超氧阴离子自由基定位荧光探针的合成及分析,简介,目的:设计合成用于定位检测线粒体内超氧阴离子自由基(O2-.)的新型双光子荧光探针。,意义:1.优良的定位荧光探针可高灵敏度和高选择性的检测细胞内亚细胞区域的功能活性物种(自由基、金属离子)。2.双光子荧光探针克服了单光子荧光探针的光漂白与光致毒而更适于生物检测与成像,为生命科学研究提供了更为锐利的工具。,探针的结构及反应产物结构图,一、探针的合成步骤1. 芴酰胺1的合成 2. 2,7-二溴甲基芴酰胺2的合成 3. 2,7-二醛基芴酰胺3的合成 4. 超氧阴离子自由基探针的合成 二、探针的荧光性质 三、结论,论文的主要内容,1.芴酰胺的合成,2.2,7-二溴甲基芴酰胺2的合成,一、探针的合成步骤,3.2,7-二醛基芴酰胺3的合成,4.超氧阴离子自由基探针的合成,二、探针的荧光性质,图2 探针及与超氧阴离子自由基反应后的荧光谱图。探针:20M,O2-.:6M,20mM pH 7.40 PBS 缓冲溶液,三、结论利用双光子荧光团9-氨基芴合成了一种检测线粒体内O2-.的新型双光子荧光探针,荧光光谱实验表明探针可以对O2-.很好的响应。可以将该双光子荧光探针应用到细胞,组织和活体成像中。,谢谢!,