1、1生命基本特征：基本单位：细胞基本功能：新陈代谢，生长，运动通过繁殖延续，遗传基本物质：DNA个体发育，系统进化适应性2poly U 全部苯丙氨酸内含子 外显子不编码蛋白，原核无 编码蛋白翻译：5-3表达调控：转录水平 前体加工 核膜向细胞质运输 细胞质中稳定性 mRNA 选择性调节蛋白质活化和后处理3基因文库的构建将总 DNA 包含的基因组各片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，便构成了该生物的基因文库。费时费事 内含子序列逆转录：以 mRNA 为模板，以短的寡核苷酸（oligo(dT)）分子作引物，加入 dATP, dTTP, dGTP 和 dCTP, oligo(dT)与 mRNA 分子的多
2、聚 A（polyA）尾巴碱基配对。大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 的 Klenow 片段的作用下：人工合成互补子链互补DNA（cDNA） 。转录产生编码特殊蛋白的 mRNA。用 cDNA 方法获取的 DNA 片段往往是具有特定功能的目的基因PCR 技术酶促反应大量扩增（包括分离）目的基因。4 种物质： （1）模板 DNA；（2） （目的基因两条链 5端互补）DNA 引物（短DNA 单链） ；（3）TaqDNA 聚合酶；（4）dNTP（dATP, dTTP, dGTP 和 dCTP变性：解链；退火：配对；延伸：合成2n 个4限制性内切酶：200 多EcoRI 特异识别 GAATTC 及其互补碱基组
3、成的双链片段, 粘性末端 T4 连接酶载体：常用包括细菌质粒、l 噬菌体、cosmid 质粒等。检测：酶切：利用 lacZ 基因的插入失活筛选重组质粒lacZ 表达半乳糖苷酶，含 IPTG 和 X-gal，X-gal 被半乳糖苷酶水解成兰色，电泳：琼脂糖凝胶电泳分离鉴定大小不等的酶解片段, 磷酸基团带负电荷载体法转化农杆菌介导法基因的直接转移（1）高压电脉冲电激穿孔（2）基因枪法（3）微注射法5人胚胎干细胞包括人胚胎来源的干细胞、生殖细胞起源的干细胞和通过核移植所获得的干细胞。用于研究的人胚胎干细胞只能通过下列方式获得：（一） 体外受精时多余的配子或囊胚；（二） 自然或自愿选择流产的胎儿细胞；
4、（三） 体细胞核移植技术所获得的囊胚和单性分裂囊胚；（四） 自愿捐献的生殖细胞。利用体外受精、体细胞核移植、单性复制技术或遗传修饰获得的囊胚，其体外培养期限自受精或核移植开始不得超过 14 天。6被转移的氢原子所携带的能量储藏在新化学键中XH2 (还原型底物)NAD+X(氧化型底物)NADHH+XH2 (还原型底物)NADP+X(氧化型底物)NADPHH+XH2 (还原型底物)FAD X(氧化型底物)FADH2还原态的 NADH 和 FADH2 等还可将所接受的电子和氢传递给其他传递体如细胞色素、辅酶 Q 等。NAD: 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸，辅酶 INADP：尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，辅酶
5、 IIFAD: 黄素腺嘌呤二核苷酸琥珀酸脱氢酶是唯一嵌入到线粒体内膜的酶线粒体的内膜上含有电子传递链及 ATP 酶复合体由葡萄糖到丙酮酸的糖酵解过程中，所有的中间产物都是以磷酸化合物的形式来实现的。糖酵解发生在细胞质中的 10 步反应，前 5步为准备阶段，需要消耗 2 分子 ATP 来启动，后 5 步为产生 ATP 的贮能阶段，共产出 4 分子 ATP，还形成 2 个高能化合物NADH 。糖酵解将六碳的葡萄糖分解成 2 个三碳的丙酮酸，净产生 2 个 ATP，生成 2 分子NADH。参与化合物是葡萄糖，ADP 和磷酸，NAD+。需要 10 种酶的参与，大部分酶需要 Mg2作为辅助因子。但丙酮酸
6、需先转变成乙酰辅酶 A 后才进入三羧酸循环 。该循环过程中的第一个化合物为柠檬酸；循环的最后产物是草酰乙酸。分解 1 分子丙酮酸形成 3 分子 CO2、 4 分子 NADH 和 1 分子 FADH2 及 1 分子ATP。电子传递链又称呼吸链，主要成分是线粒体内膜上的蛋白复合物，这些复合物包含了一系列的电子传递体。通过一系列的氧化还原反应，将高能电子从 NADH 和 FADH2 最终传递给分子氧，生成水。随着电子能量水平的逐步下降，高能电子所释放的化学能就通过磷酸化途径贮存到ATP 分子中，这个过程也被称为氧化磷酸化过程。在磷酸化过程中，相关的酶将底物分子上的磷酸基团直接转移到 ADP 分子上。
7、整个糖酵解中 ATP 的形成都是底物水平的磷酸化反应在呼吸链电子传递过程中，电子从最上游的经呼吸链传递到分子氧：每分子 NADH释放出的能量可产生 2.5 分子 ATP；每分子的 FADH2 可产生 1.5 分子 ATP。糖酵解：底物水平的磷酸化产生 4 个ATP，己糖活化消耗 2 个 ATP，脱氢反应产生 2 个 NADH，经电子传递链生成 3 或5 个 ATP，净产生 5 或 7 个 ATP；Krebs 循环：底物水平的磷酸化产生 2 个ATP，脱氢反应产生 8 个 NADH 和 2 个FADH2，8 个 NADH 经电子传递链生成 20个 ATP，2 个 FADH2 经电子传递链生成 3
8、个 ATP，净产生 25 个 ATP。整个有氧呼吸过程净产生 30 还是 32 个ATP 取决于糖酵解阶段产生于细胞质中的NADH 穿过线粒体膜进入呼吸链时是否消耗能量。CO2 是通过三羧酸循环形成的；而 H2O 则是在电子传递过程的最后阶段生成；三羧酸循环过程中释放的 CO2 不是直接来自于氧气，而是靠氧化底物中的氧和水分子中的氧来实现的；生物细胞通过底物水平磷酸化和与电子传递系统偶联的磷酸化 2 种途径合成 ATP。底物水平的磷酸化是相关的酶将底物分子上的磷酸基团直接转移到 ADP 分子上。与电子传递系统偶联的磷酸化涉及化学渗透过程。7Fe ：所有的生物所需；I：主要是脊椎动物所需这些功能
9、基团几乎都是极性基团。亲水蛋白种类：结构 伸缩 防御 贮存 运输 激素 信号 酶氨基酸呈两性离子状态，具有等电点(pH)蛋白质一级结构是靠共价键（肽键）维系的；而高级结构主要是靠非共价键（氢键、疏水键、离子健和范德华力）维系的。一级结构：决定许多性质与功能及蛋白质在细胞内的定位信号、修饰信号和寿命信号。三级结构体现生物活性DNA 的二级结构是指两条多核苷酸长链以反向平行盘绕而成的双螺旋状结构，它又包括三种构象，即 B-DNA、 A-DNA 及 Z-DNA，但以 B-DNA 构象最稳定和普遍。DNA 分子为二条多核苷酸链以一共同轴为中心，盘绕成右手双螺旋结构，嘌呤碱和嘧啶碱基位于螺旋的内侧，磷酸
10、和脱氧核糖基位于螺旋外侧；每 10 个核苷酸形成一个螺旋，直径约为 2 nm。螺旋盘绕形成链间的两种沟，即宽的大沟与窄的小沟；二条多核苷酸链的走向相反，通常取左侧链从上到下为 53端，右则链从下向上为 53端。T 与 A 之间有二个氢键，G 与 C 之间有三个氢键。DNA 三级结构是指 DNA 双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构，又分为正超螺旋和负超螺旋，以负超螺旋为主。通常人们把 50%DNA 分子发生变性的温度称为变性温度。独特的紫外线吸收光谱。特别是在240290nm 波长之间有一强烈的吸收峰，最大在 260nm 处；DNA 在不同氯化钠溶液中的溶解度是不同的，当氯化钠的浓度为 0
11、.14mol/L 时，其溶解度最低；具有等电点，但在中性 pH 值的情况下带负电。8在光合作用中，不是 CO2 而是 H2O 被光解放出了 O2。叶绿素分子是一种可以被可见光激发的色素分子;在光子驱动下发生的得失电子反应是光合作用过程中最基本的反应。叶绿素 a、b，类胡萝卜素，藻胆素等。叶绿素 a 启动光反应叶绿素的吸收光谱有两个：430-450nm ； 640660nm类囊体膜含有植物的光合作用的色素和电子传递系统以及 ATP 酶复合物，所以又称为光合膜；基质主要成分包括碳同化相关的酶类。CO2 固定反应就发生在基质中；类囊体腔在光能转化为 ATP 的过程中起重要作用。光合单位=天线色素系统
12、反应中心色素光合磷酸化:叶绿体在光下把无机磷和 ADP转化为 ATP，形成高能磷酸键的过程，即与光能起始的电子传递过程相偶联的 ATP形成过程。暗反应:是指叶绿体利用光反应产生的NADPH 和 ATP 的化学能，使 CO2 还原成糖的过程。电子沿传递链最终达到电子受体 NADP+；光系统 I 中激发的电子可以有两种去向：一是按非环路电子流途径经过一系列的载体进行传递，最后是催化 NADP还原为NADPH；二是环路磷酸化途径，无NADPH 和 O2 形成。9生态位：生物种群在群落中的生活方式和时间空间位置生态位相似-竞争生态位多样性是群落稳定基础生态幅：生物对环境因子耐受范围最低量定律：生物生长
13、速度受所需环境因子最低量因素限制生态系统组成核心：群落代谢：物流和能流实现食物链：捕食 碎食 腐生 寄生生态系统能量：辐射 化学 机械 电 生物能流中各类生物所处的地位为营养水平10哈迪定律：种群大 随机交配 无突变 没有新基因 没有自然选择-基因及基因型频率不变自然选择：定向 稳定性 中断性11生物膜：脂类蛋白质非共价键双亲性冰冻蚀刻：膜蛋白颗粒类脂板块 功能化筏：糖基鞘磷脂 胆固醇 鞘磷脂 分选运输 信号传导磷脂：不饱和脂肪酸 脂肪 50%糖脂：5% 神经细胞高 血型决定胆固醇：真核 流动稳定通透流动不均一性-分相主动运输：钠钾质子泵-直接消耗 协同-间接消耗12吞噬作用：原生动物 巨噬细胞 中性粒细胞胞饮作用：网格蛋白胆固醇运输：受体介导的内吞作用蛋白质分选：内质网蛋白/其他膜系统蛋白粗面内质网分泌蛋白 转运泡-高尔基复合体高尔基蛋白/溶酶体及囊泡囊泡-胞吐蛋白上靶信号高等生物细胞周期时间长短主要差别在 G1期G1 期 起始点 可进入 S 期 真核-限制点 检验点检验点：G1 期 外在营养、激素 内在 分裂周期基因S 期 复制完成G2 期 是否完成，合适大小，环境因素M 期 染色质与纺锤体装配生化事件G1 蛋白质 糖类脂类S DNA 组蛋白G2 少量蛋白 RNAM 有丝 减数 胞质
