1、天麻多糖的研究概况天麻多糖的研究概况更新日期: 12-21 【摘要】 综述了天麻多糖的研究近况,主要包括其化学组成、含量测定和药理活性等 3 个方面,为进一步开发利用天麻多糖提供一定的参考。 【关键词】 天麻多糖 化学组成 含量测定 药理活性天麻为兰科真菌营养型多年生草本植物,药用其干燥块茎,是我国传统名贵中草药之一1-2。天麻具有平肝熄风止痉之功效,主要用于治疗头痛眩晕、肢体麻木、小儿惊风、癫痫抽搐、破伤风3。天麻中含有天麻素、赤箭苷、胡萝卜苷、天麻多糖、腺嘌呤、腺嘌呤核苷、多种氨基酸等活性成分4。现代药理研究表明,天麻还具有增智健脑、清除自由基、延缓衰老的作用,对老年性痴呆有一定的疗效5。
2、早期对天麻的研究主要集中在天麻素和天麻苷元等方面。植物多糖类化合物是一种免疫调节剂,它能激活免疫细胞,提高机体的免疫功能,而对正常细胞没有毒副作用,临床上多用于治疗艾滋病和抗肿瘤、抗衰老等6。许多研究工作者都从天麻中分离得到了多糖,并对其药理活性进行了一系列研究,本文就此加以概述。1 天麻多糖的提取通常天麻多糖的提取采用水煮醇沉的常规方法,一般先用石油醚脱脂,再经热水提取乙醇沉淀得多糖。多糖加水复溶,透析去除小分子化合物,再去蛋白、醇沉可得粗多糖。朱晓霞等7确定了此法的最佳工艺条件为物料比 140,浸提温度 120 ,浸提时间 3 h,此工艺条件下,天麻多糖提取率为 5.42 %。张梦娟等8采
3、取超声波提取法从天麻中提取天麻多糖,实验结果表明,使用超声波提取法可使天麻多糖提取率得到较大提高,其最佳提取工艺条件为:提取温度 66 ,提取时间 34 min,料水比 145,在此工艺条件下,天麻多糖提取率为 32.78 %。2 天麻多糖的分析2.1 天麻多糖的含量测定目前天麻多糖的含量一般采用硫酸蒽酮法或改良的苯酚硫酸法9来测定。2.2 纯度检测天麻多糖纯度可用聚丙烯酰胺凝胶电泳、醋酸纤维薄膜电泳和凝胶色谱法检测。聚丙烯酰胺凝胶电泳所用缓冲液为 pH9.5 的硼砂液,染色剂是高碘酸希夫试剂;醋酸纤维薄膜电泳所用缓冲液为pH12.0 的硼砂液,甲苯胺蓝染色。凝胶色谱法所用凝胶为 Sephad
4、ex G-150 和 DEAE Sephadex A50,0.1 mol/L NaCl 洗脱,蒽酮硫酸法检测。多糖经两种电泳均为单一色带,经凝胶色谱柱层析,流出液均为单峰,再用考马斯亮蓝 G-250 染色法检测蛋白质含量,即可说明它们均为单一组分10。2.3 天麻多糖的化学组成分析张梦娟11和孙亚男12采用离子色谱法分别研究了西产天麻和云产天麻中天麻多糖的单糖组成。前者从粗多糖中分离纯化得到了 2 个级分 GeB40-1 和 GeB80-4,其单糖组成分别是:GeB40-1 由L-鼠李糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-木糖和 D-甘露糖 5 种单糖组成,摩尔数之比 L-鼠李糖D-半乳糖D-葡萄糖
5、D-木糖D-甘露糖=29142112;GeB 80-4 由 L-鼠李糖、D-半乳糖和 D-葡萄糖3 种单糖组成,3 种单糖摩尔数之比 L-鼠李糖D-半乳糖D-葡萄糖2.5125。后者则得到 1 个级分的纯品,即 WPGB-A-H,其组成为 D-葡萄糖、D-甘露糖 2 种单糖。有学者研究报道13从天麻中分离出 3 种杂多糖:GE-I,GE-II,GE-III,均为白色粉末,元素分析不含氮,经纸上电泳和凝胶柱层析,证明为单一组分。3 种杂多糖经水解和纸色谱分析主要为葡萄糖组成,制备乙酰衍生物进行气相与已知单糖乙酰物比较和计算,结果得出 3 种多糖的组成及各分子比。GE-I 组成为葡萄糖甘露糖木糖阿
6、拉伯糖7010.50.3;GE-II 组成为葡萄糖甘露糖191;GE-III 组成为葡萄糖及微量甘露糖。综上所述,从化学组成来看,天麻多糖的单糖主要由戊糖和己糖构成。如戊糖中的木糖,己糖中的葡萄糖、半乳糖、鼠李糖等。此外还有一些单糖衍生物如甘露糖等,这都为以后确定天麻多糖的结构奠定了良好的基础。2.4 天麻多糖的理化性质分析糖在浓硫酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物,后者与 -萘酚作用形成紫红色复合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环;与蒽酮作用生成蓝绿色复合物;与苯酚作用生成黄棕色复合物,作为糖的定性鉴定14。Benedict 试剂为含 Cu2+的碱性溶液,能使还原糖氧化成酸类化合物,而其自身被
7、还原成红色或黄色的氧化亚铜。其碱性较Fehling 试剂弱,灵敏度高,干扰因素少15。刘玉潭等6提取的纯化天麻多糖为白色粉末状固体,溶于水,不溶于高浓度的甲醇、乙醇、丙酮和乙酸乙酯等有机溶剂。天麻多糖水溶液呈透明黏稠状, pH 弱酸性,与苯酚硫酸液反应呈黄棕色,与蒽酮硫酸液反应呈蓝绿色,Molish 反应呈阳性,与碘碘化钾反应为阴性,与 Benedict 试剂反应为阴性。说明该天麻多糖为非淀粉类多糖,没有还原性。3 天麻多糖的药理活性3.1 清除自由基的作用孔小卫等16研究发现,天麻多糖可显著提高衰老小鼠血清、肝、脑、心组织中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性(P0.01),明显抑制衰老小鼠血清、肝、脑、心组织中丙二醛(MDA)的形成,显著提高衰老小鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。说明天麻多糖具有较好的清除自由基、降低 MDA 的含量、延缓细胞衰老的作用。鲍宁17通过前房穿刺加压的方法建立了大鼠视网膜缺血再灌注模型,从生化指标检测与组织形态学角度,研究了天麻多糖对大鼠视网膜缺血再灌注过程中的保护作用。得出以下结论:天麻多糖对视网膜缺血再灌注损伤有保护作用;抑制自由基的产生是天麻多糖减轻视网膜损伤的机制;天麻多糖的视网膜保护作用优于维生素E,是一种较好的视神经保护剂。