1、胰岛素类及降血糖药 一、动物选择 选用健康成年动物，常用小鼠或大鼠，有时也用兔、犬及猴等。要说明动物 品种及来源，性别不限，但同一批实验中给药组与对照组性别应相同。实验分组 时，小白鼠每组 1015只，大白鼠每组 810只，大动物每组 46只。 二、模型及方法 (一) 动物模型 1化学试剂诱发的高血糖动物 常用四氧嘧啶或链脲霉素，二者皆可选择 性破坏胰岛 B细胞，诱发动物高血糖，为胰岛素低下型高血糖动物模型。 造型时，四氧嘧啶或链脲霉素应新鲜配制，静脉给药可提高形成率。给药前 应预测动物的血糖值(常用葡萄糖氧化酶法)。选禁食 38(根据不同品种动物决 定)小时血清葡萄糖值在 180mgdl 以
2、上者。分组时各组动物平均血糖值相差应 不大于 20mgdl。 2正常动物 某些有刺激胰岛素分泌的降血糖药(磺酰脲类)，用上述动物模 型不能表现降血糖作用，但可降低正常动物血糖，因此评价新药时可选用正常动 物。 3自发性糖尿病动物 以血清胰岛素水平区分，有两型：即低血清胰岛素 型， 如 BB 大鼠， NOD 小鼠及中国地鼠。 高血清胰岛素类型， 大鼠有 obeseSHR， SHRNcp；小鼠有 obob，dbdb，KK 等。大多自国外引进，在特定条件 下培育与饲养。有条件者，可根据需要选用。 (二) 实验方法 1 血糖值测定 实验前动物禁食(自由饮水)38小时(同上决定)， 然后给药， 给药后
3、13 小时取血，测血清葡萄糖值。给药可采用一次性或连续数日给药。 实验可用正常动物或高血糖动物。 2糖耐量试验 实验时先取禁食动物血(为零时)，然后给药，1小时后腹腔 注射葡萄糖(2gkg)或口服葡萄糖(2.5gkg)，淀粉(35gkg)或蔗糖等双糖 (2.5gkg)，测定给糖后 0、0.5、l 及 2小时的血糖值或计算血糖曲线下面积。实 验可用正常或高血糖动物。 3血清胰岛素测定 用放射免疫法，具有刺激胰岛素分泌的药物，可选用 正常动物或自发性糖尿病动物进行血清胰岛素水平测定。 4 胰岛素生物检定法 即小白鼠惊厥法， 参考中国药典 1990年版， 附录 100 页的方法。 (三) 动物模型及
4、方法的选择 至少选用两种动物及两种以上的实验方法进行主要药效学研究。 应注意以下几点： 1降血糖药有刺激胰岛素分泌作用者，不宜选用化学试剂诱发的高血糖动 物模型。应进行正常动物或自发性糖尿病动物的血清胰岛素测定。 2糖水解酶抑制剂应进行淀粉或蔗糖等双糖的糖耐量试验。 3胰岛素类药物除用其他方法外，必需做胰岛素生物检定法。 三、观察指标 给药组动物的血糖值(或糖耐量的曲线下面积)明显低于对照组动物的血糖值 (或糖耐量的曲线下面积)，血糖下降率20，经统计学处理，给药组与对照组 的血糖值有显著性差异(p0.05)，并经三次重复实验后，则可认为该药有降血糖 作用。若为降血糖新药，除有确切的降血糖作用
5、外，与已知药对比，应具备特点 优于现有药物。 四、药物 (一) 配制 溶于水的药物可配成水溶液，对不溶于水的单一成分，可加少量 吐温，阿拉伯胶或 0.5羧甲基纤维素制成混悬液。 (二) 途径 第一类新药应当用两种以上给药途径， 其中一种必须是推广临床 使用的给药途径。 (三) 剂量 应设高、中、低三个剂量组，按体重给药。 (四) 阳性对照药 根据不同动物模型选择阳性对照药。 如正常动物及某些自 发性高血糖动物可选用磺酰脲类药(如优降糖 2550mgkg ig，达美康 80 100mgkg ig)。化学试剂诱发高血糖动物可选用双呱类药(如降糖灵 75100mg kg ig)。胰岛素及其类似药物可选用胰岛素(0.51.0iukg SC)。糖水解酶抑制 剂可选用 acarbose(1020mgkg ig)或其它相应的糖水解酶抑制剂为对照药。空 白对照组应给相应的助溶剂或水。
