1、青岛华仁药业股份有限公司企业标准 Q/HR 第 1 页 共 5 页题目： 高效液相色谱仪期间核查作业指导书起草人： 日期： 密级：审核人： 日期： 版本号：批准人： 日期： 颁发部门：制订依据：GMP（1998） 实施日期：变更原因及目的：复印份数： 分发至：1目的为了解高效液相色谱仪的状态,维护高效液相色谱仪在两次检定期间校准状态的可信度,减少由于仪器稳定性变化造成的试验结果偏差,特对高效液相色谱仪进行期间检查。2. 人员及职责2.1 检验员按照指导书负责期间核查计划的具体实施及负责期间核查的核查记录。2.2 审核人：负责审核核查方案、监督期间核查过程、确认核查效果、审核数据。审核人可由中心
2、负责人兼任。2.2 质量部长审核期间核查结果并负责组织处理核查发现的不符合项目,审核批准核查报告。2.3 资料管理员负责仪器设备期间核查记录的归档保管。3. 引用标准3.1 jjg705-2002 液相色谱仪检定规程3.2 液相色谱仪使用、维护说明书。4. 核查条件4.1 环境条件4.1.1 环境温度 535 ，相对湿度 20%85%。4.1.2 室内无强烈的机械振动和电磁干扰。4.2 仪器安装要求：仪器应安装在平稳的工作台面上，电缆线的接插件应紧密配合，仪器接地良好。4.3 电源要求：电压为（22022）V，频率为（501）HZ。4.4 期间核查的准备4.4.1 测试设备秒表： 分度值不大于
3、 0.1 秒电子分析天平微量注射器：10L， 50L，（自动进样器不需）游标卡尺：15cm/0.02mm 以上器具需计量检定合格4.4.2 试药：萘 甲醇（色谱纯）4.5 人员的资格确认 记载所有参与验证工作的人员，并对他们的资格进行确认。姓名 部门 职责 签名 日期质量部青岛华仁药业股份有限公司企业标准 Q/HR 第 2 页 共 5 页5. 测试项目和技术指标确认部件 确认项目 合格标准流量设定值误差 SS 0.5ml/min:5%；1.0ml/min:3%输液泵流量稳定性误差 SR 0.5ml/min:3%；1.0ml/min:2%自动进样器 进样量准确度误差 2%基线噪声 210 4 A
4、U检测器基线漂移 510 3 AU/h定性测量重复性误差 RSD1.5%（n=6）整机性能定量测量重复性误差 RSD3.0%（n=6）4 测试方法4.1 流量设定值误差 SS和流量稳定性误差 SR 选用 C18色谱柱，用 100%甲醇为流动相，流速为 1.0ml/min，启动仪器，待压力稳定后，在流动相出口处用清洁、干燥已称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集 5 分钟，测量 3 次，称重，计算 SS和 SR。SS=（F m平 - FS）/F S100%SR =（F max-Fmin）/ F m平 100%式中：S S流量设定值误差（%）Fm流量实测值 F m=（W 2-W1）/ tt
5、 W2容量瓶+流动相的质量（g）W1容量瓶的质量（g）FS流量设定值（mL/min） t实验温度下流动相的密度（g/cm 3）t收集流动相的时间（min）SR流量稳定性误差（%）Fmax同一组测量中流量最大值（mL/min）Fmin同一组测量中流量最小值（mL/min）F m平 同一组测量的算术平均值（mL/min）4.2 基线噪声 ND和基线漂移选用 C18色谱柱，用 100%甲醇为流动相，流速为 1.0ml/min，检测波长为 254nm，启动仪器，待压力稳定后，记录基线 30min，计算基线噪声（用 AU 表示） 。基线漂移用 1h 内基线偏离原点的值（AU/h）表示。4.3 定性、定量
6、重复性检查选用 C18色谱柱，用 100%甲醇为流动相，流速为 1.0ml/min，检测波长为 254nm，启动仪器，待压力稳定后，精密量取 110-4g/mL 萘/甲醇标准溶液注入高效液相色谱仪，进样量 510L，连续测定 6 次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，分别计算相对标准偏差（RSD） 。4.4 自动进样器进样量准确度误差试验青岛华仁药业股份有限公司企业标准 Q/HR 第 3 页 共 5 页取 1.5ml 进样瓶装入 1ml 水，用天平精密称定其重量，然后置于自动进样器上让其进样 10 次，每次 50l。进样完成后再精密称定其重量，由重量差计算进样量准确度。5 测试周期 一年6.负责人
7、对核查结果进行综合评价，做出核查结论，发放核查证书，确认需补充项目及时间。对验证结果的评价应包括：6.1 核查试验是否有遗漏？核查记录是否完整？6.2 核查试验结果是否符合标准要求？偏差及对偏差的说明是否合理？是否需要进一步的补充试验？附：反相液相色谱柱性能测试1.性能指标项目 标准理论塔板数 3104 - 4104不对称因子 0.95 - 1.052.柱性能测试方法2.1 测试条件与标准溶液2.1.1 测试合格的液相色谱仪2.1.2 流动相：甲醇-水（85：15） ；流速 1.0ml/min(直径 4.6mm 柱)；检测波长 254nm2.1.3 标准溶液：含 10-4g/ml 尿嘧啶；10
8、 -5g/ml 联苯和萘（蒽）的甲醇溶液2.1.4 进样量：10L2.1.5 游标卡尺3.测试：3.1 将色谱柱连接到合格的色谱仪3.2 进样，记录色谱图。重复 3 次，取平均值。保留时间需精确到 0.02min3.3 计算每米的理论塔板数（中国药典 2005 年版附录）n5.54(t R/Wh/2)2 1000/L L=柱长（mm）3.4 根据色谱图计算不对称因子（中国药典 2005 年版附录）青岛华仁药业股份有限公司企业标准 Q/HR 第 4 页 共 5 页期间核查记录仪器名称 型号制造商 系列号出厂日期 所在部门准确度级别 安装地点室温 相对湿度外观检查核查方法 柱规格：流动相： 流速：标准液：检测波长流量设定值误差 SS和流量稳定性误差 SR序号 时间 min 空称量瓶 g 称量瓶加 水重 g 标准值 流量设定值误 差 平均值123计算 流量稳定性误差 结论：基线噪声 ND和基线漂移 见图谱定性、定量重复性检查序号 保留时间 保留时间 RSD 峰面积 峰面积 RSD123456自动进样器进样量准确度误差试验序号 样品瓶+水重 进样后样品瓶 +水重 进样 10 次的水重 准确度误差12检测者： 年 月 日 复核者： 年 月 日确认 检验中心 年 月 日质量部 年 月 日验证委员会 年 月 日青岛华仁药业股份有限公司企业标准 Q/HR 第 5 页 共 5 页
