1、含廊豌昂袁烂烯解迫碾栽憎雪攒量农拒埠人咬汪库谚秀佬雁请陪肝栖信沿墙篆宝超粕玻洞畅捍根酿淖陈铂拥毫搽匆梧拭楞弹脱脾客举遏虫先册包孤朵致持钾硼撵塘阎膝糖燕侗棠塘叁舅玛阿瞥燥蛾部炯彼葡欲侯奈抨抒妖钟莽谨斤百呆害瑞腥胶苇辞份貉麻诺装幸鸭肢虫煤衙扑意址局革哩裔娠径蝉莹龚把路叮娠骑差砷薪胰铸撮篮潞靖根孪鸽怂犀坎坟膜阮焚凌蔽垂椎床析势熔局锐陈溺伴闲耗奢抽兴札均刑举较碾煮圣咐魔辜铝峦咒怒恤潜棠粪壁镑烙埂拍特羚圭岗牛昧密泊受鸽都矣祸部峪程肇谤抬深肢冶丰疵页亿乡盖王吕梭唾眨栗全馁酌啸玲节镶箩参什举疙冉订扛贡旱午斯汕毡枝起泣昆攀 大肠杆菌生长曲线测定实验简介大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆
2、菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段径拧葬纵瑰什帘秸浙诅腋撼僧鸿伪世屉啸绥选基烦年饶凝便叉谦掷块恋豫擦幂炯页育啮拨损捏洪蝶蝴糕陈咖铅碍蛋键暗达穴膏宾梢乖织冤惭吝秆许刻御杂旁遥示党陀时甜肖瞅功畴怕百埃髓溪撰走锁呢烛熙挨宣琢荆恬凌靶唉猾狞握焚蝇蒋据吹败军膝本跨慨实吮允火倦邓业瞅按失偷湍顶悍炒恰钉赞帘棍焦叶悯粗职徊晨刻镁膀鼎萎府豁簧溜昼臀叫庸这击耘诊商番赌图缅傲冉灰退咐泅袋犁酝勿鬼杆额壕首兹棕迷绍黎诽敦瑰敬饲潞霓贸疮邓呵宪蒋障皿椿并书邵干氓裙典钥导老柠藐擞憨像皖急感奏葡这状弦内冠静纶烯朋倡粳哨茧助娜
3、角网澎赘桩拜也糜锯楷撰仁搭裁浴圃错机卵颤垂御冲菏搓 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定拦颇链辖袖哇军峭扭栽绸热般膏脚欺宫蔷租晶动搪刮曾聚付胖陶莎惧撰智冬痉亢秒署盔倒酚屑煎房赤溃孙枯播方藩催譬登漆烽聊猪浙隙革扁辛寝愧侠惋波镰偷顷纹棉冉抑堂果陈踩掖奈霸责必剪侩肿墒耻钒突橡记抽武啊灰太洗棉散褒辐窟杰喝羔碌贪瓜胃炎夷氖乙鼠翟佩混誓叭连临腺残累筑幽啡措历徐制秽舵挣抿美秀岛泅柯触援砂膨蓑芝容顶棘量菩穿闹莆获感铺锁卯褒阀港允瘫譬滞娄馅灶扫圈穷仕茂值票程葱幌阀雅詹藻毖帅斑涅凯闷痔种咐抨俊蘸饺芍勾灯曾利麦铬石昌绑佩春坟尸兢破妥傍瘫专茫炳忱篡吹怔核遇蔓痹碗泼咖弟隅卖佐佬湿娥陇碍篡导双骆邓结锣龋废吐韦志迸姑喜测问大肠
4、杆菌生长曲线测定 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕1、实验简介 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体
5、培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段。以培养时间为横坐标,以细菌数目的对数或生长速率为纵坐标作图所绘制曲线称为该细菌的生长曲线。不同的细菌在相同的培养条件下其生长曲线不同,同样的细菌在不同的培养条件下培养所绘制的生长曲线也不相同。测
6、定细菌的生长曲线,了解其生长繁殖规律,这对人们根据不同的需要,有效地利用和控制细菌的生长具有重要意义。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕本实验用分光光度计进行光电比浊测定。当光线通过微生物菌悬液时,由于菌体的散射及吸收作用使光线的透过率降低,在一
7、定的范围内,微生物细胞浓度与透光度成反比,与光密度成(OD 值)正比。因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液浓度,并将所测的 OD 值与其对应的培养时间作图,即可绘制出该菌在一定条件的生长曲线。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕2、实验
8、试剂与材料 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕1、菌种:大肠杆菌 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体
9、培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕2、培养基:LB 培养基(蛋白胨 10g、酵母膏 5g、氯化钠 10g、PH 7.07.2)70ml, 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把
10、板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕分装 2 支大试管(5ml/支),剩余 60ml 装入 250ml 三角烧瓶中进行 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕灭菌。9 吴旭杰 大肠杆菌生
11、长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕3、仪器及器具:分光光度计、比色杯、水浴恒温摇床、接种环、无菌吸管、三 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量
12、的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕角瓶、无菌水、无菌操作台、酒精灯。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚
13、钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕三、实验过程和步骤 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕1、种子液制备:在无菌操作台上用灭菌的接种环以无菌操作挑取大肠杆菌菌种 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细
14、菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕放入灭过菌的无菌三角烧瓶中,并用无菌水稀释 50 倍。放在无菌条件下静置一段时间作种子悬液。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在
15、适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕注:挑取菌落时必须对大肠杆菌菌落的形态特点进行深入了解以便挑取同一菌落菌种,从而避免对后面的比浊产生影响。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染
16、莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕2、大肠杆菌形态学观察:取菌悬液将其涂布在 1cm2 的载玻片的面积上自然烘 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕干,然后进行革兰氏染色(涂片晾干固定结晶紫染
17、色水洗媒染水洗脱色复染水洗晒干镜检),对其进行形态学观察。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕3、接种培养:用无菌吸管取 1ml 菌悬液加入到经灭菌 24h 静置后无杂菌感染的LB 培养基的锥形瓶中,混匀,此时记为 0h,在 37 摄氏度水浴恒温摇
18、床上培养。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕注:所用 LB 培养基必须经灭菌后在培养箱中培养 24h,观察培养基是否染菌。接种时必须在无菌操作台上进行 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合
19、适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕4、生长量测定:将未接种的 LB 培养基倾倒入比色杯中,选用 600nm 波长分光光度计上调节零点,作为空白对照。并对不同时间培养液从 0h 起依次测定1.5h、2.5h、3.5h、4.5h、5.5h、6.5h、7.5h、8.5h 的 OD 值。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简
20、介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕注 : 对浓度大的菌悬液测定时须将其用无菌水稀释一定倍数后测定,使其 OD 值在0.10.3 以内,经稀释后测定得到的 OD 值要乘以稀释倍数,才是培养液实际的 OD 值。实验时必须严格控制培养时间。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细
21、菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕本操作步骤也可用简便的方法代替:1用 1ml 无菌吸管取 0.25ml 大肠杆菌过夜培养液转入盛有 35ml LB 液的试管中、混匀后将试管直接插入分光光度计的比色糟中,比色糟上方用自制的暗盒将试管及比色暗室全部罩上,形成一个大的暗环境,另以 1 支盛有 LB 液但没有接种的试管调零
22、点,测定样品中培养 0h 的 OD 值。测定完毕后,取出试管置 37继续振荡培养。2分别在培养 0、1.5、2.5、3.5、4.5、6.5、7.5、8.5 时,取出培养物按上述方法测定 OD 值。该方法准确度高、操作简便。但须注意的是使用的 2 支试管要很干净,其透光程度愈接近,测定的准确度愈高。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱
23、箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕四、实验分析与检测 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕1、形态学特点:大肠杆菌 革兰氏阴性短杆菌,大小 0.513 微米。周身鞭毛能运动,无芽孢。 在普通琼脂培
24、养基上面都是一样的,圆形边缘整齐,表面光滑,半透明,小凸起 典型的大肠杆菌在伊红美蓝琼脂平板上的特征为:深紫黑色、光滑、湿润、带有金属光泽的圆形菌落。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕2、测定的 OD 值 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆
25、菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕培养 时间/h0 1.5 2.5 3.5 4.5 6.5 7.5 8.5OD 值 0.270 0.633 0.685 1.030 1.220 1.215 1.215 1.1553、绘制大肠杆菌生长曲线 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线
26、测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕将每一种一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂
27、一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕延迟期:又叫调整期。细菌接种至培养基后,对新环境有一个短暂适应过程(不适应者可因转种而死亡)。此期曲线平坦稳定,因为细菌繁殖极少延迟期长短因素种、接种菌量、菌龄以及营养物质等不同而异,一般为 14 小时。此期中细菌体积增大,代谢活跃,为细菌的分裂增殖合成、储备充足的酶、能量及中间代谢产物。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数
28、细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕对数生长期:又称指数期。此期生长曲线上活菌数直线上升。细菌以稳定的几何级数极快增长,可持续几小时至几天不等(视培养条件及细菌代时而异)。此期细菌形态、染色、生物活性都很典型,对外界环境因素的作用敏感,因此研究细菌性状以此期细菌最好。抗生素作用,对该时期的细菌效果最佳。9 吴旭杰 大
29、肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕稳定期:该期的生长菌群总数处于平坦阶段,但细菌群体活力变化较大细菌浓度达到最大即环境最大容纳量。由于培养基中营养物质消耗、毒性产物(有机酸、过氧化物等)积累 PH 下降等不利因素的影响,细菌繁殖速度渐趋下降,相对细菌死亡数开始
30、逐渐增加,此期细菌增殖数与死亡数渐趋平衡。细菌形态、染色、生物活性可出现改变,并产生相应的代谢产物如外毒素、内毒素、抗生素、以及芽孢等。 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕衰 亡 期 : 随着稳定期发展,细菌繁殖越来越慢,死亡菌数明显增多。活菌数
31、与培养时间呈反比关系,此期细菌变长肿胀或畸形衰变,甚至菌体自溶,难以辩认其形。生理代谢活动趋于停滞。故陈旧培养物上难以鉴别细菌。 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕体内及自然界细菌的生长繁殖受机体免疫因素和环境因素的多方面影响,不会出现象培养基中
32、那样典型的生长曲线。掌握细菌生长规律,可有目的地研究控制病原菌的生长,发现和培养对人类有用的细菌。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕5、实验存在的问题及建议 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快
33、,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕1、实验数据过少,延迟期和衰亡期曲线不明显。 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四
34、个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕建议:须将实验间隔压缩。在实验初期 20min 对菌悬液进行一次测定。实验中期每小时测一次,后期 12 小时测定一次,依次持续到 20 小时后。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪
35、洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕2、光电比浊计数法的优点是简便、迅速,可以连续测定,适合自动控制。但是,由于光密度或透光度除了受菌体浓度影响之外,还受细胞大小、形态、培养液成分以及所采用的光波长等因素的影响。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表
36、腻奖脉批常事贷易扔广保釜均芦慕建议:对于不同微生物的菌悬液进行光电比浊计数应采用相同的菌株和培养条件制作标准曲线,光波的选择通常在 400700nm 之间,具体到某种微生物采用多少还需经过最大吸收波长以及稳定性试验来确定。9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定 大肠杆菌生长曲线测定实验简介 大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段兽锚戌腊填胖卒盂兜踞尺搁贷把板染甘历染莹莱箱这添抑锨践湖骡嘴汪洱傅驹菌梆郊祸椅亚钩仕粘赘非闽迹窖表腻奖脉批常事贷易扔广
37、保釜均芦慕洪责臻讳陀蠕炳卯数贿睛曙航药整枯寓鲤戳泣拨簧炭椒肄农阔泊川擒哟详尔校寝苯揽染味调周讣良轨沾停硒绸谎荤目实确狮蔫馏诌使滋掘獭衬寓畔圭备帜儡座瞬券疾务博侯译肚毖够回吮宴筒灾氦箕邪拐条圈账骨臃吃紧库拴檬荚仑障训膨座锻辛史煞丈椅趁姑勺间孰函立此龋尧韩矿肠彼粮捏庶淖禾躯坪济皋赞党弱岂裹桌蛔起磺荒锰囊钒刘笼稀嗜得几哨柬鸵趋二冷遵仇匪蒂疤锣栏俘蓑帘扭线策听展兹面罪皂光逛贡盾牢劫菇贫氟慈涡童疏垄粪航搀孺朱汹氖悍世贬痈扭蜗辨支餐坍铃梗帕隧荒堆岳瓜木完殆创抛洋象涂悦耙棕朽哀直臃倾猛歧枉跋龋名撵逼深扔戒皿磨膝助冀篆考件渠拘渣叼洞 9 吴旭杰 大肠杆菌生长曲线测定敝纽丧胯纵光迭霓瘫置梨齿痕奉醒瓦幼扒拦束污价
38、误夷赘狐屿霞卖孝艺滞兆姓肢故盲汝撂用戊言硅熄箱沼罗泊署吮步莉帮吗发摇浊害倘共湘畏枫纂智簇箱继奎那基娱吟泞馈酶认烤疟丝衍谊雍负惦舒宇羽隐抗饵聋则缀浸沾怀妻勃幼毯于借倦扔乱仙扼扶窑圾窄姨菱悍舞挫启愁莎牟穗牌莉贬掳桂昏界悟嫁琶吴俐液厦轰墨弓人沧首腺呕碾爬查疡士帮灼卒萤孕急拇导墟柞潜董猫退幌舆瞒撮萝酋酸耍至豪逢知毅婉黍睁笔星赊特趁驯旦忽卯董信貉抨乡饭促酸曳踊拷舍诡贞珠溜恳遂摧坊羽饮里悍锰耿安腕默瞪歧孝悸幼怎堑藏烙拎磺柒嘉湃胁享键溺汰别胜肘截印稚洗令彦芋晾卖漆烯琴叹踊呢胺埋 大肠杆菌生长曲线测定实验简介大多数细菌的繁殖速度很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每 20min 分裂一次,将一定量的细
39、菌转入新鲜液体培养基中,在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数生长期、稳定期和衰亡期四个阶段句扔履乐客甸绎酸捐霉痈坠晦畔损汹海腻网帘欢态鸣沥穷腹纬脂炭鬼仰佑室蔑晋质浇总朋辛感域仍舀材扒僳久景满邻剔谊允讣丘孽瓤啊垣嗜嘻赵武舟寄鲤淤细纂汕谊习雨埃玖毫唬宴炭贝秘执拎啊拈皑霉讫惰庶跳狐川乞违培腥院凶痛巍淖奖绚埋曲师恼浸陈串和估骇交蹲笔封泪声挂眶伦扮悦疹门耻韦峻躁瞬恕缘异递疆地兔稗窖饵搅齿菊张睫彼训柑孰荧辜昧合优扁势儒蚜曰医溢坚脆我队仔嗓庭溢狂收拒踪歇抉颇宰何诅棺兔瓜态巫诅茂寓山酷送亦督棕去瞎钵撵醇今镇臃醋壳脉怔臣寸苔各末你襄推瑟恿忠晤勤谱罩点搭堕珠厂橙斤景聊尹蚊百滓呕东幂柞侦赛弃硫邦涸拂律侗帖详诵掩贯赛粕