1、作 者 简 介 王 建 华 ( 1968 - ) ,男 ,博 士 ,高 级 工 程 师 ,主 要 从 事食 品 卫 生 检 验 研 究 。【 化 学 测 定 方 法 】气 相 色 谱 -质 谱 法 测 定 蔬 菜 中 的 16种 多 环 芳 烃王 建 华 1, 2 ,姜 海 燕 3 ,王 惠 2 ,王 修 林 2(11青 岛 出 入 境 检 验 检 疫 局 ,山 东 青 岛 266002; 21中 国 海 洋 大 学 ,山 东 青 岛 266003;31山 东 中 粮 花 生 制 品 进 出 口 有 限 公 司 ,山 东 青 岛 266001)摘 要 目 的 :研 究 蔬 菜 中 多 环 芳
2、烃 ( PAH s)残 留 量 的 气 相 色 谱 -质 谱 分 析 方 法 。 方 法 :蔬 菜 经 过 环 己 烷 提 取 ,硫 酸 溶 液和 PSA固 相 萃 取 柱 净 化 ,用 气 相 色 谱 -质 谱 选 择 离 子 监 测 模 式 ( SIM )定 性 和 定 量 检 测 多 环 芳 烃 。 结 果 : 16种 PAH s加 标回 收 率 范 围 在 60% 120% 之 间 ,相 对 标 准 偏 差 为 8% 20% ,检 测 限 范 围 为 01009 0106 g/kg。 结 论 :本 方 法 适 合 蔬菜 中 PAH s检 测 。关 键 词 固 相 萃 取 ;多 环 芳
3、烃 ;蔬 菜 ;气 相 色 谱 -质 谱中 图 分 类 号 O657163 文 献 标 识 码 A 文 章 编 号 1004 - 8685 (2006) 02 - 0197 - 03环 境 中 的 多 环 芳 烃 ( polycyclic aromatic hydrocarbons,PAH s)主 要 产 生 于 矿 物 的 不 完 全 燃 烧 ,部 分 PAH s有 致 畸 、 致癌 、 致 突 变 作 用 , PAH s的 监 测 已 越 来 越 受 到 人 们 的 重 视 。 目前 ,测 定 大 气 、 水 、 土 壤 中 PAH s的 文 献 较 多 1 3 ,蔬 菜 通 过 吸收 水
4、 和 大 气 中 的 粉 尘 而 含 有 了 PAH s,但 关 于 蔬 菜 中 PAH s测定 方 法 的 文 献 较 少 3, 4 。 本 文 中 ,我 们 首 次 采 用 环 己 烷 提 取 ,硫 酸 溶 液 和 PSA固 相 萃 取 柱 组 合 净 化 ,用 GC - MS同 时 定 性和 定 量 检 测 蔬 菜 中 美 国 EPA优 先 表 中 所 列 的 16种 PAH s。1 材 料 与 方 法111 仪 器 与 试 剂Agilent 6890气 相 色 谱 - 5973N质 谱 联 用 仪 ,配 7683自 动进 样 器 ,分 流 /不 分 流 进 样 口 (美 国 Agile
5、nt公 司 ) ;毛 细 管 气 相色 谱 柱 为 HP - 5MS( Phenyl Methyl Siloxane 5% 二 苯 基 - 95%二 甲 基 硅 氧 烷 , 30 m 0125 mm 0125 m ) ; ULTRATURRAX均 质 器 (德 国 IKA公 司 ) ;离 心 机 ( Eppendorf5810) ; IKA快 速 混匀 器 (德 国 IKA公 司 中 国 广 州 工 厂 ) ;移 液 枪 : 012、 110、 10 m l(法 国 Gilson公 司 ) ; GILSON ASPEC XL全 自 动 固 相 萃 取 仪 (法国 Gilson公 司 ) ; P
6、SA固 相 萃 取 柱 (500 mg, 6 m l,美 国 Varian公司 )。PAH s标 准 品 ( R iedel - dehaen 公 司 ) : 根 据 需 要 将10 mg/L储 备 液 用 环 己 烷 逐 级 稀 释 成 工 作 溶 液 ;水 经 m illipore纯 水 器 纯 化 ;硫 酸 溶 液 ( 9 mol/L ) ,取 硫 酸 原 液 ,用 水 稀 释 一倍 。112 样 品 处 理提 取 :称 取 1010 g样 品 于 50 m l塑 料 离 心 管 中 ,加 入 环 己烷 30 m l均 质 2 m in, 6 000 r/m in 离 心 5 m in,
7、将 上 清 液 转 入125 m l分 液 漏 斗 中 ;将 残 渣 用 20 m l环 己 烷 重 复 提 取 1次 ,离心 后 合 并 上 清 液 于 分 液 漏 斗 中 。净 化 :在 分 液 漏 斗 中 加 入 10 m l硫 酸 溶 液 进 行 磺 化 ,充 分震 荡 后 静 置 分 层 ,弃 去 下 层 硫 酸 层 (如 有 必 要 重 复 一 次 ) ;然 后加 入 1 g氯 化 钠 粉 末 , 10 m l纯 水 洗 涤 环 己 烷 层 ,静 置 后 弃 去 水层 。将 环 己 烷 层 转 入 100 m l鸡 心 瓶 中 ,旋 转 蒸 发 至 干 ;精 确 加入 2 m l环
8、 己 烷 清 洗 瓶 壁 ,置 于 全 自 动 固 相 萃 取 仪 中 , PSA柱 先用 5 m l环 己 烷 活 化 ,取 样 品 液 1 m l(相 当 于 5 g样 品 )过 PSA柱 ,加 入 15 m l环 己 烷 洗 脱 ;将 洗 脱 液 收 集 到 50 m l鸡 心 瓶 中旋 转 蒸 发 至 干 ;以 1 m l环 己 烷 准 确 定 容 ,充 分 洗 涤 瓶 壁 后 转 入进 样 瓶 中 准 备 检 测 。113 气 相 色 谱 -质 谱 测 定11311 气 相 色 谱 条 件 载 气 :高 纯 氦 气 ,恒 压 模 式 1917 p si(1 p si = 6 8941
9、76 Pa ) , 柱 温 程 序 : 初 始 温 度 70 , 保 持410 m in,以 25 /m in的 速 率 ,升 温 到 150 ,以 3 /m in的 速率 ,升 温 到 200 ,再 以 8 /m in的 速 率 ,升 温 到 280 保 持1010 m in;进 样 量 : 1 l。11312 质 谱 条 件 离 子 源 温 度 : 150 ,四 极 杆 温 度 : 230 ,色谱 - 质 谱 接 口 温 度 : 280 ;离 子 化 方 式 : E I;电 子 能 量 : 70 eV;调 谐 方 式 :自 动 调 谐 ;全 扫 描 ( SCAN )测 定 方 式 的 扫
10、描 范 围 50 450 m / z。2 结 果 与 讨 论211 PAH s的 分 离 和 测 定按 照 所 列 的 色 谱 /质 谱 条 件 ,用 SCAN方 式 对 16种 PAH s进 行 扫 描 ,测 得 其 总 离 子 流 图 (见 图 1)。 然 后 根 据 各 待 测 化 合物 的 保 留 时 间 和 质 谱 图 ,确 定 选 择 离 子 监 测 ( SIM )的 采 集 时 间和 特 征 离 子 ,并 以 3倍 信 噪 比 计 算 检 测 限 ,结 果 见 表 1。图 1 16种 多 环 芳 烃 的 总 离 子 流 图11萘 ; 21苊 烯 ; 31苊 ; 41芴 ; 51菲
11、 ; 61蒽 ; 71荧 蒽 ;81芘 ; 91苯 并 ( a)蒽 ; 101屈 ; 111苯 并 ( k)荧 蒽 ;121苯 并 ( b)荧 蒽 ; 131苯 并 ( a)芘 ; 141茚 并 (123 - cd) ;151芘 二 苯 并 ( a, h)蒽 ; 161苯 并 ( ghi)苝791中 国 卫 生 检 验 杂 志 2006年 2月 第 16卷 第 2期 Chinese Journal of Health Laboratory Technology, Feb 2006; Vol 16 No 2 1994-2006 China Academic Journal Electronic
12、Publishing House. All rights reserved. http:/表 1 16种 PAHs的 特 征 离 子 和 检 测 限序 号 中 文 名 称 保 留 时 间 选 择 离 子 检 测 限( g/kg)1 萘 5133 128 129 127 102 010152 苊 烯 7183 152 153 151 150 010103 苊 8135 153 152 151 150 010094 芴 9189 166 165 167 139 010125 菲 13181 178 179 176 152 010156 蒽 14102 178 176 179 152 010187
13、荧 蒽 20183 202 203 200 101 010088 芘 22120 202 203 200 101 010079 苯 并 ( a)蒽 28137 228 226 229 227 0101210 屈 28152 278 279 276 139 0101711 苯 并 ( k)荧 蒽 32106 253 252 250 126 0101512 苯 并 ( b)荧 蒽 32124 252 253 250 126 0101213 苯 并 ( a)芘 33121 252 253 250 126 0102514 茚 并 (123 - cd)芘 38100 276 277 138 248 01
14、04915 二 苯 并 ( a, h)蒽 38125 228 226 227 202 0106016 苯 并 ( ghi)苝 39109 276 277 252 138 01030212 样 品 处 理 条 件 的 优 化21211 净 化 条 件 的 选 择 用 环 己 烷 作 提 取 剂 时 ,植 物 中 一 些亲 脂 性 物 质 可 被 提 取 剂 提 取 出 来 造 成 干 扰 。 故 根 据 文 献 采 用硫 酸 溶 液 除 去 亲 脂 性 共 提 物 。 选 用 9 mol/L的 硫 酸 溶 液 ,并 加入 氯 化 钠 粉 末 饱 和 水 层 。 加 入 9 mol/L 的 硫 酸
15、 溶 液 后 ,菠 菜样 品 环 己 烷 层 呈 黄 色 ,硫 酸 层 呈 深 绿 色 ;辣 椒 样 品 环 己 烷 层呈 棕 色 ,硫 酸 层 呈 深 绿 色 。 进 行 旋 转 蒸 发 浓 缩 后 ,颜 色 分 别为 深 绿 色 和 深 褐 色 的 粘 稠 物 质 。 经 测 定 发 现 仍 有 较 多 干 扰峰 。PSA固 相 萃 取 柱 可 以 吸 附 脂 肪 酸 等 植 物 基 体 杂 质 ,广 泛用 于 农 残 测 定 。 采 取 PSA柱 固 相 萃 取 净 化 后 洗 脱 液 为 黄 色 澄清 液 体 。 经 对 比 其 净 化 效 果 较 好 ,干 扰 杂 峰 明 显 减 少
16、 ,而 且 不吸 附 PAH s。21212 固 相 萃 取 洗 脱 液 用 量 选 择 分 别 使 用 10、 15、 20 m l的环 己 烷 洗 脱 进 行 对 比 ,用 10 m l环 己 烷 洗 脱 时 ,表 1中 前 13种成 分 回 收 率 接 近 100% ,但 后 3种 成 分 的 回 收 率 几 乎 为 零 。 再加 入 5 m l环 己 烷 继 续 洗 脱 ,前 13种 成 分 回 收 率 为 零 ,后 3种成 分 的 回 收 率 接 近 100%。 分 别 使 用 15、 20 m l环 己 烷 进 行 洗脱 时 16种 成 分 的 回 收 率 都 接 近 100% ,
17、并 无 明 显 差 别 ,所 以 选定 15 m l正 己 烷 进 行 洗 脱 。213 标 准 工 作 曲 线 的 绘 制取 PAH s标 准 储 备 液 用 环 己 烷 分 别 稀 释 成 20、 40、 100、400、 2 000 g/L的 系 列 标 准 溶 液 进 行 测 定 ,绘 制 标 准 曲 线 见表 2。 各 组 分 浓 度 与 峰 面 积 的 线 性 关 系 和 相 关 系 数 除 苊 为01992外 ,其 他 均 为 01999。表 2 待 测 化 合 物 的 线 性 方 程 和 相 关 系 数序 号 名 称 标 准 曲 线 相 关 系 数1 萘 Y = 2117e +
18、 004X - 2126e + 004 019992 苊 烯 Y = 2134e + 004X - 2179e + 004 019993 苊 Y = 1150e + 004X - 5107e + 004 019924 芴 Y = 1182e + 004X - 3110e + 004 019995 菲 Y = 2172e + 004X - 3113e + 004 019996 蒽 Y = 2165e + 004X - 5171e + 004 019997 荧 蒽 Y = 3122e + 004X - 5107e + 004 019998 芘 Y = 3130e + 004X - 8162e +
19、004 019999 苯 并 ( a)蒽 Y = 3107e + 004X - 4143e + 004 0199910 屈 Y = 3100e + 004X - 3178e + 004 0199911 苯 并 ( k)荧 蒽 Y = 3185e + 004X - 6165e + 004 0199912 苯 并 ( b)荧 蒽 Y = 4142e + 004X - 6115e + 004 0199913 苯 并 ( a)芘 Y = 3162e + 004X - 8124e + 004 0199914 茚 并 (123 - cd)芘 Y = 2104e + 004X - 5167e + 004 0
20、199915 二 苯 并 ( a, h)蒽 Y = 2106e + 004X - 1192e + 004 0199616 苯 并 ( ghi)苝 Y = 2178e + 004X - 8113e + 004 01999214 方 法 的 回 收 率 及 精 密 度21411 空 白 实 验 分 析 表 明 本 实 验 所 用 环 己 烷 、 9 mol/L 硫酸 溶 液 、 氯 化 钠 粉 末 、 纯 水 中 均 无 干 扰 峰 。21412 回 收 率 实 验 本 方 法 对 基 质 复 杂 辣 椒 样 品 分 别 添 加4、 8、 20 ng/g 3个 浓 度 进 行 6次 回 收 率 的
21、 测 定 ,回 收 率 范 围 在60% 120% 之 间 ,相 对 标 准 偏 差 在 8% 20%。215 实 际 样 品 的 分 析 和 讨 论实 际 样 品 中 PAH s含 量 见 表 3。 辣 椒 色 谱 图 见 图 2。表 3 辣 椒 和 菠 菜 样 品 中 PAHs含 量 ( g /kg)序 号 名 称 鲜 辣 椒 鲜 菠 菜1 萘 12139 131872 苊 烯 2138 01163 苊 6178 81734 芴 9131 171955 菲 33197 551846 蒽 3105 51977 荧 蒽 11166 321618 芘 8149 111559 苯 并 ( a)蒽
22、1129 315310 屈 1199 1318511 苯 并 ( k)荧 蒽 11319 012812 苯 并 ( b)荧 蒽 1132 411213 苯 并 ( a)芘 1172 113914 茚 并 (123 - cd)芘 Nd 414415 二 苯 并 ( a, h)蒽 ND 019816 苯 并 ( ghi)苝 ND 1105891 中 国 卫 生 检 验 杂 志 2006年 2月 第 16卷 第 2期 Chinese Journal of Health Laboratory Technology, Feb 2006; Vol 16 No 2 1994-2006 China Acade
23、mic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http:/作 者 简 介 祁 广 建 (1954 - ) ,男 ,副 主 任 检 验 师 ,主 要 从 事 液 相色 谱 分 析 工 作 。【 化 学 测 定 方 法 】梯 度 洗 脱 HPLC法 测 定 化 妆 品 中 9种 防 腐 剂 的 含 量祁 广 建 1 ,沈 国 英 2 ,陈 颖 1(11辽 宁 省 大 连 市 疾 病 预 防 控 制 中 心 ,辽 宁 大 连 116021; 21辽 宁 省 大 连 市 卫 生 监 督 所 ,辽 宁 大 连 116011)摘
24、 要 目 的 :同 时 测 定 化 妆 品 中 9种 防 腐 剂 。 方 法 :采 用 AcCN /0105 mol/L NaH2 PO4 (pH = 315)作 流 动 相 的 高 压 梯 度测 定 。 结 果 :操 作 简 便 ,精 密 度 和 准 确 度 符 合 测 定 要 求 。 结 论 :本 法 具 有 快 速 、 准 确 等 特 点 ,能 满 足 卫 生 监 督 检 测 的 需 要 。关 键 词 高 效 液 相 色 谱 法 ;化 妆 品 ; 9种 防 腐 剂中 图 分 类 号 O65717 文 献 标 识 码 A 文 章 编 号 1004 - 8685 (2006) 02 - 01
25、99 - 02本 文 对 化 妆 品 中 9种 防 腐 剂 的 梯 度 HPLC测 定 方 法 进 行了 探 讨 ,与 现 行 的 国 家 规 范 方 法 1 比 较 ,采 用 UV检 测 器 ,可 大量 节 省 分 析 时 间 和 仪 器 使 用 成 本 ,并 提 高 了 检 测 灵 敏 度 和 敏感 度 ,更 易 于 推 广 使 用 。1 材 料 与 方 法111 仪 器 与 试 剂11111 实 验 仪 器 LC - 10ADVP HPLC (LC - 10ADVP泵 ; SIL- 10ADVP自 动 进 样 器 ; SPD - 10AVP 紫 外 检 测 器 ; CTO -10AVP柱
26、 温 箱 ; DGU - 12A在 线 脱 气 机 ; SCL - 10AVP系 统 控制 器 , Class VP 6103色 谱 工 作 站 。 Shimadzu JAPAN)。11112 试 剂 与 标 样 已 睛 (HPLC级 ) ; NaH2 PO4 (AR)、 水 :双重 蒸 馏 水 ;标 准 样 品 ( Ehrenstorfer Gmbh) :准 确 称 取 9种 防 腐剂 标 准 品 ,用 甲 醇 配 制 成 如 下 浓 度 : (出 峰 顺 序 ) 溴 硝 丙 二 醇13010 g/m l ; 苯 甲 醇 13010 g/m l ; 苯 氧 基 乙 醇2510 g/m l;
27、尼 泊 金 甲 酯 110 g/m l; 苯 甲 酸 1010 g/m l; 尼 泊 金 已 酯 110 g/m l; 尼 泊 金 丙 酯 110 g/m l; 尼 泊 金异 丁 酯 110 g/m l; 尼 泊 金 丁 酯 110 g/m l。112 色 谱 测 定 条 件色 谱 柱 : HyperSIL - C18 416 250 mm 5 m ( Thermo) ;流动 相 : AcCN /0105 mol/L NaH2 PO4 (pH = 315) ;洗 脱 方 式 :高 压梯 度 洗 脱 ;流 速 : 110 m l/m in;柱 温 : 40 ;检 测 波 长 : 254 nm。1
28、13 样 品 处 理精 确 称 取 待 测 样 品 015 g于 1010 m l比 色 管 中 ,用 甲 醇 稀释 到 刻 度 ,剧 烈 振 摇 1 m in,超 声 萃 取 5 m in,取 上 清 液 经0145 m有 机 膜 过 滤 后 测 定 。2 结 果 与 讨 论211 分 离 条 件 的 选 择我 们 用 AcCN /0105 mol/L NaH2 PO4 (pH = 315)作 流 动 相 ,采 用 高 压 梯 度 的 洗 脱 方 式 ,对 9种 防 腐 剂 分 离 条 件 进 行 了 选择 。 结 果 表 明 9种 组 分 的 分 离 度 完 全 符 合 日 常 测 定 的
29、 要 求 ,同 时 作 空 白 实 验 未 见 任 何 干 扰 。 梯 度 洗 脱 参 数 见 表 1,标 准 谱图 见 图 1,空 白 样 品 谱 图 见 图 2。图 2 实 际 鲜 辣 椒 色 谱 图本 研 究 检 测 菠 菜 和 鲜 辣 椒 两 种 蔬 菜 中 PAH s的 含 量 ,以菲 、 萘 、 荧 蒽 的 含 量 最 高 ,这 与 焦 化 废 水 和 环 境 空 气 样 品 研 究的 结 果 有 相 似 性 ,可 见 水 和 大 气 等 环 境 污 染 是 导 致 蔬 菜 中PAH s残 留 的 主 要 因 素 。3 小 结本 方 法 采 用 GC - MS同 时 定 性 、 定
30、 量 检 测 蔬 菜 中 的 16种PAH s,采 用 环 己 烷 提 取 , 9 mol/L硫 酸 溶 液 磺 化 后 经 PSA柱 净化 后 进 行 分 析 。 具 有 样 品 前 处 理 方 法 简 便 易 行 ,杂 质 干 扰 少 ,色 谱 分 离 良 好 等 特 点 。 灵 敏 度 ,回 收 率 及 精 密 度 均 能 达 到 分析 要 求 ,适 用 于 蔬 菜 中 PAH s的 测 定 。参 考 文 献 1 李 娟 ,赵 永 刚 ,周 春 宏 1微 波 萃 取 - 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 环 境 空 气总 悬 浮 颗 粒 物 中 16种 多 环 芳 烃 J 1环 境 监
31、 测 管 理 与 技 术 , 2004,16 (6) : 24 - 261 2 陈 慧 ,黄 要 红 ,蔡 铁 云 1固 相 萃 取 - 气 相 色 谱 /质 谱 法 测 定 水 中 多环 芳 烃 J 1环 境 污 染 与 防 治 , 2004, 26 (1) : 72 - 741 3 杨 有 忠 ,颜 阳 ,张 泽 志 ,等 1多 环 芳 烃 研 究 进 展 J 1云 南 化 工 ,2005, 32 (2) : 44 - 481 4 崔 艳 红 ,巨 天 珍 ,曹 军 ,等 1加 速 溶 剂 提 取 法 测 定 蔬 菜 中 的 多 环 芳烃 和 有 机 氯 化 合 物 J 1农 业 环 境
32、科 学 学 报 , 2003, 22 ( 3 ) : 364 -3671 5 Monica CRC,Maria CFT1Policyclic aromatic hydrocarbons in brazilianvegetables and fruits J 1Food Control, 2003, 14: 49 - 531(收 稿 日 期 : 2005 - 10 - 03)991中 国 卫 生 检 验 杂 志 2006年 2月 第 16卷 第 2期 Chinese Journal of Health Laboratory Technology, Feb 2006; Vol 16 No 2 1994-2006 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http:/
