1、第 1 页 共 10 页第二十四章 自身免疫性疾病及其免疫检测自身免疫耐受：正常情况下，机体能识别“自我”，对自身的组织细胞成分不产或仅产生微弱的免疫应答，是维持机体免疫平衡的重要因素。自身免疫：在某些情况下，自身耐受遭到破坏，机体免疫系统对自身成分发生免疫应答。其发生是机体免疫系统产生了针对自身成分的自身抗体或自身反应性 T 淋巴细胞，又称为致敏 T 淋巴细胞（以下简称致敏 T 细胞）。由自身免疫应答引起的疾病称为自身免疫性疾病（AID）。第一节 概述当机体免疫系统受某些内因、外因或遗传等因素作用产生针对自身正常或变性的组织、器官、细胞、蛋白质或酶类等自身抗原发生免疫应答，导致自身组织器官损
2、伤或功能障碍所致的疾病称自身免疫性疾病（简称自身免疫病）。自身免疫性疾病患者体内有针对自身组织器官、细胞及细胞内成分的自身抗体，是疾病诊断中的重要标志。一、自身免疫性疾病的分类按受累器官组织的范围将自身免疫性疾病分为器官特异性和非器官特异性两大类。器官特异性自身免疫性疾病是指病变局限于某一特定器官或组织，可以检出对该组织器官成分特异的自身抗体或致敏 T 淋巴细胞。非器官特异性自身免疫性疾病是指侵犯多种组织器官或系统的一组疾病，可检出对多种器官或组织成分的自身抗体或致敏 T 淋巴细胞。二、自身免疫性疾病的共同特征1.可以有诱因，也可以无诱因，但多数病因不清。2.患者以女性居多，并随年龄增加发病率
3、有所增加。3.有遗传倾向，已发现有些特定基因与自身免疫病的发病有密切关系。4.疾病的重叠现象，即一个患者可同时患一种以上自身免疫病。5.免疫抑制剂治疗多可取得较好的疗效。6.血清中有自身抗体或体内有针对自身组织细胞的致敏 T 淋巴细胞。自身抗体在不同的自身免疫病中有交叉和重叠现象。部分疾病有相关的特征性自身抗体。7.一般病程较长，多迁延为慢性。病程中病情发展和缓解常反复交替，病情的严重程度与自身免疫调节紊乱程度密切相关。8.病理损伤的局部可发现有淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞浸润。第二节 自身免疫性疾病与免疫损伤发生自身免疫病的关键是机体产生了针对自身组织成分的自身抗体和致敏 T 淋巴细胞，并在
4、体内发生了自身免疫应答，导致自身组织细胞的损伤。一、自身抗原生物、物理、化学因素引起的自身组织细胞结构与成分发生改变，并能引起机体免疫系统针对这些自身组织细胞成分产生免疫应答反应的抗原物质称为自身抗原。（一）隐蔽抗原的释放体内某些组织成分，如精子、眼内容物、脑等，在正常情况下从未与免疫细胞接触过。因手术、外伤、感染等原因破坏隔绝屏障，便与免疫系统接触。如自身免疫性交感性眼炎。第 2 页 共 10 页（二）自身成分的改变自身成分在受到物理因素（如冷、热、电离辐射）、化学因素（如药物）或生物因素（如细菌、病毒等）作用后，其抗原性发生变化。改变的自身成分刺激免疫系统引起自身免疫应答。如变性的 IgG
5、 可刺激机体产生抗变性 IgG 抗体（类风湿因子），并与抗变性 IgG 抗体结合形成中等大小的免疫复合物，沉积于关节滑膜上，引起类风湿关节炎。临床上使用某些药物后，可改变血细胞表面抗原性，引起自身免疫性溶血性贫血或粒细胞减少。（三）共同抗原引发的交叉反应某些细菌、病毒与正常人体某些组织细胞上有相类似的抗原决定簇，针对这些细菌、病毒抗原决定簇产生的自身抗体和致敏淋巴细胞可与自身组织细胞发生交叉反应，引起自身免疫性疾病。如 A 型溶血性链球菌的多种抗原蛋白与人心肌内膜和肾小球基底膜有共同抗原。柯萨奇病毒感染激发的免疫应答可攻击胰岛的 细胞引起糖尿病。二、免疫调节异常（一）淋巴细胞旁路活化 识别外来
6、抗原载体决定簇的 Th 细胞能被激活发生反应，故外来抗原可辅助B 细胞产生免疫应答，即称为 Th 细胞旁路活化，从而引发自身免疫应答。（二）多克隆刺激剂的旁路活化 某些多克隆刺激剂如 EB 病毒和超抗原，可激活处于耐受状态的 Th细胞或者直接向 B 细胞发出辅助信号刺激其产生自身抗体，引发自身免疫应答。（三）辅助刺激因子表达异常 免疫活性细胞的激活，除与抗原肽识别外，还须有两细胞间辅助刺激因子的相互作用。如 APC 表面辅助刺激因子的异常表达，便可激活自身免疫应答的 T 细胞。此外，Th1 细胞功能亢进可促进某些器官特异性自身免疫病的发展，如 1 型糖尿病（DM1）和多发性硬化症（MS）。Th
7、2 细胞功能过高，易活化 B 细胞产生自身抗体，介导某些全身性自身免疫性疾病，如 SLE的发展。（四）自身致敏 T 细胞与自身抗原应答 T 淋巴细胞被自身抗原致敏，当再次遇到相同的抗原时，发生的免疫应答反应可引起自身组织细胞损伤。常见的致敏 T 淋巴细胞主要有两类：CD4 +Th1 细胞；CD8 +CTL 细胞。1.CD4+Th1 细胞 当 CD4+Thl 细胞再次遇到并识别带有靶抗原的靶细胞时，可释放多种细胞因子，如IFN、IL-2、IL-3、TNF、GM-CSF 等。趋化性细胞因子可使单核-吞噬细胞聚集在抗原存在部位。在IFN 作用下单核-吞噬细胞活化，释放溶酶体酶等炎症介质引起局部炎症。
8、TNF 活化巨噬细胞，产生TNF-，可直接对靶细胞及其周围组织细胞产生细胞毒作用，并促进单核细胞和白细胞聚集于抗原存在部位，产生以单核细胞及淋巴细胞浸润为主的免疫损伤的炎症。 2.CD8+CTL 细胞介导的细胞毒作用 CD8+CTL 细胞识别靶细胞表面相应靶抗原后，可直接向靶细胞释放穿孔素和颗粒酶等介质，导致靶细胞溶解破坏，或诱导靶细胞表面表达 Fas，后者与 CD8+CTL 表面的 FasL 结合，导致靶细胞凋亡。三、遗传因素人类的自身免疫性疾病常有家族遗传倾向。DR3：重症肌无力、系统性红斑狼疮（SLE）、胰岛素依赖型糖尿病。B27：强直性脊柱炎。DR4：类风湿关节炎、寻常性天疱疮。DR5
9、：桥本甲状腺炎。HLA-类基因中补体 C4 基因的缺失、Fas/FasL 的基因缺陷：SLE。第三节 常见的自身免疫性疾病第 3 页 共 10 页由于病理性的自身免疫应答可发生在体内任何组织器官，临床上常以病理损害的机制来区分各类自身免疫性疾病，而许多自身免疫性疾病与超敏反应的发生密切相关，因此，可分为由型超敏反应引起的自身免疫性疾病，由型超敏反应引起的自身免疫性疾病及由 T 细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性疾病。一、由型超敏反应引起的自身免疫性疾病自身抗体（IgG、IgM 类）与相应的自身组织细胞表面的抗原结合后，可通过四条途径破坏细胞：激活补体，形成攻膜复合体，最后溶解细胞；通过 Fc
10、和 Cab 调理促进巨噬细胞吞噬破坏靶细胞；通过ADCC 作用破坏靶细胞；刺激淋巴细胞功能的异常表达。常见由型超敏反应引起的自身免疫性疾病如下：（一）抗血细胞表面抗原的抗体引起的自身免疫性疾病1.自身免疫性溶血性贫血（AIHA）AIHA 的特点是：体内出现抗红细胞自身抗体，抗人球蛋白试验阳性；红细胞寿命缩短。分为原发性和继发性两类。继发性自身免疫性溶血性贫血多继发于淋巴系统恶性疾病、结缔组织性疾病、细菌病毒感染和应用某些药物后。如青霉素、奎尼丁、异烟肼、对氨基水杨酸、非那西丁、磺胺类、甲基多巴等。抗红细胞抗体根据其性质可分为三类：温抗体：为 IgG，37可与红细胞结合，但不聚集红细胞，可引起自
11、身免疫性溶血性贫血；冷凝集素：为 IgG，在低温时能与红细胞结合，使其凝集。常引起冷凝集素综合征（CAS）；Donath-Laidsteiner 抗体：属于 IgG，此抗体在低温时先与两种补体成分结合，当温度升高至 37时，引起补体连锁激活，导致溶血，临床上出现阵发性冷性血红蛋白尿症（PCH）。PCH 的发生常与继发于三期或先天性梅毒有关；某些儿童或年轻患者在有些病毒感染后，也易发生PCH。2.免疫性血小板减少性紫癜（ITP）ITP 是一种常见的血小板减少症，主要表现为皮肤黏膜紫癜，血小板减少，骨髓中巨核细胞正常或增多。ITP 患者血清中存在有抗血小板抗体，该抗体可以缩短血小板的寿命。ITP
12、根据病因和临床表现可分为特发性免疫性血小板减少性紫癜（无明显诱因）和继发性免疫性血小板减少性紫癜（有明显病因，或在一些原发病基础上发生血小板减少）。（二）抗细胞表面受体抗体引起的自身免疫性疾病1.重症肌无力（MG）：患者体内存在神经肌肉接头乙酰胆碱受体的自身抗体。这种自身抗体结合到横纹肌细胞的乙酰胆碱受体上，使之内化并降解，导致肌细胞对运动神经元释放的乙酰胆碱的反应性不断降低，引起以骨骼肌运动无力为特征的一种自身免疫性疾病。疾病可发生于任何年龄，最先出现的症状是眼肌无力，进而累及机体的其他部位，常呈进行性加重。2.毒性弥漫性甲状腺肿：有抗促甲状腺激素受体（TSHR）的 IgG 型自身抗体。可刺
13、激甲状腺激素持续分泌，造成甲状腺功能的亢进。（三）细胞外抗原的自身抗体引起的自身免疫性疾病1.抗肾小球基底膜肾炎 抗肾小球基底膜肾炎大部分为肺出血肾炎综合征（又称 Good-Pasture 综合征）患者，即肾小球肾炎与出血性肺炎同时发生。患者血液中可检测到抗肾小球基底膜型胶原抗体，该抗体的效价与肾组织损害的严重程度呈正相关。2.抗肾小管基底膜（TBM）肾炎 抗肾小管基底膜抗体常出现于抗肾小球基底膜肾炎患者中，并伴有肾小管间质性肾炎。二、自身抗体-免疫复合物引起的自身免疫性疾病第 4 页 共 10 页（一）系统性红斑狼疮（SLE） 是一种累及多器官、多系统的小血管及结缔组织疾病，易发于年轻女性，
14、病程中往往复发与缓解交替出现。患者体内可产生针对核酸、核蛋白和组蛋白的抗核抗体及其他自身抗体。SLE 患者常有多系统、多器官的损害。根据损害的器官不同，患者可出现发热、皮疹、关节痛、肾损害，心血管病变、浆膜炎、贫血、精神症状等多种临床表现。（二）类风湿关节炎（RA）RA 的特征是以手脚小关节向心性对称发病，老年患者可能存在远端大关节受累。病程长者常可出现关节畸形。关节外表现包括血管炎、皮肤和肌肉萎缩、皮下结节、浆膜炎、肺炎（局限型）、淋巴结病、脾肿大和白细胞减少等。多发于青壮年，女性多于男性。患者体内产生的变性 IgG 作为自身抗原刺激免疫系统产生多种抗变性 IgG 的自身抗体，即类风湿因子（
15、RF）。变性 IgG 与类风湿因子结合，形成的免疫复合物沉积于关节滑膜等部位，激活补体，在局部引起慢性渐进性免疫炎症性损害，部分病例可累及心、肺及血管等。（三）干燥综合征（SS） 该疾病典型特征为分泌腺体功能异常导致皮肤和黏膜的干燥，泪腺与唾液腺最常被侵犯，从而产生眼干与口干。该疾病抗 SSA/Ro 抗体、抗 SSB/La 抗体通常为阳性。（四）多发性肌炎（PM）及皮肌炎（DM） 多发性肌炎是以损害肌肉为主要表现的自身免疫性疾病，如果同时有皮肤损害，则称为皮肌炎。多发性肌炎以成人多见，皮肌炎在儿童有较高的发生率。该病临床通常表现为近端肌群无力，伴有触痛，随病情发展患者可有呼吸困难甚至危及生命。
16、较特异的 Jo-1、Mi抗体主要见于多发性肌炎，而 PM-1 及 Ku 多见于多发性肌炎与硬皮病的重叠。（五）硬皮病（Scl） 硬皮病最典型的表现为皮肤变紧、变硬。75%的 PSS 患者有抗核抗体阳性，80%95%的局限性硬皮病患者抗着丝点抗体阳性。抗 Scl-70 抗体是 PSS 的特异性抗体。三、T 细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性疾病（一）1 型糖尿病（DM1） APC 和 CTL 相互作用产生的 IL-1 和 NO 可使胰岛 细胞表达 Fas，激活的 CTL 表达 FasL，使表达 Fas 的 细胞受到破坏。患者体内产生了针对胰岛 细胞的 CD8+CTL，并对胰岛 细胞发生免疫应答，
17、损伤胰岛 细胞，使其最终丧失分泌胰岛素的功能。（二）多发性硬化症（MS）MS 的发生与髓鞘碱性蛋白（MBP）作为自身抗原致敏 Th 细胞，当 Th 细胞进入中枢神经系统后，再次与 MBP 接触而发生免疫应答反应，导致脊髓鞘破坏，引起疾病。同时，该病的发生与患者淋巴细胞上Fas/FasL 信号表达异常密切相关。第四节 常见自身免疫性疾病的自身抗体检测一、自身抗体的特性凡经化学修饰的组织抗原，与正常组织成分有交叉反应的外来抗原，隔绝的体内自身成分，以及低分化的组织抗原等在一定条件下，均可刺激机体组织产生自身抗体。测定自身抗体有助于自身免疫性疾病的诊断，并对判断疾病的活动程度、观察治疗效果、指导临床
18、用药具有重要的临床意义。二、抗核抗体的检测与应用抗核抗体（ANA）是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称。ANA 的性质主要是 IgG，也有 IgM、IgA 和 IgD。其无器官和种属特异性。ANA 主要存在于血清中，也可存在于胸腔积液、关节滑膜液和尿液中。ANA 在未治疗的 SLE 患者中的效价较高，在大多数自身免疫性疾病中均可呈阳性，正常老年人也可有低效价的 ANA。ANA 阳性并不一定患有自身免疫性疾病。ANA 有多种类型。各种 ANA 在不同的自身免疫性疾病中出现不同组合，各亚类 ANA 抗体对明确诊断、临床分型、病情观察、预后及治疗评价都具有重要意义。抗核抗体
19、检测是 SLE 的最佳筛查试验。抗核抗体效价与自身免疫性疾病的临床活动性无关。第 5 页 共 10 页目前按细胞内分子理化特性与抗原分布部位将 ANA 分为四大类，即抗 DNA 抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体和抗核仁抗体。（一）检测方法目前最常用间接免疫荧光法（IIF）作为总的 ANA 筛选试验。IIF 检测目前最常用 Hep-2（人喉癌上皮细胞）细胞作为抗原。培养 HEp2 细胞作为抗原固定于载玻片上，与受检血清反应，形成 IC，此时再加入FITC 标记的抗人 IgG，在荧光显微镜下可观察。（二）常见的 ANA 荧光图形及临床意义1.均质型（H） 细胞核均匀着染荧光，有些核仁部位不着色，
20、分裂期细胞染色体可被染色出现荧光。与均质型相关的自身抗体主要有抗不溶性 DNP 抗体，以及抗组蛋白抗体、抗 dsDNA 抗体。高效价均质型主要见于 SLE 患者，低效价均质型可见于 RA、慢性肝脏疾病、传染性单核细胞增多症或药物诱发的狼疮患者。2.斑点型（S） 细胞核内出现颗粒状荧光，分裂期细胞染色体无荧光显色。主要为抗核糖体核蛋白颗粒抗体，如抗 Sm、抗 Ru1 RNP、抗 SSB/La 等抗体。高效价的斑点型常见于 MCTD，同时也见于 SLE、硬皮病、SS 等自身免疫性疾病。3.核膜型（M） 又称周边型，荧光着色主要显示在细胞核的周边形成荧光环，或在均一的荧光背景上核周边荧光增强；分裂期
21、细胞染色体区出现荧光着色。相关抗体主要是抗 dsDNA 抗体。高效价的周边型几乎仅见于 SLE，特别是活动期 SLE，其他自身免疫疾病很少见周边型，因此周边型对 SLE 的诊断价值极大，且提示病情活动。4.核仁型（N） 荧光着色主要在核仁区，分裂期细胞染色体无荧光着色。主要是抗核仁特异的低分子量 RNA 抗体，抗 RNA 聚合酶-1 抗体、抗 U3 RNP 抗体、抗 PM-Scl 抗体。核仁型在硬皮病中出现率最高，尤其是高效价核仁型对诊断硬皮病具有一定特异性。未经治疗的 SLE 或 MCTD 患者几乎 95%以上都有抗核抗体，且效价较高，一般 l：100 以上具有临床诊断价值。抗核抗体阴性对排
22、除 SLE 的阴性预测值较高，所以抗核抗体检测是 SLE 的最佳筛查试验。抗核抗体效价与自身免疫性疾病的临床活动性无关。抗核抗体在其他自身免疫病中也可出现，但效价较低。抗核抗体的荧光图形分类对了解自身免疫性疾病的鉴别诊断具有提示作用。（三）抗双链 DNA 抗体的检测方法抗 dsDNA 抗体与细胞核的反应位点是位于 DNA（外围区）脱氧核糖磷酸框架上。检测抗 dsDNA 抗体最特异和最敏感的方法是用马疫锥虫或绿蝇短膜虫作为抗原基质进行间接免疫荧光检测。抗 dsDNA 抗体在 SLE 诊断中特异性强而敏感性低。抗体效价与疾病的活动程度有相关性。抗 dsDNA 抗体可形成多种冷沉淀而致血管炎，狼疮肾
23、炎及典型的蝶形红斑均与该抗体有关。抗 dsDNA抗体诊断 SLE 的特异性可达 95%l00%，但其敏感性仅为 30%50%，因此抗 dsDNA 抗体阴性不能排除 SLE的诊断。（四）抗核小体抗体的检测及应用当 SLE 患者的吞噬细胞对凋亡细胞的清除能力受损或降低，导致核小体在患者体内大量存积，多聚核小体与活化的单核细胞结合后被抗原递呈细胞呈递给 CD4+Th2 细胞，Th2 细胞增殖活化，激活 B 细胞产生抗核小体抗体（AnuA）。AnuA 特异性高，与 SLE 病情活动性相关，通常采用 ELISA 检测法。在系统性硬化（SSc）病中可低表达。三、抗 ENA 抗体谱的检测与应用ENA 是可提
24、取核抗原的总称，ENA 抗原可用盐水或磷酸盐缓冲液从细胞核中被提取。ENA 由小分子 RNA与蛋白质组成，不含 DNA。ENA 抗原中主要包括 Sm、RNP、SSA、SSB、Jo-1、Scl-70 抗原。（一）抗 ENA 抗体的检测1.免疫印迹技术（IBT）：属于膜载体酶免疫技术，其固相载体为吸附有抗原的硝酸纤维膜。不需纯第 6 页 共 10 页化单个抗原，并可在同一载体上作多项抗原分析，灵敏度高，特异性强，操作简便，是目前各临床实验室广泛采用的检测抗 ENA 抗体谱的方法。2.斑点酶免疫技术（dot-ELISA）（二）抗 ENA 抗体的临床意义1.抗 Sm 抗体 抗 Sm 抗体仅发现于 SL
25、E 患者中，是 SLE 的血清标志抗体。约 30%40%的 SLE 患者抗 Sm抗体阳性，此抗体阴性不能排除 SLE 的诊断。相对抗 dsDNA 抗体而言，抗 Sm 抗体水平不与 SLE 疾病的活动性相关，亦不与 SLE 的任何临床表现相关，治疗后的 SLE 患者也可存在抗 Sm 抗体阳性。抗 Sm 抗体的检测对早期、不典型的 SLE 或治疗后的回顾性诊断具有很大帮助。2.抗核 RNP 抗体 抗核 RNP 抗体是诊断混合性结缔组织病（MCTD）的重要血清学依据，但在其他自身免疫性疾病中也可检出。由于 Sm 和 RNP 是同一分子复合物（RNA-蛋白质颗粒）中的不同抗原位点，故抗 Sm 抗体阳性
26、常伴有抗RNP 抗体阳性。3.抗 SSA/Ro 抗体和抗 SSB/La 抗体 在干燥综合征（SS）中抗 SSA/Ro 抗体的敏感性较高，而抗 SSB/La抗体的特异性较高。4.抗 Jo-1 抗体 该抗体最常见于见于多发性肌炎（PM），故又称为 PM-1 抗体。对诊断 PM 具有特异性。5.抗 Scl-70 抗体 几乎仅在进行性系统性硬皮病（PSS）患者中检出，故该抗体是 PSS 的特征抗体。四、小血管炎相关的自身抗体检测与应用（一）抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） 以人中性粒细胞胞浆成分为靶抗原，与临床多种小血管炎性疾病密切相关的自身抗体。主要有：胞浆型（cANCA）针对的主要靶抗原是蛋白酶
27、3（PR3）。核周型（pANCA）针对的靶抗原为髓过氧化物酶（MPO），为中性粒细胞嗜天青颗粒的主要成分。PR3 和抗 MPO 抗体可激活中性粒细胞导致脱颗粒反应，使大量的蛋白水解酶活化，造成血管炎症。1.ANCA 的检测方法（1）IIF 检测法：用于总 ANCA 检测，以酒精或甲醛固定中性粒细胞于载玻片上作为抗原。cANCA：在整个胞质呈现出弥散的细颗粒荧光，分叶核之间荧光增强。pANCA：在乙醇固定底物片中呈现核周染色；在甲醛固定的中性粒细胞底物片中仍呈现胞质着染的荧光图形。（2）ELISA 法：常用来进行特异性 ANCA 检测。用纯化的特异性中性粒细胞胞浆抗原包被固相反应板，可检出抗特异
28、性中性粒细胞胞浆抗体。2.ANCA 的临床应用 ANCA 被认为是原发性小血管炎的特异性血清标志物。ANCA 检测是原发性小血管炎患者诊断、疗效观察、病情活动和复发的一项重要指标。最常见的疾病如韦格纳肉芽肿（WG）、原发性局灶节段坏死性肾小球肾炎（IFSNGN）、新月型肾小球肾炎（NCGN）、结节性多动脉炎（PAN）等均可检出 ANCA。WG 的 cANCA 阳性率可高达 90%，抗 PR3 抗体阳性是诊断 WG 的特异性指标。在坏死性或新月型肾小球肾炎患者，ANCA 的阳性率可达 80%，pANCA 对应的特异性抗原主要为 MPO。ANCA 的检测可大大提高肾血管炎的早期诊断率。（二）抗磷脂
29、抗体（APLA） 抗磷脂抗体是针对一组含有磷脂结构抗原物质的自身抗体。这些抗体主要包括抗心磷脂抗体（ACLA）、抗磷脂酸抗体（APAA）和抗磷脂酰丝氨酸抗体等。APL 抗体以 IgG 型最为常见，IgM 型次之。抗心磷脂抗体的特异性最强，与自身免疫性疾病和抗磷脂综合征的关系均较密切。1.抗心磷脂抗体的检测 最常用 ELISA 法进行检测。2.抗心磷脂抗体的临床应用 ACL 抗体阳性或持续升高与患者的动静脉血栓形成、血小板减少、反复自第 7 页 共 10 页发性流产及神经系统损伤为特征的多系统受累的抗磷脂综合征（APS）密切相关。ACL 抗体在 SLE 患者中阳性检出率很高，总阳性率可达 70%
30、80%，IgG 型可达 50%60%，IgM 型可达40%50%。ACL 抗体在 RA 患者中的阳性率可达 33%49%，幼年型 RA 患者可达 42%59%，ACL 抗体检测是了解疾病进展及是否伴发 APS 的实验室指标。在急性脑血管病患者中高水平的 IgG 型 ACL 抗体是预后不良的危险信号，ACL 抗体水平降低，病情好转；复发性脑梗死患者血清中 ACL 抗体水平高于原发性脑梗死患者，ACL 抗体阳性是脑出血及脑梗死的危险因素。非自身免疫性疾病患者，ACL 抗体与反复自然流产和胎儿发育迟缓有一定相关性。五、RA 相关自身抗体的检测与应用（一）类风湿因子（RF） RF 是一种抗人或动物 I
31、gG 分子 Fc 片段抗原决定簇的抗体，是以变性 IgG 为靶抗原的自身抗体。RF 主要为 IgM，也有 IgG 和 IgA，易与体内变性的 IgG 结合形成 IC 活化补体，或被吞噬细胞吞噬。吞噬细胞释放的炎性介质，致组织炎性损伤，可使患者发生骨关节炎及血管炎。1.检测方法（1）胶乳颗粒凝集实验：这是检测 IgM 型 RF 的常用方法，只能定性或半定量，灵敏度和特异性均不高。（2）速率散射比浊法：只能检测 IgM 型，准确、快速、准确、敏感，能定量，逐渐替代胶乳凝集法。（3）ELISA 法：可测定不同 Ig 类型的 RF，以聚合的兔 IgG 作为抗原包被固相载体，与待测样品中 RF结合，然后
32、分别加入有酶标记的抗人 IgG、IgA、IgM 抗体，待反应后，加入酶作用底物显色。2.临床应用 高效价 RF 阳性支持对早期 RA 的诊断，在 RA 患者，RF 的效价与患者的临床表现呈正相关，即随症状加重而效价升高。但 RF 对 RA 患者并不具有严格特异性，RF 阳性不能作为诊断 RA 的唯一标准。尽管在多种疾病中可有 RF 阳性，但效价均较低（40IU/ml）。RF 阴性不能排除 RA 的诊断，因有部分 RA 患者可一直呈血清 RF 阴性，这类患者关节滑膜炎轻微，很少发展为关节外的类风湿性疾病。（二）抗角蛋白抗体（AKA）AKA 主要见于类风湿关节炎患者。1.AKA 的检测 常采用间接
33、免疫荧光分析法，以大鼠食管中段黏膜组织切片作为反应基质。2.AKA 的临床应用 由于 AKA 的出现常可先于疾病的临床表现，因此 AKA 对于早期诊断 RA 具有重要的临床意义。AKA 是判断 RA 预后的一个标志性抗体，特别是高效价 AKA 的 RA 患者，常提示疾病较为严重。AKA 的敏感性较低，AKA 阴性不能排除 RA 的诊断，AKA 与 RF 很少平行出现，AKA 阳性者 RF 可为阴性，而RF 阳性且高效价者，AKA 亦可为阴性。（三）抗环瓜氨酸肽抗体（anti-CCP）近年的研究发现丝集蛋白中的稀有氨基酸-瓜氨酸是丝集蛋白主要的抗原表位，用合成的环瓜氨酸肽作为 ELISA 方法的
34、抗原基质检测抗 CCP 抗体，其敏感性可达到 80%，抗 CCP 抗体是诊断 RA 的一个高度特异性新指标。1.抗 CCP 抗体的检测 目前最常用的方法为 ELISA 法。半定量和定量检测。2.抗 CCP 抗体的临床应用 抗 CCP 抗体主要为 IgG 类抗体，对 RA 的特异性为 96%，用于疾病的早期诊断。六、自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用第 8 页 共 10 页（一）抗平滑肌抗体（ASMA）ASMA 是自身免疫性肝炎的血清学标志抗体。在该疾病患者中 ASMA 的阳性检出率可达 90%。高效价的ASMA(大于 1：1000)对诊断自身免疫性肝炎的特异性可达 100%。1.ASMA
35、的检测 主要采用间接免疫荧光分析，以大鼠的胃、肾或肝组织或猴肝组织作为基质片，ASMA主要以平滑肌微丝中的肌动蛋白（actin）为靶抗原。2.ASMA 的临床应用 在自身免疫性肝炎患者，ASMA 主要为 IgG 型。而在原发性胆汁性肝硬化与自身免疫性肝炎重叠时，常以 IgG 和 IgM 型 ASMA 同时出现。该抗体的检测有助于自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化的诊断及与其他肝脏疾病的鉴别诊断。（二）抗线粒体抗体（AMA）原发性胆汁性肝硬化（PBC）是以肝内胆管进行性破坏为主要病变的自身免疫性疾病。抗线粒体抗体的 M2 型是协助诊断原发性胆汁性肝硬化的特异性自身抗体。1.AMA 的检测 间接免
36、疫荧光法检测抗线粒体抗体，采用 HEp2 细胞作为基质，抗线粒体抗体阳性者在细胞质内可见到较粗的颗粒型荧光。采用免疫斑点法检测 AMA-M2 型抗体，具有更高的特异性。2.AMA 的临床应：抗线粒体抗体的 M2 型在原发性胆汁性肝硬化患者中具有极高的敏感性和特异性。七、桥本甲状腺炎相关自身抗体的检测与应用患者常可出现抗甲状腺球蛋白抗体（ATGA）及抗甲状腺微粒体抗体（TMA）阳性，但这些抗体不是造成桥本甲状腺炎的直接原因。八、神经系统自身免疫性相关自身抗体的检测与应用（一）抗乙酰胆碱受体（AChR）1.抗 AChR 抗体的检测 常用 ELISA 法进行检测。对于重症肌无力（MG）的诊断具有特异
37、性。抗 AChR抗体效价与临床病情轻重无相关性。2.抗 StrAb 的检测 主要采用间接免疫荧光法，灵长类动物骨骼肌冷冻切片作为反应基质。（二）抗骨骼肌抗体（StrAb）StrAb 常见于年龄大于 60 岁的重症肌无力患者（55%）及成年后发病的重症肌无力患者（30%），较少见于小于 20 岁的重症肌无力患者。第五节 自身抗体检测的临床应用一、自身抗体检测的一般原则通常以抗核抗体作为筛查试验，因为在许多自身免疫性疾病中，抗核抗体均可呈阳性，而其他针对特异性靶抗原成分的自身抗体应根据临床需要进行选择性检测，以进一步明确诊断。二、实验室方法的选择及结果的确认对于自身抗体检测，应首选间接免疫荧光分析
38、法。当需对自身抗体进行进一步的抗原特异性区分时，则可选择 ELISA 法、Western 印迹法或对流免疫电泳及免疫双扩散法。第六节 自身免疫性疾病的相关实验检测在自身免疫病患者体内，因有多种自身抗原的存在，自身抗体的种类也可有交叉重叠现象。一、免疫球蛋白和补体检测及临床意义（一）免疫球蛋白检测的意义 自身免疫性疾病患者产生大量自身抗体，故血清中免疫球蛋白含量往第 9 页 共 10 页往高于正常值。其中 IgG 升高较明显。免疫球蛋白含量的波动，与疾病的活动与稳定呈一定的相关性。（二）补体检测的意义在以、型超敏反应机制发生的自身免疫性疾病中，补体在疾病活跃期被消耗，检测其总补体活性（CH50）
39、及单一补体含量均可呈明显降低。当疾病处于缓解期，补体含量又可逐渐恢复正常。检测补体含量的变化对了解疾病的进展和治疗效果具有重要意义。由致敏 T 细胞引起的自身免疫性损伤疾病，补体不参与发病，故这类患者血清补体含量无明显变化。二、淋巴细胞检测及临床意义淋巴细胞亚群的数量与功能的改变是介导免疫病理损伤的重要因素。检测淋巴细胞亚群数量及功能可反映出患者体内免疫细胞状况，可为临床治疗提供参考指标。三、细胞因子检测及临床意义在自身免疫性疾病患者体内 T 细胞亚群的平衡失控会导致许多细胞因子的活化表达异常，这些异常表达的细胞因子在介导免疫病理损伤中起重要作用。四、循环免疫复合物检测及临床意义免疫复合物沉积
40、可引起一系列病理生理反应，形成免疫复合物病。因此检测体内免疫复合物，对某些疾病的诊断、病情演变、发病机制的探讨、疗效观察和预后判断等具有重要意义。关于类风湿因子（RF）正确的是A.RF 是一种以 IgG 为靶抗原的自身抗体B.RF 是一种以变性 IgG 为靶抗原的自身抗体C.RF 有种属特异性D.RF 与天然 IgG 结合能力较强E.RF 只有 IgG 型正确答案B答案解析RF 是一种以变性 IgG 为靶抗原的自身抗体。关于抗核抗体，以下说法错误的是A.是一种广泛存在的自身抗体B.其性质主要是 IgAC.无器官特异性和种属特异性D.主要存在于血清中E.抗核抗体可出现于多种自身免疫疾病正确答案B
41、答案解析抗核抗体的性质主要是 IgG。下列物质在机体中异位后，不会刺激机体产生自身抗体的是A.晶状体蛋白B.精子C.甲状腺球蛋白D.皮肤E.葡萄膜正确答案D答案解析体内某些组织成分，如精子、眼内容物、脑等，在正常情况下从未与免疫细胞接触过。因第 10 页 共 10 页手术、外伤、感染等原因破坏隔绝屏障，便与免疫系统接触。如自身免疫性交感性眼炎。乳胶凝集试验可检测类风湿因子的型别是A.IgG 型B.IgA 型C.IgM 型D.IgE 型E.IgD 型正确答案C答案解析乳胶颗粒凝集实验：这是检测 IgM 型 RF 的常用方法，只能定性或半定量，灵敏度和特异性均不高。免疫荧光法检测 ANA，抗体核型不包括A.周边型B.均质型C.斑点型D.核仁型E.核孔型正确答案E答案解析常见的 ANA 荧光图形有均质型、斑点型、核膜型（又称周边型）和核仁型。有关类风湿性关节炎的特性，错误的是A.关节病变为主的慢性 AIDB.多发生于青壮年，女多于男C.部分患者心、肺、血管受损害D.血清中 IgG、IgA、IgM 下降E.血清中可检出类风湿因子正确答案D答案解析类风湿性关节炎血清中自身抗体的含量升高。
