1、减压神经放电与动脉血压神经调节的机制分析【实验目的】1. 实验观察减压神经集群放电频率与动脉血压之间的关系。2. 观察部分神经因素对动脉血压和减压神经放电的影响。3. 观察自主神经对动脉血压的影响,并分析其机制。【实验原理】机体动脉血压(artery blood pressure)能维持相对稳定,其原因是体内存在压力感受性反射(baroreceptor reflex) 。在人的颈动脉窦和主动脉弓处存在能感受血压变化的压力感受器(baroreceptor) ,当动脉血压发生变化时,这些压力感受器感受的刺激也发生相应的变化,通过窦神经和主动脉神经传入延髓心血管系统,使压力感受性反射增强或减弱来维持
2、动脉血压相对稳定。兔的主动脉神经在颈部自成一束,与迷走神经伴行称减压神经或降压神经(depressor nerve) 。减压神经是传入神经(afferent nerve) ,当主动脉弓处血压升高时,主动脉管壁被动扩张,减压神经传入冲动频率增多,反之,传入减少。在压力感受性调节中,心迷走神经的节前和节后纤维均为胆碱能纤维,其节后纤维通过释放 Ach 作用于心肌 M 受体而抑制心肌的活动;心交感神经和交感缩血管神经的节前和节后纤维分别为胆碱能纤维和肾上腺素能纤维,节前纤维释放 Ach 作用于节后神经元的 N 受体而兴奋节后神经,后者再释放去甲肾上腺素兴奋心肌,收缩血管。本实验通过直接记录家兔动脉血
3、压和减压神经放电, 观察神经体液因素对动脉血压和减压神经放电的影响,并分析压力感受性调节的受体机制。【预习要求】1. 动脉血压的概念、测定方法、及变化规律。2. 颈动脉窦和主动脉弓压力感受性反射规律及生理意义。3. 常见的影响动脉血压的神经体液因素。4. 兔颈部的解剖结构、详细了解兔颈动脉和减压神经的解剖位置。【实验动物、器材和药品】1. 实验动物:家兔2. 台秤、兔手术台、注射器(1ml、20ml 各一个) 、哺乳类动物手术器械一套、 BL-410生物信号记录分析系统(或其它生物信号记录分析系统) 、引导电极、血压换能器、三通阀、铁支架2个、动脉夹2 个、动脉插管、玻璃分针、棉线、25%氨基
4、甲酸乙酯(乌拉坦,urethane) 、0.5%肝素盐水、1 :100000 乙酰胆碱、0.1阿托品、1:100000 乙酰胆碱、1:15000 肾上腺素、 1:15000去甲肾上腺素、生理盐水、酚妥拉明。【实验方法与步骤】1. 动物手术 (1)静脉注射25乌拉坦(4ml/kg)将动物麻醉(anaesthesia) ,仰卧固定于兔手术台;(2)减压神经和颈总动脉的分离:剪去颈部手术野的毛,于喉下正中部位切开皮肤6 9cm,止血钳行钝性分离,暴露气管(trachea )及左颈总动脉(left common carotid artery) 。先不破坏颈动脉鞘,仔细观察迷走神经与交感神经之间一条最细
5、的神经即为减压神经。用玻璃分针轻轻分离左侧减压神经23cm ,其下穿2根用生理盐水浸泡过的棉线备用;分离右颈总动脉2 3cm,穿双线备动脉插管用。(3)动脉插管(cannulation):塑料插管内预先充满肝素盐水溶液,结扎左侧颈总动脉远心端。用动脉夹夹住其近心端,穿线备用;用眼科剪剪一斜形剪口,心向插入动脉插管并结扎、固定。如有较多血液进入插管内,可经三通管向管内推入少量肝素溶液(特别注意正确使用三通管的使用) 。2. 仪器连接 神经放电引导电极一端钩挂分离的减压神经,另外一端与 BL-410系统1 通道相连,血压换能器插头连至 BL-410系统2 通道,记录血压。3. 软件操作:(1)依次
6、选定:信号输入 通道 l 神经放电 自动调零。(2)依次选定:信号输入 通道2 压力 自动调零。(3)依次选定:参数设置 显示方式 连续示波。(4)依次选定:设刺激器 连续单次刺激 波宽约5ms,刺激强度约3V(可调) 。 “增益选择” 、“显速选择” 、 “设刺激器”等依具体情况进行调整。【观察项目】1. 引导电极记录减压神经放电,颈总动脉插管及血压换能器记录血压;2. 牵拉一侧颈总动脉刺激颈动脉窦压力感受器,观察减压神经放电及血压的改变;3. 夹闭对侧颈总动脉减少颈动脉窦感受的刺激,观察减压神经放电及血压的改变;4. 静脉注射肾上腺素,观察减压神经放电及血压的改变;5. 静脉注射去甲肾上腺
7、素,观察减压神经放电及血压的改变;6. 静脉注射酚妥拉明后再注射去甲肾上腺素,观察血压的变化;7. 静脉注射乙酰胆碱,观察减压神经放电及血压的改变;8. 静脉注射阿托品后再注射乙酰胆碱,观察血压的变化;9. 刺激颈部迷走神经外周端模拟迷走神经兴奋对心脏的抑制,观察血压的变化;10. 静脉注射阿托品后刺激颈部迷走神经外周端,观察血压的变化。【注意事项】1. 切开颈部后要保持血管和神经的自然位置,仔细辨认减压神经。2. 悬挂减压神经时不要牵拉过紧,引导电极应悬空,勿触及周围组织。3. 尽量将周围减压神经上的结缔组织分离干净,以免增大引导电阻。4. 分离血管和神经时尽可能用玻璃分针,不要用金属器械,
8、以免损伤血管和神经。5. 插管要固定结实以防实验过程中滑脱,插管方向应与动脉保持一致,防止管口堵塞或管尖刺破管壁。6. 实验过程中如果需要,可向动脉插管内加注肝素溶液,但应避免将肝素溶液推入血管内以防伤口出血。7. 正确使用三通阀,特别是插管时应处三不通的位置;经三通管注液时勿强行用力以免折断注射器。每项实验完成之后必须等血压基本恢复稳定后再进行下一项。【实验报告要点】1. 整理分析原始记录曲线,定量测定动脉血压和减压神经放电的变化并以三线表显示于实验结果栏。2. 分析正常动脉血压的形成及影响因素。3. 分析讨论减压神经放电变化对动脉血压的影响。4. 分析讨论心迷走神经兴奋和交感缩血管神经兴奋对心血管活动影响的受体机制。【思考题】1. 在一个心动周期中,减压神经放电与血压的关系如何?2. 压力感受性反射有何生理意义?3. 肾上腺素的升血压机制是什么?为什么静脉注射肾上腺素血压先升后降?4. 本实验中哪些步骤可解释药物作用于 M、 受体,为什么?