1、1病原生物学与免疫学实验课程本科教学大纲(供临床医学专业七年制、五年制本科生使用)重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室2010 年 1 月修订2微生物学与免疫学实验课教学大纲医学微生物学部分医学微生物学实验课是针对各专业医学生开设的基本技能训练课。实验课内容有基本实验方法、经典验证性实验、综合性实验和创新性试验，目的是帮助学生加深对理论课知识的认识和理解，培养学生在医学微生物学方面的实验思路、基本技能、无菌观念、临床技巧、创新意识和参与科学研究的能力，锻炼学生将理论知识用于解决临床实际问题的能力。为学生今后从事临床医学工作奠定基础。实验教材采用本校杨致邦教授主编病原生物学实
2、验 ，实验项目分以下四部分：（1）基本实验方法：为病原生物学实验特有的基本操作技术。（2）经典验证型实验：为验证病原生物学理论，加深学生感性认识的实验。（3）综合型实验：为融合病原生物学实验知识结合科研而设计的一些实践性实验。（4）设计型实验：按照临床实际，部分学生在教师指导下，根据所学的病原生物学实验知识自行设计完成的实验。总学时为24学时，共6次实验。其中基本实验方法：4学时；经典验证型实验：10学时；综合型实验：10学时。安排如下：实验内容 实验学时1 细菌形态结构的观察 42 细菌的人工培养与消毒灭菌 43 化脓性球菌 44 肠道杆菌 45 厌氧菌、白喉杆菌 46 四体、真菌、病毒 4
3、3实验一 细菌形态结构的观察实验类型 综合型实验、经典验证型实验【目的要求】1.熟悉实验室生物安全规则,掌握无菌操作技术；2.掌握细菌标本革兰染色的操作步骤和方法；显微镜(油镜)下细菌形态的观察; 革兰染色结果判断；3.掌握细菌的特殊结构（荚膜、鞭毛、芽孢）的形态特点。实验学时 4 学时【实验内容】1.实验室生物安全规则；2.细菌标本革兰染色观察（Grams Stain)(每人做） ；3.复习显微镜(油镜)的使用(每人做） ； 4.细菌特殊结构（荚膜、鞭毛、芽胞）的观察。实验分组4 人/组，12 组/班。实验二 细菌的人工培养与消毒灭菌 实验类型 基本实验方法、经典验证型实验【目的要求】1.了
4、解细菌人工培养的方法和过程。2.熟悉常用的消毒灭菌方法、仪器设备、使用注意事项等。3.掌握细菌在各种培养基的生长现象,细菌菌落的概念,熟悉细菌菌落的特点。 4.熟悉细菌生化反应的原理和结果。实验学时 4 学时【实验内容】一、录像1细菌的人工培养2消毒灭菌二、细菌培养物观察1液体培养物观察42固体培养基观察三、细菌的生化反应实验分组4 人/组，12 组/班。实验三 化脓性球菌实验类型 综合型实验、经典验证型实验【目的要求】1.了解病原性球菌的分离与鉴定程序。2.掌握三种葡萄球菌、三种链球菌菌落的特点。3.掌握化脓性球菌的形态特征。4.熟悉血浆凝固酶试验的方法。实验学时 4 学时【实验内容】一、化
5、脓性球菌(录像)二、化脓性球菌培养物1三种葡萄球菌普通琼脂平板菌落观察。2三型链球菌血琼脂平板菌落观察。三、乙型溶血性链球菌液体培养物涂片、革兰氏染色、镜检（每人做。四、血浆凝固酶试验(玻片法)实验分组4 人/组，12 组/班。实验四 肠道杆菌实验类型 综合型实验、经典验证型实验实验学时 4 学时【目的要求】1.了解肠道杆菌的分离与鉴定程序。2.掌握肠道杆菌在选择鉴别培养基上的菌落特点。3.掌握常见肠道致病菌的生化反应特点。4.熟悉测定细菌对药物敏感度的方法（琼脂扩散法 ）和结果判断。5【实验内容】一、肠道杆菌(录像)二、S.S、伊红美蓝选择鉴别培养基上的菌落观察。三、双糖铁培养基生化反应观察
6、。 四、细菌药物敏感试验（琼脂扩散法 ） 实验分组4 人/组，12 组/班。实验五 厌氧菌、白喉杆菌实验类型 综合型实验、经典验证型实验【目的要求】1.熟悉厌氧菌的培养方法;2.掌握几种常见厌氧菌的形态及特殊结构；3.掌握破伤风杆菌，产气荚膜杆菌在庖肉基、牛乳基中的生长现象；4.掌握白喉杆菌的形态特征;5.掌握白喉杆菌的 Albert 染色法；实验学时 4 学时【实验内容】1厌氧菌培养方法。2保险粉法培养破伤风杆菌。3厌氧菌的形态结构观察：双歧杆菌,破伤风杆菌，产气荚膜杆菌的形态结构观察;（示教镜）4破伤风杆菌，产气荚膜杆菌庖肉基、牛乳基生长现象观察;5白喉杆菌的 Albert 染色形态特征观
7、察。 （每人做）实验分组4 人/组，12 组/班。实验六 四体、真菌、病毒实验类型 综合型实验、经典验证型实验【目的要求】1熟悉四体的形态结构特征；62掌握多细胞真菌菌丝和孢子的基本形态结构特征，白假丝酵母菌和新生隐球菌的形态结构特征；3熟悉真菌的培养条件，真菌菌落的特点。了解普通培养法和小培养法(玻片法)的应用特点,了解真菌培养基的制备。4掌握病毒的形态、结构特征。5掌握牙菌斑细菌的检查方法。实验学时 4 学时【实验内容】1.四体、真菌、病毒(录像)2.真菌菌丝和孢子的形态结构观察;（示教镜）3.真菌菌落特点观察; 3.牙垢涂片革兰染色观察奋森螺旋体和梭形杆菌。 （每人做）实验分组4 人/组
8、，12 组/班。实验七 “自设计”创新性实验实验类型：创新性实验目的要求1.要求参加实验的学生根据所学微生物学知识，自设计相关实验，并按要求对该实验的研究意义、可行性进行分析，从而制定较为规范实验方案。2.带教老师审核、确定实验方案并指导实验。3.要求学生书写完整的实验总结或论文。7医学免疫学部分(供七年制、五年制医学各专业用)免疫学是医学基础课程之一，具有很强的实验依赖性。免疫学实验教学不仅是理论教学的补充，而且是培养学生思维、锻炼学生技能的实践性课程。本实验教学大纲的制定依据是免疫学教学大纲，实验教材本校朱道银教授主编医学免疫学实验 。本大纲规定学时为 24 学时，共 6 次实验，适用于我
9、校各专业本科生(七年制和五年制临床医学本科)，安排如下：实验课内容 学时数1 凝集反应 42 沉淀反应 43 免疫标记技术 44 免疫酶斑点试验 4免疫学实验安排在免疫学理论课的教学内容之后，主要包抗原抗体反应之凝集反应和沉淀反应、免疫标记技术之 ELISA 试验和斑点免疫试验以及细胞免疫功能检测等内容。免疫学实验旨在让学生在有限的时间内学到现代免疫学常用的基本实验方法和技术，并使学生通过实验课的学习进一步认识和巩固课堂所学的知识，同时培养学生的实际操作能力及分析问题、解决问题的科学思维能力。 实验一 凝集试验 实验类型：综合型实验经目的要求:1.熟悉实验室规则。2.掌握体外抗原抗体反应的特点
10、和影响因素。3.掌握经典的体外抗原抗体反应的原理、方法和应用。4.掌握玻片凝集反应的原理和应用；熟悉 ABO 血型的鉴定方法。5.了解间接凝集试验的原理和用途；熟悉乳胶凝集实验检测 RF 过程及结果判定。实验学时: 4 学时。8实验内容:1.学习体外抗原抗体反应的特点和影响因素。2.学习经典的体外抗原抗体反应的原理、方法和应用。3.玻片凝集试验血型鉴定。4.间接乳胶凝集试验类风湿因子的检测。实验二 沉淀试验实验类型：综合型实验、经典验证性实验目的要求：1.掌握沉淀反应的定义及种类。2.熟悉单扩、双扩、火箭电泳、免疫电泳的原理、方法及用途。实验学时：4 学时。实验内容：1.单向琼脂扩散试验。2.
11、双向琼脂扩散试验。3.火箭电泳。4.免疫电泳。实验三 免疫标记技术实验类型：综合型实验目的要求：1.了解免疫标记技术的种类。2.熟悉酶免疫技术基本原理、特点、种类和方法。3.了解酶联免疫吸附实验(间接法)的基本过程及其作用。4.熟悉双抗夹法检测 HBsAg 的基本步骤。5.熟悉胶体金法检测早早孕的原理、基本步骤。实验学时：4 学时。实验内容：1.免疫标记技术录相。2.ELISA 法测 HBsAg。3.早孕检测(胶体金法)。9实验四 斑点酶免疫实验实验类型：经典验证性实验目的要求：1. 了解常用细胞免疫功能检测试验的种类、原理和方法。2了解斑点免疫的基本原理、特点及用途。3.熟悉斑点免疫检测微量
12、抗原的方法及步骤。实验学时：4 学时。 实验内容：1.“细胞免疫检测”录像。2斑点酶免疫实验检测细胞因子。实验五 创新性实验实验类型：创新性实验目的要求1.要求参加实验的学生根据所学免疫学知识，自设计免疫相关实验，并按要求对该实验的研究意义、可行性进行分析，从而制定较为规范实验方案。2.带教老师审核、确定实验方案并指导实验。3.要求学生书写完整的实验总结或论文。实验学时：机动。实验内容：1.参考免疫学实验创新性实验范例、由学生自行设计免疫相关实验。10人体寄生虫学部分大纲编制说明本大纲的编制是按照高等医学院校七年制本科临床医学专业学生的人体寄生虫学教学要求，根据寄生虫病的特点，结合本校现行的教
13、学计划、教学时数安排，结合寄生虫病流行的地方性特点，注重应用性知识教学，加强学生工作能力的培养。 本大纲适于七年制本科临床医学专业学生使用。教学时数分配：按照本校现行的教学安排，医学本科生实验课 24 学时。详细学时分配附表。实验内容 实验学时实验一 粪便内虫卵及易与虫卵混淆的常见物观察 4实验二 医学线虫 4实验三 医学吸虫 4实验四 医学绦虫 4实验五 医学原虫 4实验六 医学节肢动物 4合 计 2411实验一 粪便内虫卵及易与虫卵混淆的常见物观察教学时数：4 学时基本实验方法：粪便直接涂片法（多媒体演示）经典验证型实验：蛔虫卵的形态观察综合性实验：粪便内人体肠道线虫卵的检查创新性实验：易
14、与寄生虫虫卵混淆的混合物鉴别目的要求：1. 掌握粪便直接涂片法等常用粪检方法的操作。2. 熟悉粪便内寄生虫或寄生虫卵与其他形状类似物的区别。主要内容：1. 技术操作: 粪便直接涂片法、饱和盐水浮聚法、水洗自然沉淀法、改良加藤法。2. 观察粪便直接涂片上的寄生虫卵。3. 观察示教标本：粪便内的淀粉、花粉、油滴、气泡、植物细胞、动物细胞、植物纤维。4. 复习显微镜的使用方法。实验二 医学线虫教学时数：4 学时基本实验方法：粪便沉淀法、浮聚法、透明胶纸法、厚血膜法、肌肉压片活检（多媒体演示）经典验证型实验：蛔虫、鞭虫、钩虫、蛲虫、旋毛虫、丝虫的成虫及虫卵形态观察综合性实验：蛔虫卵人工孵化与感染实验创
15、新性实验：市售蔬菜的寄生虫卵污染状况检查目的要求：1. 掌握蛔虫卵、鞭虫卵、钩虫卵、蛲虫卵的形态特征。2. 掌握班氏与马来微丝蚴、旋毛虫囊包的形态特征。3. 熟悉蛔虫、鞭虫、钩虫、蛲虫、丝虫成虫形态。4. 熟悉丝虫、旋毛虫成虫形态。5. 了解透明胶纸法的操作。了解上述虫种寄生部位的病理标本。6. 了解上述虫种寄生部位的病理标本。12主要内容：1. 观察蛔虫卵(受精卵、未受精卵、脱蛋白膜卵、感染性蛔虫卵)，鞭虫卵、钩虫卵混悬液涂片、蛲虫卵贴片标本，两种钩虫口囊。2. 观察示教标本：蛔虫、鞭虫、钩虫、蛲虫成虫。3. 观察班氏微丝蚴、马来微丝蚴、旋毛虫囊包染色玻片标本。4. 观察上述成虫寄生部位的病
16、理标本。5. 观察示教标本：旋毛虫成虫，丝虫、旋毛虫成虫寄生部位的病理标本。实验三 医学吸虫教学时数：4 学时基本实验方法：痰液消化离心沉淀法、毛蚴沉淀孵化法、环卵沉淀试验、尾蚴膜实验、ELISA 法（多媒体演示）经典验证型实验：华支睾吸虫、并殖吸虫、姜片吸虫、日本血吸虫的成虫、幼虫及虫卵形态观察综合性实验：实验动物人工感染血吸虫实验创新性实验：实验动物血吸虫感染的免疫学诊断（ELISA 法）目的要求：1. 掌握肝吸虫、肺吸虫虫卵形态特征。2. 掌握血吸虫、姜片虫的虫卵形态特征。3. 熟悉肝吸虫、肺吸虫成虫的形态，肝吸虫、肺吸虫的中间宿主。4. 熟悉血吸虫、姜片虫成虫的形态，两种吸虫的中间宿主
17、。5. 了解肝吸虫、肺吸虫寄生部位的病理标本。6. 了解血吸虫、姜片虫寄生的病理标本。主要内容：1. 观察肝吸虫、肺吸虫虫卵混悬液涂片标本。2. 观察血吸虫、姜片虫虫卵混悬液涂片标本。3. 观察肝吸虫、肺吸虫的成虫、中间宿主标本。4. 观察血吸虫、姜片虫的成虫标本、中间宿主标本。5. 观察示教标本：肝吸虫、肺吸虫、血吸虫和姜片虫寄生人体的病理标本。实验四 医学绦虫教学时数：4 学时基本实验方法：透明胶纸法、囊尾蚴活检（多媒体演示）经典验证型实验：链状带绦虫、肥胖带绦虫、细粒棘球绦虫、曼氏迭宫绦虫的成虫、幼虫及虫卵形态观察13综合性实验：实验小鼠感染膜壳绦虫的检查目的要求：1. 掌握猪带绦虫、牛
18、带绦虫、曼氏迭宫绦虫的头节、孕节的区别。2. 熟悉这几种绦虫的虫卵形态特征，上述绦虫的中间宿主。3. 了解上述绦虫寄生人体的病理标本。主要内容：1. 观察猪带绦虫、牛带绦虫的头节、成节、孕节玻片标本。2. 观察带绦虫虫卵封片、曼氏迭宫绦虫虫卵混悬液涂片标本。成虫全虫标本。3. 观察示教标本：上述绦虫的中间宿主标本、成虫或幼虫寄生人体器官的病理标本。实验五 医学原虫教学时数：4 学时基本实验方法：包囊的碘液染色实验、查疟原虫薄血膜法与厚血膜法（多媒体演示）典验证型实验：溶组织内阿米巴与结肠内阿米巴、蓝氏贾第鞭毛虫、阴道毛滴虫、杜氏利什曼原虫、疟原虫、刚地弓形虫的形态观察综合性实验：口腔感染齿龈内
19、阿米巴的检查创新性实验：阴道毛滴虫的体外培养目的要求：1. 掌握溶组织内阿米巴(包囊、滋养体)、蓝氏贾第鞭毛虫(包囊、滋养体)、无鞭毛体、阴道毛滴虫的形态结构。2. 掌握间日疟原虫与恶性疟原虫红内期、弓形虫滋养体的形态结构。3. 熟悉结肠阿米巴包囊、利什曼前鞭毛体形态。4. 熟悉疟原虫子孢子、疟原虫卵囊、三日疟原虫红内期的滋养体和裂殖体形态。主要内容：1. 观察溶组织内阿米巴及蓝氏贾第鞭毛虫的包囊和滋养体、利什曼原虫无鞭毛体、阴道毛滴虫滋养体染色玻片。2. 观察间日疟原虫、恶性疟原虫的薄血膜染色玻片、弓形虫滋养体染色玻片。3. 观察示教标本：结肠阿米巴包囊、利什曼前鞭毛体染色玻片。4. 观察示
20、教标本： 溶组织内阿米巴、杜氏利什曼寄生人体的病理标本。 5. 观察示教标本：疟原虫子孢子、三日疟原虫成熟裂殖体。14实验六 医学节肢动物教学时数：4 学时基本实验方法：皮肤螨虫的检查方法（多媒体演示）经典验证型实验：蚊、蝇、蚤、虱、螨、蜱的形态观察综合性实验：人体面部感染蠕形螨的检查创新性实验：蝇的饲养与蝇蛆抗菌物的提取目的要求：1. 掌握的三属蚊区别，五种常见蝇的区别，人体虱、人头蚤与耻阴虱的区别、硬蜱与软蜱的区别，毛囊螨与皮脂螨的区别。2. 认识常见蚊、蝇、虱、蚤、蜱、螨成虫及幼虫的形态。主要内容：1. 观察三属蚊（按蚊、库蚊、伊蚊）的成蚊针插标本。2. 观察五种常见蝇（家蝇、大头金蝇、绿蝇、麻蝇、丽蝇）成蝇针插标本。3. 观察人体虱、人头蚤、耻阴虱、蚤的成虫封片标本，注意它们适应寄生生活的形态特征。4. 观察自制的蠕形螨标本。5. 观察示教标本：蚊幼虫、蛹的活体标本。蝇蛆、蛹的固定或活体标本。硬蜱和软蜱的固定标本。疥螨的封片标本。本大纲从 2010 年 2 月开始施行
