1、方法二、紫外快速测定法一、原理：Vc 的 2.6二氯酚靛酚容量法，操作步骤较繁琐，而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响。紫外快速测定法，是根据 Vc 具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于 243nm 处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中 Vc 的含量。二、实验器材：紫外分光光度计、离心机、分析天平、容量瓶（10ml, 25ml）、移液管（0.5ml，1.0ml）、吸管、研钵。三、实验试剂：10%HCl：取浓盐酸 133ml，加水稀释至 500ml。1%HCl：取浓盐酸 22ml，加水稀释至 100ml。 1M NaOH 溶液：称取 40gN
2、aOH，加蒸馏水，不断搅拌至溶解，然后定容至1000ml。四、操作步骤：（一）标准曲线的制作1抗坏血酸标准溶液的配制：用分析天平准确称取抗坏血酸10mg，加 2ml 10%盐酸，加蒸馏水定容至 100ml，混匀。此抗坏血酸溶液的浓度为 100g/ml。2取带塞刻度试管 8 支并编号，分别按表内所规定的量加入抗坏血酸标准溶液和蒸馏水。1 2 3 4 5 6 7 8标准抗坏血酸溶液加入体积（ml）0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.8 1.0蒸馏水加入体积（ml） 9.9 9.8 9.7 9.6 9.5 9.4 9.2 9.0总体积（ml） 10.0 10.0 10.0 10.0
3、10.0 10.0 10.0 10.0抗坏血酸溶液浓度（g/ml）1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 8.0 10.03消光值的测定：以蒸馏水为空的，在 243nm 处测定标准系列抗坏血酸溶液的消光值，以抗坏血酸的含量（g）为横坐标，以相应的消光值为纵坐标作标准曲线。（二）样品的测定1样品的提取：将果蔬样品洗净、擦干、切碎、混匀。称取 5.00g于研体中，加入 2-5ml 1% HCl，匀浆，转移到 25ml 容量瓶中，稀释至刻度。若提取液澄清透明，则可直接取样测定，若有浑浊现象，可通过离心（1 0000g, 10min）来消除。2样品的测定：取 0.2ml 提取液，放入盛有 0.
4、4ml 10% HCl 的10ml 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度后摇匀。以蒸馏水为空白，在 243nm 处测定其消光值。3待测碱处理液的制备：分别吸取 0.2ml 提取液，2ml 蒸馏水和0.8ml 1M NaOH 溶液依次放入 10ml 容量瓶中，混匀，15min 后加入0.8ml 10% HCl，混匀，并定容至刻度。以蒸馏水为空白。在 243nm处测定其 OD 值。4由待测样品与待测碱处理样品的消光值之差和标准曲线，即可计算出样品中 Vc 的含量。5也可直接以待测碱处理液为空白，测出待测液的消光值，通过查标准曲线，计算出样品的 Vc 的含量。四、计算V 总Vc 的含量（g /g）= V1W 总式中： 从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量（g）V1测消光值时吸取样品溶液的体积（ml）V 总 样品定容体积（ml）W 总 称样重量（g）
