1、微型比色分析法应用与研究朱天荣 (甘肃省平凉医学高等专科学校 甘肃 平凉 744000)关键词:微型比色分析;应用;研究在医用化学及分析化学实验中,光电比色法是传统定量分析方法之一,光电比色法避免了用眼睛观察颜色而代来的误差,准确度高,但操作复杂,且在仪器数量有限的情况下,无法满足学生大面积开展第二课堂所需,为此笔者试用微型化学实验专用仪器多用滴管和九孔井穴板进行微型比色分析,操作简便,可实现人手一套仪器,独立性强,适合课堂内外,应用效果良好。1碘盐含碘量测定1.1 原理IO3-+5I-+6H+ = 3I2+3H2O 碘与淀粉生成蓝色配合物。1.2 方法准确称取经 105至 110烘干至恒重的
2、碘酸钾 0.1686g,用水溶解后定量移入 1000ml 容量瓶中,用水稀释至刻度,该溶液含碘为 1/10000,以此为母液,二次稀释后置于九孔井穴板的 1 至 5#凹穴中,制成 1/100000、1/70000、1/50000、1/20000、1/10000 梯度,各凹穴中加入淀粉碘化钾溶液 1 滴,依次呈现浅红色、浅紫色、紫蓝色、深紫蓝色、黑紫蓝色,另取待测盐样 0.3g 置于 6#凹穴中,加 1 滴淀粉碘化钾溶液和 4 滴水,用细玻璃棒搅拌 1 分钟后,与标准色梯比较确定含碘量。1.3 结果若盐样呈浅红色,则食盐含碘量小于 5mg/Kg,判定为非碘盐;若盐样呈紫蓝色,则食盐含碘量大于 5
3、mg/Kg,判定为合格碘盐。2白酒度数测定2.1 原理白酒度数即乙醇百分浓度,乙醇遇碘仿试剂(次碘酸钠)发生碘仿反应生成碘仿黄色絮状沉淀物。CH3CH2OH + NaIO CHI 3+ HCOONa2.2 方法准确配制 35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%标准乙醇水溶液,用多用滴管各取 6 滴分别置于九孔井穴板的 1 至 7#凹穴中,制成白酒度数为 35 度、40 度、45 度、50 度、55 度、60 度、65 度的比色梯度,各凹穴中加入碘仿试剂 2 滴,黄色度、浊度依次加深。另取待测酒样 6 滴置于 8#凹穴中,加等量碘仿试剂,与标准色梯比较确定白酒度数。2.3 结果若酒
4、样度数小于 40 度,判定为低度酒;若酒样度数大于 60 度,判定为高度酒。3水的总硬度测定3.1 原理水的总硬度是指水中钙镁离子的总含量。每升水中含 0.5mmol/L钙镁离子为 1 度,钙镁离子遇铬黑 T 成紫红色。3.2 方法准确配制 0.5mmol/L 、1.5mmol/L 、2.5mmol/L 、3.5mmol/L 、4.0mmol/L 、15mmol/L CaCl2标准溶液,在九孔井穴板的 1#凹穴中加入 6 滴蒸馏水, 2 至 7#凹穴中按浓度由低到高依次加入 6 滴 CaCl2标准溶液,制成硬度为 0、1、3、5、7、8、30 度的标准比色梯度,各凹穴中加 1 滴铬黑 T,颜色
5、由深蓝色变至紫红色且逐渐加深。另取待测水样 6 滴置于 8#凹穴中,加 1 滴铬黑 T,用细玻璃棒搅拌,并与标准色梯比较确定水样硬度。3.3 结果若水样硬度小于 8 度,判定为软水;若水样硬度大于 8 度小于 30度,判定为硬水;若水样硬度大于 30 度,判定为最硬水。4.维生素 C 含量测定 4.1 原理维生素 C 为酸性己糖衍生物,其中性溶液遇 FeCl3呈紫色,颜色越深,浓度越大。4.2 方法在九孔井穴板的 1 至 6#凹穴中按浓度由低到高依次加入 6 滴 1%、2%、3%、4%、5%、6%标准维生素 C 溶液和 2 滴饱和 Na2CO3溶液,再各加入 2 滴 0.1 mmol/L Fe
6、Cl3溶液,制成标准比色梯度,颜色依次加深。另取待测样品 6 滴加入 7#凹穴中,加饱和 Na2CO3溶液、0.1 mmol/L FeCl3溶液各 2 滴,与标准色梯比较颜色确定维生素 C 含量。4.3 结果若颜色越深,则待测样品中维生素 C 含量越高。5血液 PH 值测定 5.1 原理正常人血液 PH 值总是维持在 7.357.45 之间,缓冲对 KH2PO4-Na2HPO4有效缓冲范围为 6.218.21。5.2 方法配置 PH 值为 7.08.0 的标准 KH2PO4-Na2HPO4缓冲液。在九孔井穴板的 1 至 7#凹穴中,依次加入 PH 值为 7.00、7.15、7.35、7.40、
7、7.45、7.65、7.80 的标准 KH2PO4-Na2HPO4缓冲液各 6 滴,再分别加入 0.03%酚红指示剂,制成标准比色梯度,在 8#凹穴中加入离心沉淀后的血样 6 滴和 0.03%酚红指示剂 1 滴,比色确定血样 PH。5.3 结果若 PH 值7.35,判定为酸中毒;若 7.35PH 值7.45,判定为正常;若 PH 值7.45,判定为碱中毒。6尿液酮体量的测定 6.1 原理酮体是脂肪酸代谢中间产物,包括已酰乙酸、羟基丁酸、丙酮三部分。已酰乙酸、羟基丁酸与重铬酸钾硫酸溶液共热则脱羧而成丙酮,丙酮与碱性亚硝酰铁氰化钠溶液显红色。正常人尿液酮体量小于 2.5mg/100ml(以丙酮计)
8、 。6.2 方法准确吸取丙酮(AR)1ml,加入 1L 容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,混合。此溶液含丙酮 79 mg/100ml。吸取此溶液 126ml , 加蒸馏水稀释至 500 ml,制成 20mg/100ml 丙酮溶液,以此为母液,再次稀释成 1mg/100ml、1.5mg/100ml、2.5mg/100ml、3.5mg/100ml、4.5mg/100ml、5.5mg/100ml、6.5mg/100ml 系列丙酮标准溶液,各取9 滴置于九孔井穴板的 1 至 7#凹穴中,然后分别加入碱性亚硝酰铁氰化钠溶液 1 滴,制成标准比色梯度。取新鲜尿液 10ml,加入 6mol/L 硫酸 5 滴、5%重铬酸钾 10 滴,置于 37水中约 1 小时;取新处理尿样 8 滴置于 8#凹穴中,加碱性亚硝酰铁氰化钠溶液 1 滴,比色确定尿液酮体量。6.3 结果若尿液中尿酮体含量小于 2.5 mg/100ml,判定为阴性;若尿液中尿酮体含量大于 2.5mg/100ml,判定为阳性,且根据色泽的深浅分别以“+” 、 “+”及“+”表示。