1、邻二氮氮菲分光光度法 测定试样中的微量铁,实验十,实验原理,邻二氮菲（phen）和Fe2+在pH39的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen)32+，其lgK=21.3，508=1.1104 Lmol-1cm-1，铁含量在0.16gmL-1范围内遵守比尔定律。显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。,有关反应如下:2Fe3+ + 2NH2OHHCl2Fe2+ + N2+2H2O + 4H+ + 2Cl-Fe2+ + 3phen Fe(phen)32+,用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列
2、浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度A，以溶液的浓度C为横坐标，相应的吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度Ax，根据测得吸光度值Ax从标准曲线上查出相应的浓度值Cx，即可计算试样中被测物质的质量浓度。,仪器和试剂,1仪器：UV-1000型紫外-可见分光光度计，1cm比色皿。 2试剂：（1）0.10 mgmL-1铁标准溶液。 （2）100 gL-1盐酸羟胺水溶液。用时现配。 （3）1.5 gL-1邻二氮菲水溶液。避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。 （4）1.0 molL-1乙酸钠溶液。,实验步骤,1显色标准溶液的配制 在序号为16的6只50
3、mL容量瓶中，用吸量管分别加入0，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00 mL铁标准溶液（含铁0.10mgmL-1），分别加入1.00 mL 100 gL-1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各加入2.00 mL 1.5 gL-1邻二氮菲溶液、5.00 mL 1.0 molL-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。 2吸收曲线的绘制 在分光光度计上，用1cm吸收池，以试剂空白溶液（1号）为参比，在360700 nm之间进行扫描，测定待测溶液（5号）的吸光度A，得到以波长为横坐标，吸光度为纵坐标的吸收曲线，从而选择测定铁的最大吸收波长max。,3标准曲线的测绘 以步骤1中试剂空白溶液（1号）为参比，用1cm吸收池，在选定波长下测定26号各显色标准溶液的吸光度。以铁的浓度(mg.mL-1)为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 4铁含量的测定 移取试样溶液（7号）1.00mL,按步骤1显色后，在相同条件下测量其吸光度Ax，由标准曲线上查出对应的Cx，再进一步计算试样中微量铁的质量浓度CFe。,思考题,1用邻二氮菲测定铁时，为什么要加入盐酸羟胺？其作用 是什么？ 2测绘标准曲线和测定试液时，为什么要以试剂空白溶液 为参比？,
