激光共聚焦步骤:1. 细胞用 4%的多聚甲醛固定 20min(时间不宜太长) ,用 PBS 洗 3 遍。2. 用 0.1%曲拉通 -100 透膜 10min(摇动) ,用 PBS 洗三遍。3. 用 5%的 BSA 封闭 1h 或过夜(摇动) ,用 PBS 洗三,加一抗孵育 2h,用 PBST 洗三遍,加二抗孵育 1h,碧云天 DPAI5min(不宜过长)洗三遍(可多洗几次每次 5min) 。4. 封片,看片。
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