PAM-2500简要操作说明书.doc

1、PAM-2500 简要操作说明书在使用仪器之前，我们首先要注意以下问题：1、保持仪器清洁，注意防尘，远离水和潮湿的地方。特别是主控单元PAM-2500和叶夹2030-B更应防潮和防尘。2、仪器应放置在通风、远离热源的环境中。3、严格按照操作手册连接电源，禁止在PAM-2500 开机的情况下连接外接电源！禁止在PAM-2500 开机的情况下通过数据线连接PC或UMPC！4、禁止过度弯曲光导纤维，在存放时尽量将光纤盘成圆形，并且将光纤两端用黑色的橡胶帽盖好！5、禁止将光纤末端对着眼睛，防止灼伤！6、光源不用时应当关闭，这样可以延长光源的寿命。测量间隙较长时应关闭主机，这样可以省电。仪器长期放置不用

2、时，应每隔2个月充电一次，在使用完毕放置之前请将电充满！7、每次测量开始前应通过调节“Gain”或测量光强（Meas. Light Int.）使只打开测量光时的荧光Ft （即Fo ）在300900 之间。8、不允许液体或其它东西进入仪器内部。9、只能按厂家推荐方法清洁仪器，非专业人员请勿打开主机。了解上述应该注意问题后我们正式进行测量：1、通过 USB 先连接 UMPC 与主机（连接时请勿打开主机电源） ，打开电源，通过“我的电脑属性硬件设备管理器端口（COM 和 LPT）下选择数据线所属端口，然后双击该端口，选择 Port Settings 界面下的 Advanced 按钮，将 BM Opt

3、ions 界面的 Latency Time 改为 1msec”将通讯端口设置完毕，然后点击电脑桌面的“PamWin_3”与仪器主机建立连接；2、进入欢迎界面后，点击“Advanced”按钮进入详细设置菜单，此时首先查看您选择的叶夹类型（分为两种 90 度和 60 度） ，点击“Options”菜单栏，选择“AL Current/PAR Lists”选项进行相应角度叶夹光强梯度的选择，该设置会自动默认保存，如果不更换其他角度的叶夹该设置以后可以不用更改此设置（软件默认为 60 度叶夹光强列表） ；3、完成上述步骤后请先点击“Zoff”进行仪器调零，然后将叶片夹在叶夹上，查看此时的右下角的 Ft

4、是否在 0.3 至 0.9 之间，如果值在该范围内，则可直接进行测量；如果值不在该范围之内，请调节“Meas. Light Int. ”或“Gain”使 Ft值处于 0.3 至 0.9 之间（推荐首先调节测量光的值，然后再调价 gain 的值，在实际操作中 gain 尽量不要调到最低） ，然后取下叶片重新点击“Zoff”进行仪器调零。以上三步为测量之前的准备工作，做完上述三个步骤即可进入实际测量步骤：4、慢速动力学曲线的测定（测量样品请提前进行暗适应处理）：4、1 首先设定慢速动力学曲线的光化光强度，设置原则为尽量比样品实际生活光强高一些（不可过高） ，每一个“ACT. Light Int.”

5、对应的实际光强是多大可以通过“Options”菜单栏下的“AL Current/PAR Lists”查看；然后设置第一次饱和脉冲光与打开光华光的时间间隔（通过 slow induction 下的 delays 来设置，仪器默认为 40S，设置原则为最短为 40S，如果样品少时间充足的话此时间可以延长）和打开光化光后每次饱和脉冲之间的时间间隔（通过 slow induction 下的 clocks 来设置，如果所测样品为阴生植物，请尽量延长两次饱和脉冲光之间的距离，建议任何样品饱和脉冲之间的时间间隔都不要短于 20S） ，widths 为光华光照射的时间长度，该值的设定原则为尽量让慢速动力学曲线

6、的 Ft 至和Fm的曲线稳定，在一个固定值上下浮动。4.2 慢速动力学曲线的测定：设置好以上参数后将界面转换到“Slow Kinetics”界面下，选择慢速动力学曲线的类型：Manual手动测量慢速动力学曲线，Ind. Curv.按照上一步设置的参数仪器自动记录测量慢速动力学曲线，Ind.+Rec. 慢速动力学曲线+暗弛豫（可用来研究作物的抗逆应急性）4.3 对于普通的荧光使用可以选择仪器自动记录测量慢速动力学曲线即 “Ind. Curv.”进行曲线测量，通过“Select”方框下参数的选择在图表上显示不同的参数曲线，曲线完毕后点击图标正上方的 3.5 寸软盘的标志储存该测量过程。备注：慢速动

7、力学曲线窗口的其它图标含义请查看中说和英文说明书。5、快速光响应曲线的测量（该过程需要完全遮蔽自然光的影响）5.1 设置光响应曲线的光强梯度：设置完步骤 1 至 3 后，将界面转换到“Light Curve”界面下，点击右侧的“Edit”按钮，弹出“Light Curve Edit”界面后，根据自己的实验需求调节光强的梯度“Intens”和每个梯度光照射样品的时间长度“Time ”，在需要终止的梯度上将时间 Time 变为零，程序运行到该步骤会自动关闭，设置完成后点击该界面正上方的 3.5 寸软盘的标注储存该光强梯度设置以备下次测量该样品时使用，然后点击“OK”即设置完成。5.2 设置完光强梯

8、度后点击“Start”进行快速光响应曲线的测量，如果曲线在测量过程中发现达不到平稳期，说明您设置的光强梯度太小，需要增加照射光强度，此时改变“Light Curve Edit”界面下的“Intens”增加光强；如果曲线很快升高有下降，说明植物生长的环境比较小，此时需减小光强，也是通过改变“Light Curve Edit”界面下的 “Intens”减小光强。5.3 曲线测量完毕后，可以点击 Fit 进行曲线拟合，通过计算器标志查看植物的光能利用率、最大电子传递速率等。点击曲线正上方的 3.5 寸软盘按钮可以保存该程序。6、快速诱导动力学曲线的测量6.1 在参数设置界面中的“Analysis Mode”项内选择“Fast Acquisition”，将界面切换到快速诱导动力学曲线测量界面。6.2 快速动力学曲线的测定设置一般推荐标准设置即可，如果需要更改请熟悉快像测量的原理及意义后根据自己的特殊实验要求设置。6.3 然后将界面转到“Fast Kinetics”界面，点击“ Start”即可进行测量。6.4 点击“Log”可以查看经典的 O-J-I-P 曲线。6.5 点击“I1 Fit ”进行曲线拟合，得到该曲线 O、J、I、P 各点对应的荧光数值。7、数据导出与存储请参考详细版的中文说明书