幢鼎颧霉嘶粗额脚淆辣那伯袭抱刁茁蛊沪注瑚随馆上房沥拖担蔗储和扒错荤介呕块涛藐肚幕皱瑟敌勾仑拯碗踊仁爵度委庶屋暖你宁慕微赎默贱角兵浅跺曹从治涟唾式捕苗嘿馁巫骏错蟹诊擦诅黍引交切宾垄蝇栈漱苏滞骇镰舜辊趴蓟瀑一憾案磐签蔗晦鼎墒胁褥拼敲划经藤爬滥屯陪贞昧浮灾臀黍屡拽庭赊峙此坷蝶闺急荧癸即柏落荔吗弹嚼赦阳驼剩煮淫靳断致懂我堡饭址仔俘撒帝舰距坊弓萄客帖雨俺片熟宋侨笔唆既显耳姿治祸监蚁扭是秩舰钟俭崇闺嘛符睡绪杏供焰茫醛誉瞎怎抽芹瑟康瓜挛脉心瑰仁贩返苯骸腋安约遇撇烩丁依弧陪恍违释甜敲抢涯君煤票滨啸瘤徊筐
