1、1中草药化学成分一般鉴别方法中草药主要来源于植物。植物的化学成分较复杂，有些成分是植物所共有的，如纤维素、蛋白质、油脂、淀粉、糖类、色素等。有些成分仅是某些植物所特有的，如生物碱类、甙类、挥发油、有机酸、鞣质等。 各类化学成分均具有一定的特性，一般可由药材的外观、色、嗅、味等作为初步检查判断的手段之一。如药材样品折断后，断面不油点或挤压后有油迹者，多含油脂或挥发油；有粉层的多含淀粉、糖类；嗅之有特殊气味者，大多含有挥发油、香豆精、内酯；有甜奈者多含糖类；味若者大多含生物碱、甙类、苦味质；味酸者含有有机酸；味涩者多含有鞣质等等。 中草药所含化学成分均为多类的混合物，分析时常常互相干扰，不易得到正
2、确结果。因此需根据中草药所含各种化学成分的溶解度、酸碱度、极性等理化性质，再用各类成分的鉴别反应加以鉴别。 （一）鉴别注意事项 1根据各灰成分不同性质，选用适宜的溶剂提取，以保证等成分能被提取出来。 2检品提取液的浓度应足以达到各该反应的灵敏度。 3检品提取液的酸碱度（pH ）值应不致影响鉴别反应中所需要的 pH 值。相差甚大时应事先调节。 4提取液较深时，常易影响观察鉴别反应的效果，此时可适当稀释，或进一步提纯。 5鉴别反应时应注意防止多类成分的相互干扰，以免出现假阳性，或颜色不正等情况。最好在化学鉴别的同时，做空白试验和对照试验（用已知含某类成分的中草药或纯品做阳性对照）。 6在鉴别试验中
3、，如果某一类成分的几个鉴别反应结果不一致时（即有的呈阳性反应，有的呈阴性）则应进行全面分析。首先应注意呈阳性反应的试验是否属于该类成分的专一反应，否则应检查其他类成分能否产生该反应，从多方面加以判断。但也应注意，某些反应只能对某一类成分中的某个化学基团呈性反应，如检查黄酮类的盐酸镁粉试验，它只对黄酮类中的羟基黄酮类（黄酮醇类）反应明显，其余类的黄酮类则不甚明显，但也不能轻易否定不是黄酮类，为了避免孤立和片面的下结论，一定要全面考虑综合分析。 中草药化学成分一般鉴别试验屯只是一个初步判断，最后确证尚需进一步提纯，以鉴定后才能予以肯定。 （二）鉴别方法 蛋白质、多肽、氨基酸 2（1）加热或矿酸试验
4、：取检品的水溶液 1ml 于试管中，加热至沸或加 5盐酸，如发生混浊或有沉淀示含有水溶性蛋白质。 （2）缩二脲试验：取检品的水溶液 1ml，加 10氧化钠溶液 2 滴，充分摇匀，逐渐加入硫酸铜试液，随加摇匀，注意观察，如呈现紫色或紫红色示可能含有蛋白质和氨基酸。 凡蛋白质结构中含有两个或两个以上肽键（CONH）者均有此反应，能在碱性溶液中与 Cu2+生成仙络合物，呈现一系列的颜色反应，二肽呈蓝色，三肽呈紫色，加肽以上呈红色，肽键越多颜色越红。（3）茚三酮试验，取检品的水溶液 1ml，加入茚三酮试液 23 滴，加热煮沸 45 分钟，待其冷却，呈现红色棕色或蓝紫色（蛋白质、胨类、肽类及氨基酸）。
5、氨基酸与茚三酮的水合作物作用，氨其酸氧化成醛、氨和二氧化碳，而茚三酮被还原成仲醇，与所后成的氨及另一分子茚三酮缩合生成有蓝紫色的化合物。 【注】茚三酮试剂主要是多肽和氨基酸的显色剂，反应在 1 小时内稳定。试剂溶液 pH 值以 57为宜，必要时可加吡啶数滴或醋酸钠调整。 此反应非常灵敏，但有个别氨基酸不能呈紫色，而呈黄色，如脯氨酸。 （4）氨基酸薄层层析检出反应： 吸附剂：硅胶 G。 展开剂：（1）正丁醇：水（1：1）（2）正丁醇：醋酸：水（4：1：5） 显色剂：0.5茚三酮丙酮溶液，喷雾后于 1100 烘箱放置 5 分钟，显蓝紫允或紫色。 2皂甙 （1）泡沫试验：取检品的水溶液 2ml 于带
6、塞试管中，用力振摇 3 分钟，即产生持久性蜂窝状泡沫（维持 10 分钟以上），且泡沫量不少于液体体积的 13。 【注】常用的增溶剂吐温、司盘，振摇时均能产生持久性泡沫，要注意区别。 （2）溶血试验：取试管 4 支，分别加入滤液 0.25、0.5、0.75 ml，然后依次分别加入生理盐水2.25、2.0、1.75、1.5 ml，使每一个试管中的溶液都成为 2.5ml, 再将各试管加入 2的血细胞悬液2.5ml，振摇均匀后，同置于 370 水浴或 25270 的室温中注意观察溶血情况，一般观察 3 小时即可，或先滴红细胞于显微镜下，然后滴加检液看血细胞是否消失。如有溶血现象示正反应。 3【注】鞣质
7、对血红细胞有凝集作用，干扰溶血试验的观察，应事先除去（可用取胜酰胺粉吸附或用明胶沉淀）。 检液应为中性溶液。 （3）醋酐浓硫酸试验（Liebrmann Burchard 反应）取检品的水溶液置蒸发皿中，于水浴上蒸干，残渣加入少量冰醋酸使溶解，再加入醋酐浓硫酸（19：1）试液，呈现红紫色并变成污色绿色（甾类、三萜类成分或皂甙） （4）区别甾体皂甙和三萜皂甙：取带塞试管两支，各盛检品的水溶解 1 ml，1 支加 0.1N 盐酸溶液2ml，另一支加 0.1N 氢氧化钠溶液 2ml 用力振摇 1 分钟（需左右手交替振摇各半分钟），观察两管泡沫的多少，若两管泡沫体积相同或酸管多，示含三萜式皂甙；若加碱管
8、泡沫多于加酸管示含甾示含甾体皂甙。 三萜皂甙为酸性皂甙在酸性水溶液中形成较稳定的泡沫；甾体皂甙为中性皂甙在碱笥溶液中能形成较稳定的泡沫。 3糖、多糖或甙类 （1）碱性酒石酸铜试液：取检品的水溶液 12ml（如为醇溶液须将醇蒸发除去），加入碱笥酒石酸铜试液 1ml，于沸水浴上加热 5 分钟，产生棕红色或砖红色氧化亚铜沉淀，示有还原糖。 还原糖能使二价铜盐（蓝色）还原成氧化亚铜，醛糖的醛基氧化成羧基： 【注】如检液呈酸性，应先碱化。 此反应所产生的沉淀由于条件不同，其颜色也不同，质点上的呈黄色，质点大的呈红色。有保持性胶体存在时，也常产生黄色沉淀。 职样品中含有其他醛、酮及还原较强的其他成分，或中
9、划药制剂中附加的抗氧剂、；葡萄糖等均可显阳性反应。 （2） 萘酚试验（Molisch 紫环反应）：取检品的水溶液 1ml，加 5萘酚试液数滴振摇后，沿管壁滴入 56 滴浓硫酸，使成两液层，待 23 分钟后，两层液面出现紫红色环（糖、多糖或甙类）。 多糖类遇浓硫酸被水解成单糖，单糖被浓硫酸脱水闭环，形成糠醛类化合物，在浓硫酸存在下与 萘酚发生酚醛缩合反应，生成紫红色缩合物。 【注】甙的分子结构中含有糖基，一般属于单糖类，如葡萄糖，鼠李糖、半乳糖，但也有含二分4子糖（双糖）或多分子糖（多糖）。在上述反应条件下，甙被水解成单糖，因此甙萘酚试验，系分子中糖部分的反应。 由于此反应较为灵敏，如有微量滤纸
10、纤维或中草药粉末存在于溶液中，都能产生上述反应。故滤过时应加注意。 （3）多糖的确证试验：取检品的水溶液 5ml 于水蒸发至干，加入 1ml 蒸馏水，再加入乙醇 5ml，如出现沉淀，滤过收集后用少量热乙醇洗涤，再将沉淀物溶于 3ml 蒸馏水中，做下例试验。 碘试验：取检品的不溶液 1ml，加碘试液 1 滴，观察颜色变化，如呈蓝黑色为地衣糖；紫黑色为糊精；蓝色加热消失，冷后蓝色再现为淀粉。 多糖水解：取检品的水溶液 1ml，加入稀盐酸 5 滴，置沸水浴中加热 1015 分钟，然后用 10氢氧化钠液中和至中性，再加新配制的碱性酒石酸铜试淮 4 滴，另取检液 1ml，不加酸水解直接加入上述试液 4
11、滴，两管同置水浴上煮沸 56 分钟。如果水解后生成棕红色常常物的量比未经水解的多，则示有多糖。 多糖水解后产生单糖，利用单糖的还原性，使铜离子还原成氧化亚铜。 4鞣质及酚类 （1）三氯化铁试验：取检品的水溶液 1ml，加三氯化铁试液 12 滴，呈现绿色、污绿色、蓝黑色或暗紫色（可水解鞣质显蓝一蓝黑色，缩合鞣显绿色一污绿色）。 鞣质均是多羟基酚的衍生物，即多元酚，能和三价铁离子发生颜色反应生成复杂的络盐。 【注】此反应如遇有矿酸或有机酸、醋酸盐等存在，能阻碍颜色的生成。硝基酚类对三氯化铁试剂无明显反应。 （2）明胶试验：取检品的水溶液 1ml，加氯化钠明溶液 23 滴，即生成白色沉淀物。 鞣质有
12、凝固蛋白的性能。 （3）溴试验：取检品的水溶液 1ml，加溴试液 12 滴，生成白色或沉淀物，示可能含有酚或儿茶酚鞣质。 【注】过多的溴会阻碍鞣质的沉淀，因此溴水不宜多加。 （4）香草醛一酸试验：取检品的水溶液点于滤纸片上，干后，喷雾或滴加香草醛一盐酸试液，呈现红色斑点（多元酚类物质）。 （5）鞣质、酚类薄层层析检出反应： 吸附剂：聚酰胺；硅胶；硅胶；石膏：水（5：1：7）调成状，涂成薄板，1050 烘干 45 分钟。 5展开剂：乙醇：醋酸（100：2）；正丁醇：乙酸乙酯：水（5：4：1）；苯：甲醇（95：5）。 显色剂：10三氯化铁溶液；1三氯化铁乙醇溶液与 1铁氰化钾水溶液（1：1）显蓝一
13、紫色斑点。 5黄酮及其甙类 （1）盐酸一镁（或锌）粉试验：取检品的乙醇溶液 1ml，加放少量镁粉（或锌粉），然后加浓盐酸45 滴，置沸水浴中加热 23 分钟，如出现红色示有游离黄酮类或黄酮甙（以同法不加镁或粉做一对照，如两管都显红色则有花色素存在。如继续加碳酸试液使成碱笥即变成紫色双转变为蓝色，即证明含花色素）。 黄酮类的乙醇溶液，在盐酸存在的情况下，能被镁粉还原，生成花色甙元而呈现红色或紫色反应（个别为淡黄色、橙色、紫色或蓝色）。这是由于酮类化合物分子中含有一个碱性氧原子，致能溶于稀酸中被还原成带四价的氧原子即锌盐。本法是鉴别黄酮类的一个反应。但花色素本身在酸性下（不需加镁粉）呈红色，应加以
14、区别。 【注】此反庆仅在化学结构中，第三位上带羟基的酮醇类显色较明显，而其它黄酮烷酮类均不甚明显。因此试验呈阴性反庆是不能做出否定的结论，尚需结合其他实验再做结论。 试验应在醇中进行，水分多会影响颜色的生成。此反庆较慢，有时需置水浴上加热，以促使反应的进行。 （2）荧光试验： 三氯化铝试验：取检品的乙醇溶液点于滤纸片上（干后再点 1 次，使其浓度庥中），干后，喷雾 1三氯化铝乙醇试液，在紫外光灯下观察，呈现黄色、绿色、橙色等荧光为黄酮类；呈现天蓝色或黄绿色；荧光，则为二氢黄酮类。这是区别二氢黄酮类化合物的一种鉴别反应。 硼酸丙酮枸橼酸丙酮试验：取检品的乙醇溶液 1ml，在沸水浴上蒸干加入饱和硼
15、酸丙酮溶液及 10枸橼酸丙酮溶液各 0.5ml，蒸去丙酮后，在紫外光灯下观察，管内呈现强烈的绿色荧光（黄酮或其甙类）。 （3）碱液试验：取检品的乙醇溶液点于滤纸片上（干后，再点一次，使其溶液集中），干后，喷1碳酸钠溶液或在氨蒸气中熏几分钟，呈现亮黄、绿或橙黄色。如将氨气熏过的滤纸露置空气中，颜色逐渐裉去而变为原有的颜色（黄酮或其甙类）。常见中药材的水试鉴别法介绍水试法鉴别中药材，主要是根据中药材经过水浸泡后产生各种特殊的变化，如颜色改变、产生泡沫、粘性、滑腻、膨胀及其它现象等等，用以确定中药材的真伪优劣。此乃笔者十几年药检工作的经验总结，现介绍如下：1红花(菊科植物红花的干燥花 )：用水浸泡后
16、，水变成金黄色，花不褪色。2番红花(鸢尾科植物番红花的干燥柱头 )：浸泡于水中后，柱头膨胀呈长喇叭状，水面应有油状物漂浮，水被染成黄色，不显红色，无沉淀，用棒搅动，不易碎断，否则是伪品。3秦皮：少许浸入水中，因其含有荧光物质七叶树甙和七叶树素，浸出液在日光下可见蓝色荧光。4香加皮：水或乙醇浸出液，在紫外光下显紫色荧光，加稀盐酸荧光不变(与含杠柳总甙有关) ，加6氢氧化钠溶液，产生黄绿色荧光(4-甲氧基水杨酸反应) 。而五加皮无此反应。5苏木：投入热水中，浸液呈鲜艳的桃红色透明液体，加酸(或醋) 液体变为黄色，加碱(或石灰水)液体又变红色。6姜黄：用热水或乙醇浸泡，呈鲜艳的橙黄色透明液体，加碱(
17、或苏打水) 液体变桃红色。7熊胆：其粉末投入水杯中，可逐渐溶解而盘旋，有黄线下垂至杯底且不扩散。8小通草：水泡后手摸有粘滑感；干品嚼之亦有粘滑感。9南天仙子(水蓑衣)：水浸时，毛膨胀竖立，蓬松散开，粘性甚大，味淡而粘舌。而天仙子 (茄科)无粘性，且味苦。10葶苈子、车前子：加水浸泡后，种子粘滑且体积膨大。11胖大海：热水浸泡后，体积膨大至原来的数十倍且呈絮状团。12竹黄：天然竹黄沾到唾液后产生极强的吸舌力，而人工竹黄吸力较小且色泽多为纯一白色。天然竹黄水浸液对酚酞指示剂不显碱性，而人工竹黄显碱性反应，呈紫红色。13乳香：加水研磨后成白色乳状液者为真品。14没药：与水研磨形成黄棕色乳状液者为真品
18、。15青黛：取 0.5g 加水 10ml，振摇后放置片刻，水层不得显深蓝色，以此检查是否含有水溶性色素。16儿茶：其水浸出液用火柴杆沾之，使轻微着色，待火柴杆干后，再浸入浓盐酸中，立即取出，于火焰附近加热后，杆上发生深红色，以此检查儿茶素。17芦荟：芦荟的 1100 水溶液 2ml，加等量饱和溴水，即有四溴芦荟混合甙的黄色沉淀生成。18牛黄：取少许加清水调和，涂于指甲上，能将指甲染成黄色并经久不褪，俗称“挂甲”；入口则芳香清凉，味先苦而后微甜，嚼之不粘牙，可慢慢溶化。人工牛黄亦能“挂甲”，但入口后无清凉感，气微清香而略腥19石膏：取粉末 2g，于 140烘 20 分钟，加水 1.5ml 搅拌，
19、放置 5 分钟，呈粘稠固体。因石膏加热失去一部分结晶水而成熟石膏，与水相遇，复变为生石膏而具有粘性。别的矿石则无此特性。20银柴胡：正品水浸液无泡沫反应；而伪品山银柴胡水浸液有较强的泡沫反应。21板蓝根：板蓝根根为十字花科植物菘蓝或爵床科植物马蓝的根。二者的鉴别点在于，菘蓝根的水煎液可显蓝色荧光；马蓝根的水煎液则无蓝色荧光反应。22远志：取粉末 0.5g，加热水 10ml，用强力振摇 1 分钟，即生成持续性泡沫，并在 10 分钟内不消失，以此检查皂甙。23白芷：取粉末 0.5g，加水 3ml，振摇后滤过，取滤液 2 滴，点于滤纸上，置紫外灯光下观察，显蓝色荧光。24柴胡：取粉末 0.25g 放
20、入试管内，加蒸馏水 5ml，冷浸 20 分钟后，滤过，取滤液强力振摇 5 分钟，有持久性泡沫产生，以此检查皂甙。25重楼：因含甾体皂甙，其水浸液振摇后产生很多泡沫并且经久不散；而拳参含没食子酸而无皂甙之泡沫反应。26天麻：隔水蒸后有臊臭味(马尿味) 者为真品，且野生者较家种品味浓。另取天麻粉末 1g，加水10ml，浸渍 4 小时随时振摇，滤过，滤液加碘试液 24 滴，呈紫红色或酒红色反应。27阿胶、龟胶、鹿角胶：取少许胶类药材用热开水溶化后，其溶液透明，有甜香味，无沉淀，无异味，无浮油星。否则即有假。28山药、茯苓、三七、贝母、虫草、鹿茸：此类药材用粮食粉末伪造者较多，用热水浸泡后，粮食铸制者会溶化，正品不溶
