1、G昌中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准GB 29708-2013食品安全国家标准动物 性食品中五氯酣铀残留 量的测定气相 色 谱 质 谱 法2013-09-16 发布 2014-01-01 实施中 华 人 民 共 和 国 农 业 部 告 立 中 华人 民共和 国 国 家卫生和计划 生育委员 会 GB 29708-2013食品安全国家标准 动物性食品中五氯盼锅残留量的测定 气相色 谱 质 谱法1 范围本标准规定了动物性食品中五氯酣铀残留量检测的制样和气相色谱质 谱法 。 本标准适用于猪的肌肉 、 肝脏和肾脏及鸡的肌肉和肝脏组织中五氯酣铀残留量的检测 。2 规范性引用文件下列文件对于本文件
2、的应用 是必不可少的 。 凡是注日期的引 用文 件 ， 仅注日期的版本适用于本文 件 。 凡是不注日期的引 用 文件 其最新版本包括所有的修改单）适用于本文件 。GB/T 6682 分 析 实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法3 原理试料中残留的五氯酣 销 ， 用三氯乙酸沉淀蛋白 ， 环己烧 乙酸乙醋潜液提取 ， 乙酸 哥 哥毗睫溶液衍生 ， 气相色谱 质 谱法测 定 ， 外标法定量 。4 试剂和材料以下所 用 的试 剂 除特别注明外均为分析纯试剂 z 水为符合 GB/T 6682 规定的一级水 。4.1 五氯酣铀标准品 z 含量注9 8.0 % 。4.2 碳酸何 。4.3 正己烧
3、。4.4 环己烧 。4.5 乙酸乙醋 。4.6 乙酸哥。4.7 毗脏 。4.8 三氯乙酸 。4.9 浓盐酸 。4.10 5%三氯乙酸溶液 z 取氯乙酸禧液 5 g， 用 水溶解并稀释至 100 mL 。4. 11 2.4 mol/L 盐酸溶液 z 取浓盐酸 20 mL， 用 水溶解并稀释至 100 mLo4.12 环己统 乙酸乙醋溶 液 z 取乙酸乙醋 10 mL， 加环己烧 40 mL， 混匀 。4.13 乙酸哥 毗睫溶液 z 取乙酸哥 10 mL， 加毗睫 10 mL， 混匀 ， 现配现用 。4. 14 0.2 mol/L 碳酸饵溶液 z 取碳酸饵 27.6 g， 用 水溶解并稀释至 I
4、000 mL 。4.15 I mg/ mL 五氯酣铀标准贮备液 z 精密称取五氯酣铀标准品 10 mg， 于 10 mL 量瓶 中 ， 用水溶解并 稀释至刻 度 ， 配制成浓度为 I mg/ mL 的五氯酣纳标准贮备液 。 一 20 以下保 存 ， 有效期为 3 个月 。GB 29708-20134.16 2 g/mL 五氯酣铀标准工作液 z 精密量取 1 mg/ mL 五氯酣铀标准贮备液 200 L， 于 100 mL 量 瓶 中 ， 用水稀释至刻 度 ， 配制成浓度为 2 g/mL 的五氯酣铀标准工作 液 ， 现配现用 。5 仪器和设备5.1 气 相 色 谱 质 谱 仪 E 配 EI 源
5、。5.2 分析天平 z 感量 0.000 01 g 。5.3 天平 z 感量 0.01 g.5.4 高速离心机 。5.5 振荡器 。5.6 旋涡混合器 。5.7 组织匀浆机 。5.8 氮吹仪 。5.9 旋转蒸发仪 。5.10 离心管 ： 50 mL 。6 试料的制备与保存6. 1 试料的制备取适量新鲜或解冻的空白或供试组织 ， 绞 碎 ， 并使均 质 。 一 一取均质的供试样 品 ， 作为供试试料 。 一 一 取均 质 的空白样 品 ， 作为空白试料 。一 一取均 质 的空白样 品 ， 添加适宜浓度的标准工作 液 ， 作为空白添加试料 。6.2 试料的保存-20 以下贮存备用。7 测定步骤7.
6、1 基 质 E配 标 准 曲 线 的 制 备准确量取 2 g/ mL 五氯酣铀标准工作液适 量 ， 用 水配制成浓度为 2 、 5、 10、 20 、 50 、 100 g/L 的系列 标准溶 液 ， 各取 1.0 mL， 分别溶解经提取 、 蒸吹干后的 6 份空白试料残余 物 ， 混 匀 用 2.4 mol/L 盐酸溶 液调 pH 至小于 2.0， 加环己烧 乙酸乙醋溶液 5 mL， 旋涡混 合 ， 8 000 r/min 离心 lOmi n， 移取有机 层 ， 再 加环己皖 乙酸乙醋溶液 5 mL， 旋涡混 合 ， 8 000 r/min 离心 10 min， 合并两次有机 层 ， 于 4
7、5 旋转蒸 干 。 按衍生化步骤操 作 ， 供气相色谱 质 谱测定 。 以特征离子质量色谱峰面积为纵坐标 ， 对照溶液浓度为 横坐 标 ， 绘制标准 曲 线 。 求回归方程和相关系数 。7.2 提取称取试料 5 g土 0.05 g， 于 50 mL 离心管 中 ， 加水 10 mL ， 旋涡混 匀 ， 8 000 r/ min 离心 lOmi n， 取上清 液 ， 加 5%三氯乙酸 5 mL， 旋涡混 匀 ， 8 000 r/ min 离心 10 min， 取上清 液 ， 用 2.4 mol/L 盐酸溶液调 pH 至小于 2.0， 加环己烧 乙酸乙醋溶液 5 mL， 旋涡混 合 ， 8 000
8、 r/ min 离心 10 min， 移取有机 层 ， 再加环己 烧 乙酸乙醋溶液 5 mL， 旋涡混 合 ， 8 000 r/ min 离心 10 min， 合并两次有机 层 于 45 旋转蒸干 。2GB 29708-2013 Mh一 c7.3 衍生化残余物中加环己烧 乙酸乙醋 1.0 mL， 加元水硫酸铀少量 ， 加乙酸哥 毗睫溶液 100 .L， 密 封 ， 于60 反应 15 min， 冷 却 ， 加碳酸饵溶液 0.5 mL， 充分混 匀 ， 静置分 层 ， 取有机 相 ， 供气相色谱 质 谱测定 。7.4 测定7.4.1 色谱条件7.4.1.1 色谱柱 ： DB-5MS 5 %苯基甲
9、基聚硅氧烧（ 30 m 0.25 mm， 膜厚 0.25 .m） ， 或相当者 。7.4.1.2 进样口温度 ： 250 。7.4.1.3 进样方式 z 不分流进样 。7.4.1.4 进样体积 ： 2 .L.7.4.1.5 柱温 z 初温 140 保留 2 min， 以 10 min 升温至 200 ， 以 15 min 升温至 280 ， 保持3.0 min 。7.4.1.6 载气 z 氮 气 ， 1.0 mL/min （恒流 。7.4.2 质谱条件7.4.2.1 EI 源 ： 70 eV 。7.4.2 .2 溶剂延迟 ： 3 min.7.4.2.3 GC/MS 传输线温度 ： 280 。7
10、.4.2.4 选择离子检测方 式 ， 检测离子 Sim( m / z ) : 266 ,308 ,237 ,165 ,130。7.4.2.5 定量离子 ： 266 。7.4.3 测定法通过试样色谱 图的保留时间与标准溶液的保留时间 、 色谱峰的特征离子与相应浓度标准品各色谱 峰的特征离子相对照定性 。 试样榕液中的离子相对丰度与基质匹配标准榕液中的离子相对丰度相比 ， 符合表 1的要 求 。基 质 匹配标准榕液和添加试液中特征离子的质 量色谱图分别见附录 A 。表 1 试料溶液中离子相对丰度的允许偏差范围相对丰度%允许偏差%SO 土 2020 50 士 25IO 20 士 30运 10 士 5
11、07.5 空白试验取 空 白 试 料 采 用 完 全 相 同 的 测 定 步 骤 进 行 平 行 操 作 8 结果计算与表述 单点校准 z（ 1 )3GB 29708-2013=-一或基质匹配标准曲线校准 z 由 As=ac5 +b 求得 a 和 b， 则c A -b ( 2 )a试料中五氯酣铀的残留量（ g/kg） 按 式 （ 3） 计 算 z式中 zX -Vm ( 3 )c 一 一 供试试料溶液中五氯酣铀浓 度 ， 单位为纳克每毫升（ ng/ mL) ;C s 一 一 标准溶液中五氯酣铀浓 度 单位为纳克每毫升（ ng/ mL) ;A 一 一 一 供 试 试 料 溶 液 中 五 氯 酣 铀
12、 的 衍 生 物 的 峰 面 积 zAs 一 一 标准溶液中五氯酣铀的衍生物的峰面积 3X 一 一供试试料中五氯酣铀的残留 量 ， 单位为微克每千克（ g/kg) ; V 一 一残余物定容体 积 ， 单位为毫升（ mL) ;m 一 一供试试料质 量 ， 单位为克（ g） 。注 计算结果需扣除空白值 ， 测定结果用平行测定的算术平均值表示 保留三位有效数字 。9 检测方法灵敏度 、 准确度和精密度9. 1 灵敏度本方法的检测限为 0.25 g/kg.本方法的定量 限 ， 肌肉组织中为 0.5 g /kg， 肝脏和肾脏组织中为 1 g 峙 。9.2 准确度本方法在肌肉组织 0.5 g /kg 2 g /kg 、 在 肝 脏 和肾脏组织 1 g/kg 4 g/ kg 添加浓度水平上的回收率范围为 60% 120% 。9.3 精密度本方法批内相对标准偏差运 20 %， 批间相对标准偏差 20 % 。4GB 29708-2013附 录 A色谱圄PCP-OAc圄 A.1 五氯酣铀标准溶液特征离子质量色谱固（ 2 fg/L)圄 A.2 猪肝脏组织空白试样特征离子质量色谱图PCP-OAc圄 A.3 猪肝脏组织空白添加五氯酣铀试样特征离子质量色谱圄（ 1 fg/kg)
