1、香菇中香菇嘌呤的HPLC分析,香菇,香菇Lentinus edods ，是世界第二大食用菌，又名香菌、花菇、香蕈，俗称中国蘑菇，是一种重要的食药用栽培真菌，它属于真菌门，担子菌纲，伞菌目，口蘑科，香菇属。,香菇的营养价值,蛋白质 脂肪 碳水化合物 矿物质钙、磷、铁 维生素B1、维生素B2、维生素C和维生素D,香菇的药用价值, 本草纲 目 认为香菇“ 甘、 平、 无毒 , 能益气 不饥 , 治 风破血 , 化痰理气 , 益味助食”。 抗肿瘤作用 增强免疫作用 降血脂、降血压的作用 保肝作用,香菇多糖 抗癌,香菇多糖,香菇嘌呤,香菇中含有一种降血脂的核苷类有效成分香菇嘌呤。 化学名为2,3-二羟基
2、-4-(-9腺嘌呤)丁酸（9H- Purine- 9- butaneic acid, 6- amino- ,- dihydroxy）,香菇嘌呤降血脂作用,香菇嘌呤的降血脂作用,香菇嘌呤能显著降低大鼠血浆中总胆固醇的含量，并能降低血液中磷脂和甘油三酯的含量。 香菇嘌呤通过调控脂肪酸代谢及改变磷脂酰胆碱分子种系的组成来降低血液胆固醇的含量，且其药理活性与外源性胆固醇的摄入与否无关，是通过调控基因表达来介导的。,香菇嘌呤的测定方法,紫外法 前处理十分复杂 气质联用法 衍生化，误差较大 纸电泳法 操作不方便重现性较差,目标,运用HPLC建立香菇嘌呤的测定方法 方法学考察,测定条件,仪器: Waters
3、 600系列高效液相色谱仪 色谱柱：Ultimate AQ-C18柱 流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液 检测器：UV检测器检测 检测波长：259 nm 流速：1 mL/min 柱温：40C 进样量：10 L,色谱条件优化 甲醇比例,色谱条件优化 - PH值,色谱条件: 甲醇磷酸盐缓冲液=7:93, pH 4.67, 香菇嘌呤同其他成分可以达到最佳的基线分离且峰形最好。,提取溶剂对香菇嘌呤提取量的影响,提取方式对香菇嘌呤提取量的影响,不同浓度乙醇对香菇嘌呤提取量的影响,提取时间的考察,提取溶剂体积的考察,最佳提取条件,5%乙醇超声提取 料液比：1：100 时间：30min,香菇嘌呤标准曲线,精密度,精
4、密吸取20ug/mL的标准品溶液10uL，连续进样5次，计算精密度。结果表明香菇嘌呤含量的RSD=0.40%，精密度良好。,重复性,取同一批样品，按优化后的方法平行制备供试液5份进行测定，考察重复性。结果表明，香菇嘌呤含量的RSD=0.08%，重复性良好。,稳定性,精密吸取20ug/mL的标准品溶液10uL，分别于配制后的0、5、10、15、20h内进样，测定峰面积。RSD=0.46%，表明标准品溶液在24h内稳定。,加样回收率实验结果,样品测定,结论,运用HPLC测定香菇嘌呤的分析方法，操作简单、重复性好、准确度高，应用此方法对样品进行测定的结果显示数据稳定误差小，适用于香菇嘌呤的定量分析。,谢谢！,
