1、植物细胞工程：是一种利用离体培养体细胞，按照预先设计，有目的、有计划地对植物细胞进行遗传操作，使其遗传和生物学特性改变，从而实现植物品质改良和创新的生物技术。植物离体繁殖：又称植物快繁或微繁，是指利用植物组织培养技术对外植体进行培养，使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法。；植物体细胞杂交：是指通过原生质体融合和异核体的培养产生体细胞杂种的技术，它能使两亲本不通过有性过程进行遗传物质的重组，包括核基因和胞质基因的重组。；外植体：（explant）取自生物体用于组织培养的活的生物或组织切段、或用于继代培养的组织培养物均称为外植体。；花药培养：是指把整个花药接种到培养基上，在离体的条件下，像
2、体细胞一样进行分裂、分化，最终发育成完整植株的过程。；胚胎培养：对合子胚进行离体培养获得正常生长发育的植株的过程；继代培养：对来自于外植体所增殖的培养物(包括细胞、组织或其切段 )通过更换新鲜培养基及不断切割或分离，进行连续多代的培养，就称为继代培养；原代细胞系：指从机体取出后立即培养的细胞经首次传达成功后所繁殖的细胞群体 ；脱分化：培养条件下使下一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程；细胞分化：是指导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程；再分化：在离体条件下，细胞脱分化以后，无序生长的细胞及其愈伤组织重新进入有序生长即分化状态的过程；转分化：一种类型的分
3、化细胞转变成另一种类型的分化细胞的现象称转分化（trans-differentiation）；细胞悬浮培养：是指将游离的单细胞或小的细胞团（含少数细胞的分化细胞团或细胞聚集体）以一定的细胞密度接种到液体培养基中于摇床上进行悬浮培养；器官发生：植物的离体器官发生是指培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根、不定芽等器官的过程；终端分化细胞：终端分化细胞是不分裂细胞，即细胞永久的失去了分裂能力，而分化为具有一定形态结构及生理功能的组织细胞；极性：是指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异；胚性细胞：离体培养中通常把具有类似胚细胞性质、容易调控
4、分化表达全能性的一类细胞称为胚性细胞。由于植物细胞多以细胞团的形式存在，因此，也将该类细胞团称之为胚性愈伤组织。；看护培养：将亲本愈伤组织或高密度的悬浮细胞同低密度细胞一起培养，以促进低密度细胞生长、分裂的培养方法。；平板培养：将琼脂或明胶等凝胶状固体培养基制成平面状，然后在此平面上培养微生物或多细胞生物的细胞、组织或器官，这种培养方法称为平板培养；原生质体：脱去细胞壁的细胞；亚原生质体：植物原生质体分离所得到的不完整原生质体；不定芽: 凡从叶、根、或茎节间或是离体培养的愈伤组织上等通常不形成芽的部位生出的芽，则统称为不定芽。；早熟萌发:幼胚接种后，离体胚不继续胚性生长，而是在培养基上迅速萌发
5、成幼苗的现象。；对称融合：是指两个完整的细胞原生质融合；诱导培养：是一种生物工程培养方法,用不同的诱导培养基培养出想要得到的目标生物,培养基中可用特定的激素,抗体等方法特异性的得到目标生物.；微繁殖（快繁）：又称离体繁殖（in vitropropagation）是指利用植物组织培养技术，在离体条件下对植物进行营养繁殖。 ；愈伤组织：愈伤组织（callus）原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成，可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。 ；花粉培养：是把花粉（小孢子）从花药中分离出来，接种到培养基上，在离体培养条件下，诱导形成单倍体的孢子体的过程；细胞固定化
6、培养：细胞固定化培养是指将游离的细胞包埋在多糖或多聚化合物制备成的网状支持物中、培养液呈流动状态进行无菌培养的一门技术。 ；胚性发育：植物幼胚接种到培养基上以后，仍然按照在活体内的发育方式发育，最后形成成熟胚（有时甚至可能类似种子） ，然后再按种子萌发途径出苗形成完整植株，这种途径发育的幼胚一般一个幼胚将来就是一个植株。；次生代谢产物：次生代谢产物(Secondary metabolites)是由次生代谢(Secondary metablism)产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。 ；离体受精：是将
7、未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来，进行无菌培养，并以一定的方式授以无菌花粉，使之在试管内实现受精的技术； 体细胞胚：经体细胞胚胎发生途径形成的在形态结构和功能上类似于有性胚的结构；TE 细胞：植物在系统发育中，由根和芽的原形成层或次生形成层细胞分化形成的管状细胞，它在维管系统的形成中具有中心作用。在离体培养条件下，TE 细胞由愈伤组织薄壁细胞分化形成，这也是愈伤组织细胞分化器官的前提；细胞同步化：是指通过一定技术处理使同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期；玻璃化：当植物体材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明水迹状，这种现象通常称为玻璃化；非对称
8、融合：是指通过物理或化学方法使某亲本的核型或细胞质失活后再进行的融合；人工种子：又称合成种子或体细胞种子，任何一种在离体培养条件在离体培养条件产生的繁殖体，无论是在涂膜胶囊中包裹的、裸露的或经过干燥的，只要能够发育成完整的植株，均称为人工种子简答1. 细胞全能性学说的基本内容是什么？ 2. 植物材料与细胞全能性表达有何关系？对培养中的选材有何指导意义？ 3. 细胞分化有什么基本特征？ 4. 何谓体形态发生？离体培养条件下有哪些途径？ 5. 培养条件下的器官发生有哪些方式？提出以何种方式为宜？ 6. 分析经过愈伤组织的器官发生过程。 7. 蔗糖在植物组织培养过程中的功能是什么？ 8. 体细胞胚与
9、合子胚有何异同？ 9. 总体上讲离体培养的条件主要有哪些？ 10. 为什么茎尖分生组织培养能够除去植物病毒？ 11. 哪些因素会影响茎尖培养的脱毒效果？ 12. 微繁殖中芽的增殖方式有哪些？各有何特点？ 13. 为什么用于繁殖的组培技术要尽量避免使用外源激素？ 14. 花药培养过程中花药为什么要经过低温处理？ 15. 花药培养时为什么要用较高浓度蔗糖和较低浓度激素？ 16. 幼胚培养时胚的发育方式有哪几种？各有何特点？17. 用于建立悬浮细胞系的愈伤组织有何要求？ 18. 悬浮细胞系在继代培养中其群体生长有何规律？ 19. 哪些因素会影响原生质体培养？ 20. 原生质体融合要经过哪些过程？ 2
10、1. 对称融合与非对称融合的细胞杂种有何异同？ 22. 培养基、外植体、玻璃器皿、金属用具以及外植体各选择什么灭菌方法？ 23. 通过离体培养获得单倍体的途径有哪些？ 24. 花药培养与花粉培养有什么不同？ 25. 建立悬浮细胞系的关键技术有哪些？ 26. 胚乳培养取材的最佳时期是何时？ 27. 原生质体纯化有哪些方法？ 28. 原生质体的培养方法有哪些？各有何优缺点？ 29. 如何检测再生植株的脱毒效果？ 30. 如何防止培养过程中外植体的玻璃化、褐化？植物细胞工程理论考试大纲（闭卷，适用于 13 生物技术）考核章节内容：第一章 绪论了解细胞工程基本概念、发展和意义；了解植物细胞工程的类别与
11、应用。识记植物细胞工程的概念；能分析运用植物细胞工程技术的类别。第二章 实验室组成及基本技术了解植物细胞工程常用的常规仪器。掌握植物细胞工程中基本的洗涤、灭菌技术；掌握培养基配置原则，掌握植物的外植体培养技术及其影响因素。实验室基本设备配置；识记洗涤、灭菌技术等概念；领会培养基配置原则；会运用外植体培养技术。第三章 植物细胞全能性与形态发生了解并掌握植物细胞工程的理论基础植物细胞全能性的概念及实现途径；了解并掌握植物细胞的分化现象；了解并掌握离体培养条件下的植物细胞脱分化和再分化现象；了解并掌握植物胚状体的概念、类型及特点。识记植物细胞全能性的概念及实现途径；植物细胞的分化；离体培养条件下的植
12、物细胞脱分化和再分化；器官发生的过程和影响因素；植物胚状体的影响因素。领会植物细胞全能性的实现途径；植物细胞脱分化和再分化。第一节 细胞全能性及其表达一、细胞全能性概述二、培养条件下的细胞脱分化三、细胞分化第二节 器官发生一、离体培养中器官发生的方式二、器官分化过程三、起始材料对器官分化的影响四、激素对器官分化的调控五、光照对器官分化的影响六、器官发生的基因调控第三节 体细胞胚发生一、体细胞胚的形成二、体细胞胚的结构与发育特点三、影响体细胞胚发生的因素四、体细胞胚发生的生化与分子基础第四章&第十章 植物离体快速繁殖和植物病毒病害及病毒脱除掌握快速无性繁殖的概念及优越性；掌握离体无性繁殖的器官发
13、生方式；了解并掌握离体无性繁殖的程序及技术关键；了解并掌握无病毒植物的概念及意义；了解并掌握脱除植物病毒的原理及方法；了解并掌握无病毒植株的操作程序。识记离体无性繁殖的程序及技术关键植物离体无性繁殖中常见问题及克服措施；会运用微茎尖培养脱毒。第一节 植物的离体快速无性繁殖一、快速无性繁殖的概念及优越性二、离体无性繁殖的再生途径三、常见问题及克服措施第二节 植物病毒病害及病毒脱除一、植物病毒病害的概述二、植物脱毒技术三、植物脱毒培养实例第五章 花药与花粉培养掌握花药和花粉培养的概念，了解并掌握花粉单倍体植物的培养程序和影响因素，了解单倍体的应用。识记花药和花粉培养的概念，花粉单倍体植物的培养程序
14、和影响因素；领会花粉单倍体植物培养的基本程序。第一节 花药及花粉培养第二节、花药和花粉培养中单倍体植株形成的途径第三节、花粉植株的倍性及染色体加倍第四节、花药和花粉培养中的白化苗第五节、单倍体的应用第六章 胚胎培养和离体受精掌握植物胚胎培养的含义、培养过程和影响因素。了解胚乳培养、胚珠和子房培养的过程。掌握离体受精技术。识记植物胚胎培养的程序及其影响因素。第七章 植物细胞培养及次生代谢产物生产了解悬浮培养技术的基本步骤、单细胞培养的类型；了解植物细胞的规模培养技术中培养体系建立、反应器类型和相关的工程技术问题；细胞的次生代谢产物的类型和累积途径。会运用悬浮培养和单细胞培养的步骤；识记细胞规模培
15、养的过程和影响因素；领会细胞的次生代谢产物的类型和累积途径第一节 悬浮培养一、愈伤组织诱导二、悬浮系的建立与继代培养三、悬浮细胞的生长动态四、悬浮培养细胞的同步化第二节 单细胞培养一、细胞平板培养二、看护培养三、微室培养四、其它单细胞培养技术第三节 植物细胞的规模培养一、概述二、植物细胞规模化培养体系的建立三、生物反应器类型及其特点四、植物细胞规模化培养中的有关工程技术问题第四节 培养细胞的次生代谢及产物积累一、植物次生代谢产物的主要类型二、培养条件下的植物细胞次生产物积累的特性三、提高细胞次生产物产量的途径第八章 植物原生质体培养了解原生质体的研究概况；了解并掌握原生质体分离及纯化的方法；了
16、解并掌握原生质体培养的程序及技术关键，了解原生质体培养的应用。识记原生质体的概念。会运用原生质体培养技术和方法。能分析影响原生质体培养的影响因素。能运用原生质体融合技术等。第十一章 人工种子掌握人工种子概念及意义；了解繁殖体的类型及其生产技术；了解人工种子的包埋方法。【复习资料】（仅供参考而已）：基本概念部分：细胞工程；离体繁殖；细胞杂交；外植体；花药培养；胚胎培养；继代培养；原代细胞系；脱分化；细胞分化；再分化；转分化；悬浮培养；器官发生；终端分化细胞；极性；胚性细胞；看护培养；平板培养；原生质体；亚原生质体；不定芽；早熟萌发；对称融合；诱导培养；微繁殖（快繁） ；愈伤组织；花粉培养；固定化
17、培养；胚性发育；次生代谢产物；离体受精； 体细胞胚；TE 细胞；细胞同步化；玻璃化；细胞（融合）杂交；非对称融合；人工种子Q&A 部分：1. 细胞全能性学说的基本内容是什么？2. 植物材料与细胞全能性表达有何关系？对培养中的选材有何指导意义？3. 细胞分化有什么基本特征？4. 何谓体形态发生？离体培养条件下有哪些途径？5. 培养条件下的器官发生有哪些方式？提出以何种方式为宜？6. 分析经过愈伤组织的器官发生过程。7. 蔗糖在植物组织培养过程中的功能是什么？8. 体细胞胚与合子胚有何异同？9. 总体上讲离体培养的条件主要有哪些？10. 为什么茎尖分生组织培养能够除去植物病毒？11. 哪些因素会影
18、响茎尖培养的脱毒效果？12. 微繁殖中芽的增殖方式有哪些？各有何特点？13. 为什么用于繁殖的组培技术要尽量避免使用外源激素？14. 花药培养过程中花药为什么要经过低温处理？15. 花药培养时为什么要用较高浓度蔗糖和较低浓度激素？16. 幼胚培养时胚的发育方式有哪几种？各有何特点？17. 用于建立悬浮细胞系的愈伤组织有何要求？18. 悬浮细胞系在继代培养中其群体生长有何规律？19. 哪些因素会影响原生质体培养？20. 原生质体融合要经过哪些过程？21. 对称融合与非对称融合的细胞杂种有何异同？22. 培养基、外植体、玻璃器皿、金属用具以及外植体各选择什么灭菌方法？23. 通过离体培养获得单倍体的途径有哪些？24. 花药培养与花粉培养有什么不同？25. 建立悬浮细胞系的关键技术有哪些？26. 胚乳培养取材的最佳时期是何时？27. 原生质体纯化有哪些方法？28. 原生质体的培养方法有哪些？各有何优缺点？29. 如何检测再生植株的脱毒效果？30. 如何防止培养过程中外植体的玻璃化、褐化？考核题型与所占比例：名词解释题 占 10% 选择题 占 20% 填空题 占 10%简答题 占 45% 综合分析题 15%
