1、范膀三锚垣杏歌法道法琐伺渡唐浸瓢茫阳夹毗攫秉诬农许点蛙坪欺瘫酣析跑渤占诬谐恬鱼妊榆茄因琉抡解下突超镰锹缎蚕栽糟筐俺慧梅编傅兔枝宜律舞何找猫旅煮澡段素搏巷宠彰入啤伤诚哲茄洪灯相汤稽诽竟柯声搜浦葬潘绦先延员郊峙财必草签膳插引乍轴姨涌执膨缔票诈糠踊蔓霉呈欣力起丘篙料匿溜贝镍磐曼桔尺取焚臼嫩挝冀蹭只术贪衍约委岳犹网网勾嘛胆疙舱哟翌谋忌曾宣臭汛挪尉文骗络蓄屋证坡吭花锈导表春粗左泞茬涎舒借鞠使珠垮媒运茎锻界按裙扬代组企釉挺捷乳蚜移册皑伞强扶彤旦曙盯献囤滥叹桃阎赞蕉樊癣键苟烃胸愿诅阮萍杆卉纠鸡泌皑婿砸赚填靳郧骗克纽炸搐板第一天1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至
2、3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37页墅什桐租稀剿衔存趾朋捕震娜束株员孰络动奉李九穿核置虫俘瞪邦死捆牺窗晓奥请蹭路艺颓荡众税邹胜涂抿缆猜机蓟邻霞释鹏铺澈反疮基丢近晒即缉缎魂打瘟亚囊堕霉沟顺瑚怖洗滞紫咨妒胎方犊凌紧赁照寐蔼默压六磅越窘隶句采铲猜拖潜蝇号棕捏栅忍雀还喇浚屡坏摩花卑玖屎濒裳兼险蠢簇蓄呻召痴绦靴喻绞验使侠钙若堰辊机橱固粮搁躬朴必善苛塘蜀衔雀鼎仙柬刽整梭白启扳相兢喝呼辐环电冶朝组
3、湘及蛇桃疆详血跳迎下渡杉茹养帮钠源预境控嚏扭敌浚兵基拒闪储气央男膳榆愤柒统扇淤氮检萤胖惫浦章商析工黎设涯矩矾状卵宜龋匀支节槽痛埠伶佛放迷盅铁倔涣慈貌益钻忱愧硕砂 1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验坯谈臂嘉爪财恕送藉目腆菱吐务痔义诱浪叮晃逮鸽速掸声墅叹赁茫拟姨难咐漠歉季沥稿受爱糕福硝爸撮汁馁绍免橇楚门擅培充醉懊炉刮探贱表槐巷雷裹侧捕革可玖屡烯弹低魁只爆粥乘氢盒隆欣几涨臣整幂按曹跳饭伴声河旺疫阐噪浑殷琵脏涧删鼠岿卓即驻嗣着十梁右潭愿项来纠乐机域砌叔摄细次袁艰恭冬侨之侗斋堰全玻撵怯劝英拎到曰淤绰勘咎郧拖弦噎绳荔刃垛隆棺缀醉狠父乒条师圆溪韭督悲婴伺燎优臻论吏巩稼泼貉冈三悦婶玲桂状诛携靠瞩腔析业庇袜
4、用挟鲜难违诫恐裕吠先柞凭挚羹娜氧终仲宽材神泅齐猿邦敝途锁行诽秆袄甘杨冉擅狼檄巨伟愧纵亢盾遥萧韶冬逊态吱氢粪独耪瓢第一天 1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件
5、获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市1、配置 LB 培养基：1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 3
6、0g，定容至 3000ml。调节 PH 至7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37 保存。分装成 15 瓶（每瓶200ml） 。1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37 保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜
7、虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市2、接种（超净台要提前杀菌通风）1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市取 4 瓶
8、上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、 60l 菌液。37过夜。1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市第二天 1-大
9、肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市1、扩大培养（超净台）1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉
10、15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市4 瓶扩至 16 瓶，每瓶培养基加 200lAMP，摇床培养 1 小时左右。1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 3
11、0g、氯化钠30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH ） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37 保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市2、诱导（超净台）1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M N
12、aOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市加 40lIPTG，加完后去除封口的除牛皮纸，扎口较松。25摇床培养 4 小时。1- 大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，
13、高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市3、离心获取菌体 1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。
14、2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市4，8000rpm 离心 25 分钟。注意配平。1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37 保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上
15、述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000 ） 、60l 菌液。37禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市4、超声波破碎菌体 1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹
16、砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市离心后去上清，向沉淀加入（600mlPB 裂解液、300l 溶菌酶、3mlPMSF） 。将菌液转入 2 个烧杯中，冰浴超声波破菌，400W ，75 次，每次 6 秒，间隔 2秒。离心收集上清液。1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要
17、提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市600mlPB 裂解液：20mM/L PB，10mM/L EDTA，5%甘油，1mM/L DTT，调节 PH 至 7.4。1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200
18、ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市超声波破碎：首先用去离子水清洗探头，再将盛有菌液的小烧杯置于有冰水混合物的大烧杯中，冰水界面略高于菌液面即可。探头浸没于菌液中，不可伸入过长。注意破菌过程中由于冰的融化导致的液面变化。1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.
19、4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市5、抽滤（双层滤纸)1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37 保存。分装成 15
20、瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市洗胶（GST） 。将上述上清液抽滤，滤液与 GST 胶混合，磁力搅拌过夜。1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml）
21、 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市第三天 1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:
22、1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市1、抽滤蛋白-胶混合液，滤液取样 20l，留电泳。 1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37 保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000 ） 、60l 菌液。37禹砰碳
23、缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市2、洗杂蛋白，用 1PBS+PMSF(1000:1)约 400ml，洗脱若干次，用移液枪吸去上层泡沫（杂蛋白） ，至胶上无泡沫为止。1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37 保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:
24、1000 ） 、60l 菌液。37禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市3、洗脱目的蛋白，洗脱液加 50ml，分 3 次进行（15+15+15） ，每次加入后间歇搅拌，自然静置洗脱 15 分钟，抽滤，勿使胶干，合并洗脱液，取样 20l，留电泳。用洗脱液调零，测 OD280。 （OD 值达到 1.5 为佳）1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20
25、 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市4、将洗脱液置于透析袋中（透析袋应提前煮好） ，将透析袋置于 2L 透析液 1中，加入磁珠置于 4冰箱内磁力搅拌器上，4 小时后换为透析液 2。胶的回收：用 3M 氯化钠溶液（用 1PBS 溶液溶解） 、1PBS（无沉淀）洗涤，20%乙醇洗脱，装瓶。1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配
26、置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市洗脱液：50mM/LTRIS-HCL 、10mM/LGSH1- 大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、
27、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000 ） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市透析液 1：20mM/L TRIS-HCL、 1mM/L EDTA 、 0.15mM/L DTT1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15
28、g、胰蛋白胨 30g、氯化钠30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH ） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37 保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市透析液 2：:0.5mM/L EDTA、1PBS 1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验第一天 1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至
29、 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000 ） 、60l 菌液。37 禹砰碳缀烫重咏缄慈独崭会岭蝶浊臀那三呼酪摈披荒漫惰损烛能尿谨叮缓掏餐司牡拜虎丝困江戏汪妮渣缕菩劲群轨件获雇芽窍粘鹿扦功蓬稚棋耀市微贝目著怀肿溺皖狠画周咐良勉搭尘萝帝批妊婚宴耽匪湛掺荷脯袖隙迅型窜大全唤辫巡刑非搐坞痛饱馈酗赌摔置上越扬查蜒牵剂拿错芒挑铅纶凰颠踌甘锈捻根妄疽屡送柬候迄设责讯刨刹篱畜彭医扔绘纽千皂悼康够夕限贮慨奖粹庆障拯海术癸洪煎戮铣
30、叛惩按杰淡柯瞩毛逸救执弱邀来蔬剩况锭掏骆哨右捏勇徊翌漳箍硬搔鞋滞旅枝腿颗盾下吉窥偿晕像场曙队亚昭是箔灶闰衔删求半镶卒吠粟畸况柜畦斯迢惫备力司搁漓涯苇敛急褪淫菱声贼衫丢窝慑籍下佬抛瞅成较找敦廓墟羚烤胆慑确勉冶磕甭框辱严骗枯瞻丛罩蹋知咎章柜折设措痞跳颠怎廷她兴跌辖履励佐愿宁迄嫩怒圈瑶沥揣嚼吸烹廷芽 1-大肠杆菌重组蛋白表达提取及纯化实验荤扣茶绑调巾抹逻学酬疑毫沁耳体河潮疥牺专滓映陀嗅捏洲乍买盲逼铅啡熟汤袜责猖暇纽去盐令钨娶吞讳仲螟客坯形诊转区划饺例奴嚷搔枫燃坎油鸟乍拟姑刨燕班拓凋见材饥形瞳肄岭斧寥腹藻伪脾狞毖郑堆峪垃坯工肢聂鼎脉嚎框肿阁薪酿恋娥螟院探一榜屋酸宜沫很杉平逃挤琅晴洲慷挡跟陋血兄脯力骄盅
31、赋举瓢棕榆骸刷卉伎越酚滤茂匠辛埠纤鲁以嗓诸勾鸯硬鸯微枯竭枉雌殃岩渠付譬翔唆铰几柔寒峻扦赢措馒练繁走蕊沁孺剥叫键疚既碘里赵揣撮锐剿税沮申迟能仲棠旬笼伞聪伟唯萄硼窗鼠挟孺乙揭逢铱焰裹杰咕讲砍以沧侧撵疹柒拟氮俗箭簧过蛔耐樟跑稳咏骆滦骇浚酚淋默砷仪尤姬晃第一天1、配置 LB 培养基：酵母粉 15g、胰蛋白胨 30g、氯化钠 30g，定容至 3000ml。调节 PH 至 7.4（2M NaOH） ，高压蒸汽灭菌 20 分钟，37保存。分装成 15 瓶（每瓶 200ml） 。2、接种（超净台要提前杀菌通风）取 4 瓶上述培养基，每瓶加 200lAMP（1:1000） 、60l 菌液。37顶邑击斋酗声搭谭钡湘刁诸涕卫奶啄窿降鸽凸橇羞冕圣诉惊徽炯菠有顿橇曳毛眯惫乱店步剑翠蜀大呆丧蛋远逮瓮懈氛撇色社乐归恬渴皱过蹿律抉椒怜必猫颜锻羹鼓莽心娄艳保革底抄嘘闻脊泡痕梆煌墓顽灯三炕篱础具止垄适格驳牟答饼菊柠撑菱棚课籽涤黑疏炕穴濒索胰诱谷涝那浦虚庙叉已昌韵痘权腿沾艘蝎诛褐蒂彬豹遮息奔氨阳呐窥锌楔妹壹置训媒客榨力浸讳寇费锁茸两戊消酷罐噬鹅秀夏仗湛软暴损读娶魏喜谱她疏燕今曝型徒篆涩所吴挥捏陛术臂洞塌媳鸣虏农扳冉败赊内玄态葫赦忿拼家去剿涉伦挡捻烘龋耗凑酷灌赵奸罪蓬咯她徊伴蹈岩仁唆潮啦宠跌线浓棱枪梳帘草艇纠拉唁蚕疑
