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类型HPLC法测定厚朴温中汤不同煎液中厚朴酚的含量.pdf

  • 上传人:HR专家
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    1、中国药事2011年第25卷第9期 877 HPLC法测定厚朴温中汤不同煎液中厚朴酚的含量 罗红波,冯 华,罗秀琼 (贵州省遵义市药品检验所,遵义563002; 遵义医药高等专 科学校) 摘要: 目的考察用合煎、分煎方法制备的厚朴温中汤汤剂中厚朴酚含量的变化。方法建立HPLC法, 采用Diamonisl C18柱;流动相为甲醇一水(70:30);流速1mLmin;检测波长为294nm,分析厚朴温 中汤合煎液和分煎液样品中厚朴酚的含量变化。结果厚朴温中汤分煎液中厚朴酚的平均含量等于合煎液 中厚朴酚的平均含量。结论分煎液与合煎液比较,两种煎液中厚朴酚的含量无差异性。 关键词: 厚朴温中汤;厚朴酚;合

    2、煎;分煎;HPI C 中图分类号:R2841;R9272 文献标识码:A 文章编号:10027777(2011)09087703 Determination of Magnolol in Different Decoctions of Houpu Wenzhong Tang by HPLC Luo Hongbo,Feng Hua and Lno Xiuqiong (Zunyi Institute for Drug Control,Zunyi 563002; Zunyi Medcial and Pharmarttical College) ABSTRACT: Objective To inves

    3、tigate the content of Magnolol in hejian decoction(mixed the traditional Chinese herbs together,then boiling them with water)and in fenj ian decoction(boiling the sing1e traditional Chinese herb with water separately,then mixed the abstracts)of Houpu Wenzhong Tang Methods A HPLC method was establish

    4、ed with a Diamonisl C1 8 column,a mobile phase of methanolwater (70:30),a flow rate of 1mLmin- and a detection wavelength of 294nm in order to determine the content of magnolo1Results Conclusion The average content of magnolol in the fenj ian decoction was equal that in the hej ian decoction KEY WOR

    5、DS:Houpu Wenzhong Tang;Magnolol;hejian decoctions;fenjian decoctions;HPI C 厚朴温中汤出自内外伤辨惑论,处方由厚 朴(制)、陈皮(去白)、甘草、茯苓、草豆蔻仁、 木香、干姜组成,具有行气温中、燥湿除满等之功 效。采用传统的合煎法与现代分煎法制备的中药复 方汤剂,其有效成分含量有何变化,药理作用有何 变化,一直是中医药理论和临床实践中值得探讨的 课题,特别是近年来单味中药精制颗粒逐渐在临床 上推广应用,更引起国家对单味中药精制颗粒的重 视。本论文以具有代表性的中药经方厚朴温中汤中 的有效成分厚朴酚作为指标,比较该方用合煎法

    6、与 分煎法制得的汤剂中厚朴酚含量差异,探索中药复 方汤剂不同制法对其有效成分溶出量的影响,对单 味中药精制配方颗粒应用于临床及质量控制提供一 些理论依据。 1仪器、药材与试剂 11仪器 Waters1525型高效液相色谱仪,KQ-300DE 超声仪。 12药材与试剂 厚朴(制)、陈皮(去白)、甘草、茯苓、草豆 蔻仁、木香、干姜药材饮片(遵义医药有限公司, 经遵义市药品检验所邓顺超副主任中药师鉴定均符 合中国药典2010版一部收载品种)。厚朴酚对 照品(批号:110729200310,中国药品生物制品 基金项目:遵义市中药现代化科技产业研究开发专项项目课题(编号市科合中药专字1-20094号)

    7、作者简介:罗红波,副教授;主要从事新药研究及教学工作;Tel:13158223520;E-mail:luohoubo114163tom 通信作者:冯华,硕士;主要从事质量标准研究及药品检验工作;Tel:15085016387;E-mail:fenghua781014163com 878 中国药事2011年第25卷第9期 检定所),甲醇为色谱纯,水为娃哈哈纯净水。 2方法与结果 21色谱条件 色谱柱:Diamonisl C18柱(46mmX 200mm, 5ffm);流动相:甲醇一水(70:30);流速:lmL min ;检测波长:294nm;柱温:25 ;进样量: l0止;理论塔板数:4518

    8、;分离度:53。见图1。 0 00 2 00 4 00 6 00 8 00 1 0 00 12 00 14 0o 16Umin a对照品;b合煎液样品;C合煎液阴性液; d分煎液样品;e分煎液阴性液。 图1厚朴温中汤HPLC色谱图 22溶液的制备 221对照品溶液的制备 精密称取厚朴酚对照品145mg,置100mI 量 瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取 lmI 置50mI 容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀, 即得。 222合煎液的制备(传统煎煮法) 称取药材饮片厚朴(制)9g、陈皮(去白) 9g、甘草5g、茯苓5g、草豆蔻彳-=5g、木香5g、干 姜2g,加lO倍量的水煎煮,保持微沸3

    9、0min,倒 出煎液;药渣再加8倍量的水煎煮30rain,合并2 次煎液,减压干燥成干粉。称取相当原药材处方量 的干粉74845g(每个处方合煎后得率),置 100mL量瓶中,用热水溶解后,放冷,定容至刻 度。精密吸取5mI ,置25mL容量瓶中,加甲醇 至刻度,称重,超声处理(功率:250W,频率: 20kHz)30rain,取出,放冷,加甲醇补足减失的 重量,摇匀,滤过,取续滤液,用045fire的微孔 滤膜滤过,即得。 223分煎液样品溶液的制备 9 精密称取上述处方量的药材厚朴(制)、陈皮 (去白)、甘草、茯苓、草豆蔻仁、木香、干姜分别 加10倍量的水与合煎液相同时间煎煮2次,制备 各

    10、药材的煎液,减压干燥成干粉。称取相当原药材 处方量各药材的干粉厚朴o5856g、陈皮21472g、 甘草09798g、茯苓00286g、草豆蔻仁o1587g、 木香17704g、干姜oo435g(为每个处方各药材 煎煮后得率)混合均匀,同合煎液法制得分煎液样 品溶液。 224阴性对照液的制备 再分别按上法制备不含厚朴药材的合煎液、分 煎液的阴性对照液。 23线性关系考察 分别精密称取厚朴酚对照品,用甲醇稀释配制 浓度分别为0000727、0001455、00029l、 001164、002328mgmi 的厚朴酚系列对照品 溶液,精密吸取厚朴酚系列对照品溶液10ffl ,按 上述色谱条件依次测

    11、定,以峰面积积分值(A)对 进样量(C)进行线性回归,得回归方程: A=16l00X一2903810 r=09996 厚朴酚在00072702328g间浓度与峰面积的 线性关系良好。 24精密度试验 精密吸取同一对照品溶液10ffI ,重复进样5 次,测得平均峰面积为1004674,RSD一06 。 表明精密度良好。 25稳定性试验 取分煎液、合煎液,分别于0、4、8、16、 24h测定,合煎液RSD10 ;分煎液RSD 13 ,表明分煎液、合煎液在24h内稳定。 26重复性试验 分别取同一样品合煎液约748g;分煎液约厚 朴059g、陈皮215g、甘草098g、茯苓0029g、 草豆蔻仁01

    12、6g、木香177g、干姜0044g,各5 份,按样品测试条件测定,结果厚朴酚含量合煎液 平均为1460mg,分煎液平均为1462mg,合煎 液RSD=08 ,分煎液RSD=09 ,重复性好。 27回收率试验 按合煎液、分煎液制备项下方法制备厚朴温中 汤传统汤剂及其配方颗粒分煎汤剂各5份,精密加 入厚朴酚对照品(0370mgmI )2mI ,进行加 样回收试验,过045 m滤膜,并按色谱条件进 样,同法测定,结果见表1、表2。 一 。一 厶 一 6 4 f 一 2 d 0 一 伸 L 一 6 一 一 1_= 0 中国药事2011年第25卷第9期 879 表1 合煎汤剂厚朴酚加样回收率测定结果 注

    13、:mgm代表一个处方中含mg厚朴酚,药材称样量以得率折算为 原药材量。表24同。 表2分煎汤剂厚朴酚加样回收测定结果 28样品含量测定 分别按分煎液、合煎液制备方法制备合煎液、 分煎液各3批,测定其含量,求平均样品含量。厚 朴酚在一个复方中的含量分别为合煎液146mg, 分煎液147mg。见表3、4。 表3合煎汤剂厚朴酚含量测定结果 3结果 不同方法制备的相同药材厚朴温中汤的汤剂 中,通过统计分析,分煎液、合煎液中厚朴酚的含 量没有差异性。 4讨论 采用HPLC法测定中药复方制剂中的厚朴酚, 文献报道可用多种不同组成的流动相系统_2 ,本 实验选择药典方法,适当调整流动相比例,厚朴酚 与杂质峰

    14、能达到基线分离。 厚朴有燥湿消痰、下气除满等功效,对厚朴温 中汤合煎汤剂与分煎汤剂进行了厚朴酚含量的对比 研究。从以上研究结果可以看出,合煎液、分煎液 中有效成分厚朴酚的含量变化无差异。 参考文献: 1 中国药典Es一部,2010:235235 2 杨红兵,石磊,詹亚华,等湖北产凹叶厚朴质量研究(I) J湖北中医杂志,2007,29(11):5960 3 孟超,吴丰,马林厚朴类中药和厚朴酚及和和厚朴酚的含 量测定j天然产物研究与开发,2007,19:10241026 4 黄晓燕,卫莹芳,张盈娇,等高效液相色谱法测定厚朴叶 不同采收期中厚朴酚、和厚朴酚的含量I-J中国中药杂 志,2005,30(

    15、9):717 718 5 叶世芸,冯华,武孑L云,等高效液相法测定鸭掌散不同煎 液中甘草酸的含量及体外抗菌作用比较J时珍国医国 药,2008,19(11):22602601 6 武孔云,梁光义,贺祝英,等麻杏石甘汤传统汤剂与颗粒 汤剂中苦杏仁苷含量差异原因的研究J湖北中医杂志, 时珍国医国药,2008,19(2):270272 7 武孑L云,梁光义,冯华,等鸭掌散颗粒汤剂与传统汤剂中 甘草酸含量差异原因的研究J时珍国医国药,2008, 19(11):2592 2594 8 曹佩雪,梁光义,徐必学,等HPLC法测定麻黄汤分煎液及 合煎液中甘草酸的含量J中草药,2001,32(11):981983

    16、 1-9 武孔云,梁光义,贺祝英,等HPLC法测定麻杏石甘汤传 统汤剂与颗粒汤剂中苦杏仁苷含量J中药材,2007,30 (9):11281130 (上接第868页) 4 谭文杰,刘善虑,苗季,等中国4株丁型肝炎病毒抗原编 码区基因的eDNA克隆与序列分析J中华实验临床病 毒学杂志,1995,9(4):293298 r5 Gomes-Gouv6a M S,Soares M CHepatitis B and DeIta virus genotypes in Outbreaks of fulminant hepatitis(Labrea black fever)in the Western Braz

    17、ilian Amazon regionJJ Gen Virol,2009 Jul 15Epub ahead of print 6 Flodgren E,Bengtsson S,Knutsson M,et a1Recent high incidence of fulminant hepatitis in Samara,Russia:molecular analysis of prevailing hepatitis B and D virus strainsJJ 7 8 I-9 Clin Microbiol,2000,38(9):33113316 Mohebbi S R,Zali N,Derakhshan F,et al_,Molecular epidemiolology of hepatitis delta virus(HDV)in Iran:a preliminary reportJJ Med virol,2008,80(12): 20922099 江永珍,张明程,田瑞光,等丁型肝炎病毒抗原的原核表 达及抗原性分析lJ中华实验和临床病毒学杂志,2006, 20(2):3841 杨英超,伊瑶,赵洪兰,等丁型肝炎病毒内蒙古株的原核 表达及抗原性分析J中华实验和l 床病毒学杂志, 200721(1):5355

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