1、第二章贝类繁殖原理,第一节 贝类的繁殖 第二节 贝类的性腺发育与生殖周期 第三节 生殖细胞的发生 第四节 受精 第五节 胚胎发育的生物学 第六节 贝类幼虫发育生物学 第七节 贝类幼虫的附着变态,贝类苗种人工繁育研究历史与现状,1.牡蛎人工繁育（50年代开始育苗研究） 2.珍珠贝类人工繁育（1965年首次育苗成功） 3.贻贝人工繁育（1973突破苗种关） 4.扇贝人工繁育（1976华贵栉孔扇贝、栉孔扇贝70年代、海湾扇贝80年代、墨西哥扇贝90年代） 5.鲍鱼人工繁育（1971杂色鲍、1973皱纹盘鲍育苗成功） 6.东风螺人工繁育（2000年方斑东风螺育苗成功） 7.其它种类：泥蚶、缢蛏、文蛤、
2、青蛤、施氏獭蛤、西施舌、象拔蚌、菲律宾蛤仔、砗磲、硬壳蛤、红螺、竹蛏、古蚶、长肋日月贝、黄边糙鸟蛤、马蹄螺、乌贼、河蚌等。,第一章 贝类的繁殖,第一节 性别、性比和性变 第二节 性成熟年龄和繁殖季节 第三节 繁殖方式 第四节 产卵的特殊环境与卵群 第五节 产卵量,一.雌雄异体性别判断 腹足类:雄性具交接器突起; 有的种类雌雄大小不一; 性腺颜色加以区别。 瓣鳃类: 有的种类雌雄大小不一; 有的两性壳形不一样; 不少种类只能从性腺颜色区别。 雌雄颜色一样的,可取少量生殖细胞判断。 头足类: 雌雄个体大小不一; 雌雄颜色不同; 多数雄性有1个或1对茎化为交接用的生殖腕。,第一节 性别、性比和性变,
3、雌雄异体瓣鳃类精巢、卵巢颜色,第一节 性别、性比和性变,二、雌雄同体 腹足纲帽贝、笠贝、眼孔虫戚、天窗虫戚 瓣鳃纲海湾扇贝、无齿蚌、球蚬、鸟蛤、日月贝、砗磲、船蛆。 三、性比在雌雄异体的贝类中，两性间存在一定的比例关系，随着个体大小和年龄的增加，有雌性多于雄性的趋势。,第一节 性别、性比和性变,四、性变性变也称之为性转变，贝类中有的一部分是雌雄同体的，另一部分为雌雄异体，但是雌雄异体的性别在某些种类中不是恒定的，有从一种性别转换到另一种性别的性变现象(帆螺、船蛆、食用牡蛎)。 性变现象产生原因： 1.水温；2.代谢物质；3.营养条件；4.雄性先熟；5.寄生豆蟹 。,第二节 性成熟年龄和繁殖季节
4、,性成熟年龄贝类的性成熟年龄随着种类及其分布的纬度而不同。 生物学最小型生物学最小型即是性成熟时的最小规格。种类不同性成熟规格差别较大。贻贝壳长14.0mm;华贵栉孔扇贝壳高26.8mm；杂色鲍壳长35.0mm；皱纹盘鲍壳长43.0mm。 繁殖季节一般情况下，从开始产卵起到最后结束为止，这个时期称为该种贝的繁殖季节。,第三节 繁殖方式,体外受精和发育 交尾 自体受精 孤雌生殖 卵胎生,第三节 繁殖方式,体外受精和发育：多板类、瓣鳃类和原始腹足类缺乏交接器，亲贝将精卵排放到海水中，在海水中受精和发育。 交尾：交尾行为见于头足类和大部分的腹足类。雄体的交接器伸入雌体的交接囊中，精子与经过输卵管的卵
5、子相遇而受精。 自体受精：直接自体受精，同一生殖巢中的卵子和精子移到生殖管时结合。间接自体受精，靠阴茎伸入雌性管进行自体交配（椎实螺）。 孤雌生殖：指卵子不需要精子的参与而单独发育的象（拟黑螺 Melamoides ）。 卵胎生：卵胎生现象见于多板类和腹足类 (田螺、滨螺、黑螺、海蜗牛等),法螺交配,第四节 产卵的特殊环境与卵群,产卵环境大多数瓣鳃类精卵成熟后，由于外界环境的温度、盐度或风浪、潮汐等的理化条件变化，便可诱导其就地排放精卵，卵在海水中受精和发育。腹足类和头足类常常选择它们的产卵地点一般喜欢把卵子产在温度适宜、光线较好、氧气充足和饵料丰富的场所。 卵群 ：大部分的水生腹足类和头足类
6、，产出的卵子黏集成“卵群”。,法螺卵群,第五节 产卵量,不同贝类卵量有很大差别 种类 壳长（ ） 卵量（万粒） 杂色鲍 6.8-8.0 60-120 泥蚶 3.0 200-300 太平洋牡蛎 6.0-8.0 1000-2000 马氏珠母贝 6.0-7.0 500 大珠母贝 25 几千万粒,法螺卵囊,第二章贝类性腺发育,第一节 贝类的性腺发育与生殖周期第二节 影响贝类性腺发育的因素第三节 人工促进贝类性腺发育的方法,第二章贝类性腺发育,第一节 贝类的性腺发育与生殖周期 判断性腺发育分期的方法 肉眼观察法 组织学方法 性腺指数和肥满度作为生殖腺成熟的标志 性腺指数=性腺重量/软体部重量100%或性
7、腺指数=性腺重量/鲜贝重100%,第一节 贝类的性腺发育与生殖周期,性腺的发育分期 （以泥蚶为例、性腺肉眼判断法） 1.增殖期：性腺开始形成，在内脏团表面，主要分布于背部消化腺两侧，雌雄不可分辨。 2.生长期：性腺不断增大，并向腹面扩展，逐渐覆盖整个内脏团，雌雄不可分辨。 3.成熟期：个体开始显肥硕丰满，性腺已遮盖整个内脏团，并延伸至足基部。雌雄可以判别（雌性橘红色，雄浅黄色）。 4.排放期：排放前性腺肥硕丰满，排放后性腺饱满度明显大降，呈水泡状。 5.休止期：软体部消瘦，雌雄不能分辨。内脏团表面透明呈水泡状，看不到性腺分布。,第一节 贝类的性腺发育与生殖周期,卵巢发育的组织分期（以泥蚶为例）
8、 1.增殖期：滤泡开始沿着结缔组织逐渐形成 2.生长期：滤泡继续发育，数量明显增多，内脏团结缔组织相应减少，滤泡内卵原细胞继续分裂增殖。 3.成熟期：本期滤泡为全年最丰满。 4.排放期：自7月上旬开始，卵子大量排放。 5.休止期：成熟卵子的大量排放之后,第一节 贝类的性腺发育与生殖周期,精巢发育组织学分期（以泥蚶为例 ） 1.增殖期：滤泡开始出现，滤泡间结缔组织丰富，随水温上升，滤泡生殖上皮的生殖细胞开始增殖。 2.生长期：滤泡数量增多，体积增大，壁加厚，染色加深。 3.成熟期：本期精巢达全年最丰满阶段。 4.排放期：成熟精子大量排放阶段。 5.休止期：精子排放完之后,第二节影响贝类性腺发育的
9、因素,有效积温 贝类的性腺发育通常与有效积温密切相关，必要的有效积温是促使其成熟的一个重要因素。 饵料 饵料是贝类进行新陈代谢的物质基础，生殖腺的形成与发育都依赖于营养物质的积累，而营养物质的积累来自于饵料的质量和数量。一般混合饵料比单一饵料好。,第三节人工促进贝类性腺发育的方法,升温： 在适温范围内，温度越高，性腺发育越快，促进性腺成熟所需时间就越短。 饵料：大量适宜的饵料有利于性腺的发育，以几种单胞藻的混合投喂效果最好。 换水或流水：采用换水或流水的方法改善水质。 充气：增加水中的溶解氧，促进性腺发育。 低密度：有利于亲贝性腺发育,第二节 卵子发生的过程,增殖期：卵原细胞进入一个迅速增殖阶
10、段，细胞数目显著增加，初级卵原细胞经过一定次数的分裂，产生固定数目的次级卵原细胞。 生长期 ：卵原细胞停止分裂后，开始长大成为初级卵母细胞。其生长可分为两个阶段：即小生长期和大生长期。在小生长期,初级卵母细胞体积增大，但细胞核体积没有大变化，称卵黄发生前期；大生长期，约几周或几天，卵核增大，卵黄积累与卵细胞体积快速增大，称卵黄发生期 。 成熟期:卵母细胞完成生长期后，就进行成熟分裂，即减数分裂。形成一个成熟的卵细胞和3个极体。,第四章 受精,第一节双壳贝类卵子的形态结构 第二节受精的一般过程 第三节受精的条件和因素,第三章 生殖细胞的发生,第一节 精子发生的过程 增殖期： 由原始生殖细胞经过有
11、丝分裂形成数量很多的精原细胞 。精原细胞不断分裂，使数量增多（着生滤泡壁基底膜上）。 生长期：精原细胞经过若干次分裂后，便不再分裂增殖，而进入生长期 成为初级精母细胞（完全脱离基膜）。 成熟期：精母细胞进行两次连续的成熟分裂 ，形成了形成四个精子细胞。（第1次成熟分裂后成为2个次级精母细胞） 变态期 :精子细胞经过一系列的变态分化形成精子,第一节双壳贝类卵子的形态结构,1.卵膜（卵黄膜） 2.质膜 3.卵质 4.卵核,第一节双壳贝类卵子的形态结构,1.卵膜（卵黄膜） 卵膜是动物卵子排出卵巢后外包的无细胞结构的膜。栉孔扇贝卵子的质膜外色一层卵膜为初级卵膜，又称卵黄膜，是卵子发生过程中由卵母细胞本
12、身分泌形成的。受精后，卵膜举起成为受精膜，动物卵子的卵膜具有防止杂交的作用。 2.质膜（栉孔扇贝） 质膜即卵细胞膜，质膜与卵膜之间的空隙，为卵周隙，较狭窄，约1.8-2.5m，受精后扩大为4m左右。质膜向卵周隙中伸出许多细小触手突起，即为微绒毛，微绒毛扩大了卵母细胞与外界的接触面积。,第一节双壳贝类卵子的形态结构,3.卵质 皮层：卵子表面卵质为皮层，皮层内含数层皮小泡。 卵黄：卵黄作为未来胚胎发育营养物质，均匀分布于卵质内。 线粒体、内质网、高尔基体、多泡小体。 4.卵核 在卵母细胞的发育过程，卵核又大又圆处于生发泡阶段，直到初级卵母细胞完全成熟。,第二节受精的一般过程,一、精卵识别 1.精卵
13、的远程识别精子的化学激活和趋化性：具有精子顶体的物种中，卵子释放某种化合物，其具有诱导顶体反应的作用。化学激活物质能激活精子；趋化作用使精子向卵子靠近。 2、胶膜在受精中的作用：卵子胶膜在受精中主要作用在精子的识别和远距离相互作用。皱纹盘鲍的受精生物学研究表明，鲍卵子具有和同种精子相结合的种的特异性，但精子和卵子相结合之前，必须有胶膜的存在，否则精子不与质膜结合。,第二节受精的一般过程,二、精子接触和精子入卵 顶体反应 ：当精子与卵子接触时，使顶体内的物质进行胞吐作用与同时形成顶体突起，这就是顶体反应。 精卵质膜的融合和精子入卵：精子穿过卵黄膜后，精子的顶体突起与卵质膜相通，这种相通发生于顶体
14、突起与卵的微绒毛顶端，随之发生融合，精子被拖入卵。 遗传物质融合：海胆的雄原核在卵质中翻转180以使精子中心粒能在雌雄原核之间。雄原核中心粒的微管伸向雌原核，二原核向一起迁移。二原核融合形成二倍体的合子，一个新的生命就开始。,第一节 受精的一般过程,太平洋牡蛎受精过程分为以下几个阶段 阶段1.未受精卵：卵子处于第一次成熟分裂的前期，细胞核似空泡状，直径40 m，核内染色质清亮。 阶段2.精卵混合约4-5 min，精子入卵。精子多从植物极入卵，卵核处于生发泡阶段。 阶段3、受精卵进行第一次成熟分裂。精核去致密头部明显增大。 阶段4、受精卵处于第一次成熟分裂前期，精核继续膨大。 阶段5、受精卵处于
15、第一次成熟分裂中期。,太平洋牡蛎受精过程,阶段6.受精卵处于第一次成熟分裂后期。 阶段7.第一极体形成，此时为受精后的25-30min。 阶段8.受精卵处于第二次成熟分裂中期。 阶段9.第二极体形成。第一极体一分为二。 阶段10.两性原核形成，两原核大小相同，径约15-16 m。 阶段11.两性原核结合，形成合子核。,第二节 受精的条件和因素,1.精子的活力和受精力 精子有活力并不等于有受精力。有的虽然还具活力，但已丧失了受精的能力。 2.卵子的成熟度与授精的关系 卵子的成熟与否，是决定受精能否成功的关键因素。 3.环境因素 由于外界水环境的不稳定，精子和卵子必须同时排放到水体内，在较短的时间
16、内完成受精作用。另外，水体中的温度、pH值、钙离子都能直接或间接影响到受精。,第五章 胚胎发育的生物学,第一节 卵裂 第二节 囊胚 第三节 原肠胚 第四节 担轮幼虫第 第五节 习见贝类的胚胎发育,第一节 卵裂,1.贝类卵裂的特点贝类受精卵的卵裂,除头足类之外,都属于螺旋型卵裂（左旋卵裂：顺时针卵裂，小分裂球在大分裂球右上方；右旋卵裂则相反）。头足类盘状卵裂。 2.影响卵裂的因素 卵裂的速度与卵黄含量的关系：卵黄含量与卵裂速度成反比。环境温度与卵裂速度的关系：一般温度高卵裂快，温度低卵裂慢。,第二节 囊胚,囊胚：是由一个单一细胞经过若干分裂形成的多细胞胚体，因呈囊形，故称囊胚。 囊胚类型 1、有
17、腔囊胚：瓣鳃类、掘足类及部分腹足类，因卵黄量含量少，卵裂结果一般形成有腔囊胚。 2、实心囊胚：绝大多数腹足类，因含有较多的卵黄，卵裂的结果是形成实心囊胚。 3、盘状囊胚：含有丰富卵黄的头足类动物，则形成盘状囊胚。,第三节 原肠胚,原肠胚:囊胚继续发育,形成一个双胚层或三胚层的胚胎,称为原肠胚。 有腔囊胚种类：如河蚌、球蚬、帽贝、田螺等，原肠作用内陷法进行 实心囊胚种类：马蹄螺、荔枝螺等大多数的腹足类，以外包的方式完成原肠作用。牡蛎、贻贝及红螺等绝大部分的海产瓣鳃类及少数腹足类，开始为外包法，以后为内陷法，两者结合完成原肠的作用。 盘状囊胚种类：头足类的囊胚原生质集中在卵子的动物极，只能从外包法
18、形成原肠胚。,第四节 担轮幼虫,担轮幼虫：在软体动物中，除头足类之外，原肠期以后的幼虫发育很象环节动物的担轮幼虫，因而也称它为担轮幼虫。担轮幼虫时期主要出现以下器官结构。 1.纤毛器官：幼虫体表有一部分外胚层细胞长出浓密的长纤毛构成幼虫的运动和触觉器官。 2.壳腺：在原肠胚时期，胚胎背部就有一部分外胚层细胞加厚内陷成壳腺 。 3.口凹与消化道：胚孔移到幼虫的腹面并闭合后，由该处的外胚属形成口凹，与原肠腔接通后形成口和食道，原肠发育为胃和肠。,马氏珠母贝胚胎发育,担轮幼虫,第五节 习见贝类的胚胎发育,贻贝的胚胎发育 扇贝的胚胎发育 牡蛎的胚胎发育 埋栖型贝类的胚胎发育 鲍鱼的胚胎发育,贻贝胚胎发
19、育,口凹,壳腺,贻贝胚胎发育,贻贝胚胎发育,海湾扇贝胚胎发育-1,海湾扇贝胚胎发育-2,海湾扇贝胚胎发育-3,牡蛎胚胎发育,泥蚶胚胎发育,皱纹盘鲍胚胎发育,上足,足,第六节 影响胚胎发育的因素,卵子的成熟度未熟或过熟的卵子，都不能正常受精，即便受精，胚胎发育也不能正常进行。 外界环境条件温度、 光线 、盐度、酸碱度 、氧气 、无机物与有机物的影响、环境污染 、海洋细菌。,外界环境条件,1.温度：温度对胚胎发育的影响比较显著。长牡蛎胚胎发育最适水温为23-26，若水温高于30或低于15，畸形率显著增加。马氏珠母贝人工受精最适水温为20-30，若水温在20以下或30以上，即使正常受精，胚胎与幼虫往
20、往畸形。 2.光线：担轮幼虫有一定的趋光性，牡蛎、贻贝等晚期幼虫都有一定的背光性，在黑暗中比光亮中更容易附着。各种短的光波长如紫外线光等，对动物早期的发育产生的影响更为显著，只要经过这类光线很轻微的照射，就会导致怪胎或死亡。,外界环境条件,3.盐度：盐度影响着动物胚胎的渗透压。贝类多属于体外受精，体外发育的动物，海水盐度与胚胎发育关系更为密切。在适盐度范围内，盐度高，发育快，盐度低，发育慢。 4.酸碱度：许多海产无脊椎动物的胚胎发育要求的海水酸碱度pH值在8左右。在弱酸的环境中胚胎发育不能正常进行。所以，当人工育苗过程中残有动物组织碎片，死亡的精子以及自然海水内的无机物等都会改变胚胎发育环境中
21、的酸碱度，影响发育的正常进行，因此，必须及时地更换新鲜海水。,外界环境条件,5.氧气：氧气是动物胚胎发育过程中不可缺少的，充足的氧气，不仅能满足胚胎发育的需要，也能除去二氧化碳，改善水环境条件。 6.无机物与有机物的影响：K、Mg、Ca对受精很重要，Na和Cl为卵裂所必需，Ca对于分裂球之间的联系起重要作用，而S和Ca又是肠管分化和骨骼形成所必需的元素。Cu2+对牡蛎幼虫的附着起重要的作用，在1L海水中，Cu2+的含量必须0.05-0.6mg，过多或过少均不适宜，过多会引起中毒，影响足丝的分泌或不能附着 。,第六章 贝类幼虫发育生物学,第一节 贝类幼虫的生态学特点 第二节 贝类幼虫的形态 第三
22、节贝类幼虫的食性 第四节 幼虫的生长 第五节 影响贝类幼虫生长发育的因素,第一节 贝类幼虫的生态学特点,浮游性:贝类的幼虫绝大部分是营浮游生活。 阶段性:在整个贝类发育过程中，只有幼虫时期是浮游的，而成体有多种生活方式。 周期性:贝类幼虫的周期性与贝类的繁殖周期密切相关。 短暂性:贝类幼虫只是其发育过程中的一个阶段，不同贝类种类其幼虫发育的时间长短不同。 分布不均匀:贝类幼虫由于受温度、盐度、海流、光照等因素的影响，在海区的分布并不是均匀的。 趋光性:贝类幼虫从面盘幼虫初期开始到眼点幼虫具有正趋光性；幼虫变态后具有负趋光性。,第二节 贝类幼虫的形态,一、腹足纲贝类幼虫的形态（以鲍为代表） 二、
23、瓣鳃纲贝类幼虫的形态（以扇贝为代表）,一、腹足纲贝类幼虫的形（鲍）,1.担轮幼虫：胚胎上具有纤毛环，幼虫前端有一束顶纤毛。此期幼虫仍以卵黄作为营养。 2.面盘幼虫：该期幼虫最明显的器官就是面盘。面盘是幼虫摄食和运动的器官，此期幼虫有一个由壳腺分泌和透明壳。早期面盘幼虫仍以卵黄作为营养，后期面盘幼虫开始摄食。 3.足面盘幼虫：又称为匍匐幼虫。面盘开始退化，足开始发育，幼虫由浮游生活转为匍匐生活。此期幼虫可分为3小期。早期足面盘幼虫；围口壳幼虫；上足分化幼虫。,二、瓣鳃纲贝类幼虫的形态（扇贝）,1.担轮幼虫：口前纤毛环已经由原始或纤毛细胞生成。有的顶端生有收1-2根或数根较长的纤毛组成的鞭毛束，幼
24、虫可以借助纤毛摇动在水中作旋转运动。 2.面盘幼虫：此期幼虫最明显的器官是面盘，担轮幼虫的口前纤毛轮区域变平，形成面盘的顶部，口前纤毛膨大，形成面盘口边缘。此期分为两个小期。D形幼虫；壳顶幼虫： 3.匍匐幼虫：又称足面盘幼虫。在幼虫壳瓣的中央有一对褐色“眼点”。眼点的确切位置是在鳃基前方，眼点细胞内有色素颗粒。,第三节贝类幼虫的食性,一、饵料种类 1.单胞藻 2.代用饵料 3.细菌和有机碎屑 二、摄食量,（一）单胞藻,1.单胞藻种类(1)硅藻：三角褐指藻、新月菱形藻、 牟氏角毛藻；(2)金藻：球等鞭金藻、大溪地球等鞭金藻、湛江等鞭金藻、陆氏巴夫藻；(3)绿藻：小球藻、微绿球藻、青岛大扁藻、亚心
25、形扁藻、塔胞藻、盐藻2.贝类幼虫饵料的单胞藻应具备的条件： 体大小适应；营养价值高，组成合理，易消化、无毒性；生长率高、繁殖快、易培养；浮游于水中，易被幼虫摄食；稳定的遗传性； 生长繁殖适温广； 抗原生动物污染。,（二）代用饵料,贝类幼虫代用饵料研究较多的是微囊饵料。明胶一阿提伯树胶微囊饵料是比较好的一种代用饵料，易被贝类幼虫摄食和消化。单纯用明胶一阿拉伯胶微囊饵料投喂的美州牡蛎幼虫可以完成附着变态，但生长率较低。另外，豆粉、食母生、酵母粉、海藻孢子、活酵母和单胞藻粉都可作为贝类幼虫的临时代用饵料。代用饵料往往有副作用，容易败坏水质，因此投喂代用饵料时，应特别注意水质的保持。,（三）细菌和有机
26、碎屑,在许多海区中，如果单纯按单胞藻的现存量来计算，根本不能满足一些贝类幼虫的生长发育需求，但是这些海区的贝类幼虫却生长得很好，因此，有些学者认为除了单胞藻外，贝类幼虫可能还摄食一些非单胞藻饵料。现已证明，贝类幼虫也能摄食细菌和有机碎屑，如蓝细菌Syhechococcus是硬壳蛤幼虫营养的重要组成部分。细菌中含有一定的营养物质（蛋白质、碳水化合物和脂类）。但有些细菌中缺乏不饱和脂肪酸EPA和DHA。,（四）体表吸收,贝类幼虫除了通过消化系统吸收营养物质外，还通过体表直接吸收一部分溶解于海中的营养物质。这些能够吸收的营养物质主要是溶解氨基酸和糖，双壳贝类在整个生活阶段都能吸收这些营养物质，太平洋
27、牡蛎卵子在受精后1天即能吸收甘氨酸。在面盘幼虫和足面盘幼虫期主要依靠面盘吸收营养物质，变态期间鳃棒是主要的吸收器官，而成体主要靠鳃吸收营养物质，此外，外套膜也有吸收营养物质的作用。,二、摄食量,幼虫的摄食量一般随着个体的生长而增加。同时与环境等许多因素有着密切的关系。 泥蚶：泥蚶幼虫的壳长与其滤水率和摄食率均呈正相关，即幼虫越大，其滤水率和摄食率则越大，在相同条件下，幼虫的培育密度与其滤水率呈负相关，泥蚶幼虫的摄食率在投喂饵料后2小时左右达到最大值，然后逐渐下降。,泥蚶幼虫滤水率（L/min）与密度（个/mL）关系,泥蚶幼虫壳长与摄食率的关系,第四节 幼虫的生长,贝类幼虫的生长规律“上升 上升
28、 停滞 上升”所对应的发育阶段，为：D形幼虫 壳顶期幼虫 足面盘幼虫 即将变态幼虫 变态后幼虫 稚贝。即从D形幼虫到足面盘幼虫均上升，变态期停滞，幼虫变态后生长率又上升。,第五节 影响贝类幼虫生长发育的因素,温度 盐度 光照 饵料 亲贝营养状况 幼虫的发育期,一、温度,1.温度过低会减少或阻止幼虫生长，而温度过高会导致培育水体中有害细菌和纤毛虫等有害生物的过速生长，严重时可引发幼虫大批死亡。 2.在一定的温度范围内温度越高，幼虫发育生长越快；温度过低，幼虫发育生长缓慢，会大大地降低其成活率，过高的温度，其生长速度会加快，但死亡率往往随之加大。 3.温度影响幼虫变态时的大小。在双壳贝类中就存在变
29、态时幼虫壳长短和温度反比的现象。 4.贝类幼虫不同发育阶段对温度的敏感性不同，一般地，在发育的早期比较敏感，适应的温度范围较窄。,二、盐度,1.盐度也是影响贝类幼虫生长发育的重要因素，每一种贝类幼虫都有自己盐度的耐受范围和适宜范围。 2.与温度相比，盐度对贝类幼虫生长发育的影响较小。 3.不同发育阶段的贝类幼虫对盐度忍受力和敏感性与温度一样也是不同的。 4.温度和盐度对贝类幼虫生长发育有一定协同作用。,三、光照,人工育苗条件下，光线过弱，操作不方便，光线太强，幼虫呈负趋光线会使幼虫容易下沉影响生长发育，并会引起大量死亡。不同贝类幼虫均具有不同的光照强度适应范围。泥蚶幼虫适宜光照强度为500-1
30、000lx,四、饵料,1.人工培育饵料的质量和数量：对幼虫的生长发育具有一定的影响，处于生长指数期的单胞藻为幼虫的优质饵料。 2.不同单胞藻饵料：不同饵料中脂类、蛋白质和碳水化合物组成和含量是不同的，同时，由于受单胞藻大小和细胞壁厚薄的影响，贝类幼虫对它们的摄食和消化能力也是不同的。因此投喂不同单胞藻饵料对贝类幼虫生长发育的影响不同。 3.饵料密度：对贝类幼虫的生长发育也有一定的影响。密度过低或过高都将影响贝类幼虫滤水率和摄食率，从而影响幼虫生长发育。,五、亲贝营养状况,1.亲贝饵料：供应直接影响着亲贝的产卵量和卵子质量，从而影响着幼虫的生长存活率。饵料中的不饱和脂肪酸含量直接影响着贝体内的不
31、饱和脂肪酸的含量（DHA、EPA）。 2.卵子的大小和质量：对贝类幼虫的发育有重要影响，由较大卵子发育而成的海湾扇贝幼虫存活率较高，可能是较大卵子含有较多脂类的缘故。 3.不饱和脂肪酸：对贝类幼虫的生长有重要作用。幼虫体内不饱和脂肪酸含量越高，幼虫生长越快。亲贝饵料中的不饱和脂肪酸含量直接影响贝类卵子和幼虫体内不饱和脂肪酸含量。,六、幼虫的发育期,随着幼虫发育时期的不同其生长速度也不相同。在同一发育时期，一定的温度范围内，温度越高幼虫的生长发育速度越快。 泥蚶 D形幼虫 壳长日增长5-7m壳顶初期 10-12m壳顶后期 2-3天内几乎没有生长进入底栖生活 10-20m,第七章 贝类幼虫的附着变
32、态,第一节 影响贝类幼虫附着变态的因素 第二节 化学诱导物在经济贝类苗种生产中的应用,第一节 影响贝类幼虫附着变态的因素,一、物理因素 二、生物因子 三、人工诱导物,一、物理因素,1.温度和盐度:（1）温度和盐度对幼虫的附着变态有明显影响。温度和盐度能够影响幼虫变态能力的获得。（2）温度和盐度不但单独对幼虫附着变态有影响，两者之间还有协调作用，当温度、盐度处于不适范围时，盐度（温度）的适宜范围缩小。 2.附着基:贝类幼虫对附着基面光滑与否，附着基的阴阳面、颜色和附着基的大小有一定的选择性，一般粗糙比光滑多；阴面比阳面好。牡蛎幼虫对灰色固着基最好，黑色和红色次之。,二、生物因子,1.同种个体分泌
33、物:研究表明，贝类同种个体的分泌物均能促进其幼虫的附着，鲍的成体分泌物能够促进其幼虫的附着变态。2.微生物膜（1）微生物膜对于许多贝类幼虫的附着变态有重要作用。（2）细菌对幼虫附着变态的诱导还与细菌的发育阶段有关。（3）细菌所排泄的铵也与牡蛎幼虫的附着变态相关。3.饵料分泌物：许多贝类成体所摄食的海藻能够诱导它们幼虫完成附着变态，如鲍。,三、人工诱导物,1.金属阳离子：K+、Ca2+、Rb+和Cs+对贝类幼虫的附着变态均有一定的诱导作用，特别K+的作用效果明显。 2.L-DOPA(左旋多巴)和儿茶酚胺（肾上腺素，去甲肾上腺素和多巴胺）都是酪氨酸衍生物，均为神经递质。对太平洋牡蛎、翡翠贻贝、海湾
34、扇贝、墨西哥扇贝和硬壳蛤幼虫附着变态均有诱导作用。 3.GABA （氨基丁酸）和5-羟色胺（5-HT）:GABA对皱纹盘鲍幼虫变态的最佳作用浓度为10-5mol/L，变态率可达60%。 5-羟色胺（5-HT）能够诱导一些贝类幼虫附着变态（如硬壳蛤）。 4.胆碱及其衍生物：琥珀酰胆碱和胆碱均能诱导一些贝类幼虫附着变态。,第二节 化学诱导物在经济贝类苗种生产中的应用,一、GABA（氨基丁酸）在鲍苗种生产中的应用 二、肾上腺素（EPI）和去甲肾上腺素（NE）在牡蛎生产中的应用 三、氯化钾在贝类苗种生产中的应用 四、菌膜在贝类苗种生产中的应用,一、GABA（氨基丁酸）在鲍苗种生产中的应用,受精后7天的
35、红鲍幼虫加入GABA后24h内就有100%的幼虫附着，受精后10天的幼虫加入GABA后2-4h内100%的幼虫产生附着行为并发生变态。GABA处理浓度是关键，对大部分鲍幼虫GABA最佳浓度为1mol/L。,二、肾上腺素（EPI）和去甲肾上腺素（NE）在牡蛎生产中的应用,肾上腺素和去甲腺上腺素能诱导牡蛎眼点幼虫产生不固着变态行为，其最适浓度为0.1mol/L。诱导褶牡蛎眼点幼虫不固着变态率为59.9%，用0.1mol/L的肾上腺素处理太平洋牡蛎幼虫24h，90%以上的幼虫发生变态，变态幼虫90%以上成为无基牡蛎。,三、氯化钾在贝类苗种生产中的应用,氯化钾的诱导浓度一般为10-40mol/L，最适
36、浓度因不同种类而有所不同。氯化钾的作用时间较长，一般需2-3天时间，目前氯化钾只是用于检测贝类幼虫是否具变态能力。,四、菌膜在贝类苗种生产中的应用,菌膜在贝类苗种生产中的应用还刚刚起步。Weiner等（1985）已将海洋细菌诱导牡蛎幼虫附着变态应用于生产，菌膜在贝苗生产中具有很大潜力，比GABA和氯化钾具有更大优点。,第八章 贝类三倍体与四倍体育种原理,一、 诱导因子的种类和作用机制1.化学诱导剂（1）细胞松弛素B(CB)（2）二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)（3）咖啡因 此外，秋水仙素、聚乙烯乙二醇和三氯甲烷等2. 物理作用因子（1）温度休克（2）静水压,一、诱导因子的种类和作用机制,1. 化
37、学诱导剂（1）细胞松弛素B：是真菌的一类代谢产物。一般认为CB抑制胞质分裂的机制是特异性地破坏微丝，使最终导致细胞分离的由微丝构成的“收缩环”解体，抑制细胞的分裂。（2）二甲基氨基嘌呤：是嘌呤霉的一种类似物。6-DMAP是一种蛋白质磷酸化抑制剂，通过作用于特定的激酶，破坏微管的聚合中心，使微管不能形成。 （3）咖啡因：咖啡因的作用效果在于提高细胞内的Ca2浓度，而构成细胞分裂过程中的纺锤丝的微管对Ca2浓度非常敏感，Ca2浓度极低或高于10-3时，会引起微管二聚体的解聚，阻止细胞分裂。此外，秋水仙素、聚乙烯乙二醇和三氯甲烷等化学试剂对抑制细胞分裂都有一定的作用,一、诱导因子的种类和作用机制,2
38、.物理作用因子（1）温度休克：温度休克的机制是引起细胞内酶构型的变化，不利于酶促反应的进行，导致细胞分裂时形成纺锤丝所需的ATP的供应途径受阻，使已完成染色体加倍的细胞不能分裂。常用温度的确定根据应用种类的不同而有所差异，一般是在该物种生存温度范围的上下限附近。（2）静水压：即利用水静压设备（液压机等）产生的压力施加于处理对象。其机制主要是抑制纺锤体的微丝和微管的形成，阻止染色体的移动，从而抑制细胞的分裂。,二、三倍体育种的染色体组操作方法,1.抑制第二极体2.抑制第一极体的释放 3.生物方法,1.抑制第二极体,在受精卵释放第二极体之前，给以适当的理化刺激，阻止第二极体的形成，使得一套染色体保
39、留下来，从而产生三倍体。(1)温度休克法：热休克采用30-38的高温；冷休克采用0-8低温。处理持续时间10-20 min。(2) 水静压方法：采用200-250kg/cm2的压力，处理贝类受精卵10 min.(3) CB：处理浓度0.5-1.0mg/L， 处理时间10-15 min。(4) 6-DMAP：适宜浓度：300-450umol/L，处理持续时间10-20 min。(5)咖啡因：有效浓度为5-15m mol/L， 处理时间10-15 min。,2.抑制第一极体的释放,抑制第一极体的排放产生的三倍体称MI三倍体。抑制第一极体的方法与控制第二极体所使用的方法基本相同，只是施加处理的时机是
40、在第一极体释放之前。缺点：通过抑制第一极体的方法产生的三倍体的胚胎孵化率和幼虫成活率都很低。抑制第一极体的释放，可产生一定比例三倍体，四倍体、二倍体和非整倍体。,三倍体育种的染色体组操作方法,3.生物方法：利用四倍体与二倍体杂交可产生100%的三倍体，如通过此法产生100%的三倍体太平洋牡蛎。,四倍体育种的染色体组操作方法,1.抑制极体释放 2.抑制第一次卵裂 3.细胞融合 4.人工雌核发育 5.利用三倍体贝类诱导四倍体,四倍体育种的染色体组操作方法,1.抑制极体释放：抑制第一极体排放产生四倍体。 2.抑制第一次卵裂：抑制第一次卵裂的方法是在受精卵发育至卵裂之前，对受精卵施加适度的理化处理，使
41、细胞分裂受阻，从而达到染色体加倍的目的。（采用CB或6-DMAP） 3.细胞融合：通过对两上细胞施加一定处理，使其细胞融合，最终形成四倍体的胚胎。聚乙二醇是目前最常用效果较好的融合剂，脂质体、激光和电融合也有一定的应用价值。,四倍体育种的染色体组操作方法,4.人工雌核发育：先使精子失活，再阻止第一、第二极体的释放，诱导四倍体。 5.利用三倍体贝类诱导四倍体：利用三倍体贝类产生的卵子与正常精子受精然后抑制第一极体，可产生存活的四倍体。,文蛤雌体性腺增殖期,文蛤雌体性腺生长期,文蛤雌体性腺成熟期,文蛤雌体性腺排放期,文蛤雌体性腺休止期,1,2,3,4,5,6,1休止期2增殖期3生长期4成熟期5排放
42、期6滞留退化期(波纹巴非蛤),波纹巴非蛤成熟卵子,贻贝的变异性腺 1、卵细胞；2产卵子的滤泡；3、产精子的滤泡,初级精母细胞,初级精母细胞,次级精母细胞,精原细胞,卵原细胞,初级卵母细胞,次级卵母细胞,精卵发生图,精细胞,成熟卵子,马氏珠母贝胚胎发育,担轮幼虫,泥蚶胚胎发育,海湾扇贝胚胎发育-1,海湾扇贝胚胎发育-2,海湾扇贝胚胎发育-3,皱纹盘鲍胚胎发育,上足,足,脉红螺胚胎发育,金乌贼胚胎发育-1,金乌贼胚胎发育-2,金乌贼胚胎发育-3,牡蛎、蛔虫、沙蚕,贻贝、珠母贝,海星、脊椎动物,海胆、腔肠动物,受精是生发泡破裂之前；受精是第一次成熟分裂中期； 受精是在第二次成熟分裂中期； 受精是在已完成二次成熟分裂之后。,口凹,壳腺,贻贝胚胎发育,贻贝胚胎发育,贻贝胚胎发育,雄性交接器,雌性腹足口,
