1、各类鼻咽癌细胞株特性及来源CNE1 为鼻咽高分化鳞状细胞癌细胞系;CNE2 、HNE1、HNE2 、HNE3、HONE1 为鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系;5 一 8F 为鼻咽低分化鳞状细胞癌 ,细胞系 SUNE 一 1 亚株,具有高转移、高成瘤能力;6- 10B 为鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系 SUNE-1 亚株,具有高成瘤潜能,不转移特性。C666-1 为长期携带 EB 病毒基因的低分化鼻咽癌细胞株;HK-1 为携带 EB 病毒基因的高分化鼻咽癌细胞株. NP69 为永生化鼻咽上皮细胞系 ,于 1XKsFM(keratinoeyte serum-free medium，KSFM)培养基中,37、
2、5%CO 2、饱和湿度条件下培养, 呈现鳞状上皮样、贴壁生长 ,具有正常鼻咽上皮的特性。CNE11癌组织来源病人王某某，女, 58 岁，, 籍贯吉林省, ，中国医学科学院日坛医院住院号：2382248.1975年 8月13日患者因头痛 耳鸣、 鼻衄等症状来院就诊。临床检查鼻咽部有菜花样肿物, 肿瘤已侵犯颅底和颅神经( , , ) , 双颈淋巴结转移 , 诊断为鼻咽癌。X 光诊断为鼻咽后壁软组织肿物符合鼻咽癌, 颅底象见左侧翼状突外板可疑骨质破坏,鼻咽部肿物作活检, 病理诊断为高分化鳞癌。培养过程在第12 代时 (培养后的6个月)，在上皮样细胞培养中发现有少量梭形细胞。在有的培养瓶中, 梭形细胞
3、逐渐增加。在接种少量细胞的培养瓶中, 有的全为上皮样细胞, 有的全为梭形细胞。选择全为上皮样的细胞传代, 称CNE细胞株；全为梭形的细胞传代, 称CNF细胞株。CNE细胞株容易形成空泡，不传代的老细胞, 在显微镜下可见到有些细胞的胞浆突出, 然后脱落成死细胞, 还有多核巨细胞。在这二株细胞, 特别是CNF细胞的单层或多层细胞上有很多圆形细胞, 核大 ,浆少。在培养液中也有大量圆的脱落细胞。将培养液中的悬浮细胞接种于培养瓶,细胞仍能贴瓶 , 生长出原来的上皮样细胞或梭形细胞。将CNE , CNF细胞和这二株细胞的脱落细胞培养成单层后, 不传代, 每周换液二次, 继续培养7 个月,未能得到类淋巴母
4、细胞株，在培养过程中未见到肿瘤组织培养中常见到的成纤维细胞生长。特性CNE-22组织来源和培养方法组织取自鼻咽癌( 期) 患者, 林XX,63岁, 男性, 广东籍, 活检组织病理检查为慢性鼻咽炎, 但同时负压吸引的鼻咽脱落细胞为低分化鳞状细胞癌( 图1).病人血清的E B 病毒抗体和鼻咽脱落细胞的EBNA检测，病人血清的各种抗EB病毒抗体的滴度分别为: VCA/IgG 1: 320 , EA IgG 1: 160, VCA/IgA 1: 40, EA/IgA1 : 5 , 抗EBNA 抗体为1:160。鼻咽脱落细胞中发现成团的癌细胞呈EBNA阳性细胞株的EB病毒抗原用抗补体免疫荧光试验检查CN
5、E- 2细胞中各种EB病毒抗原。体外培养第3代细胞可见EB NA阳性 , 胞核呈颗粒状明亮的荧光,细胞传至第11 代后进行多次检查, EBNA均呈阴性。经IudR或巴豆油、丁酸激活的细胞 , 检查EA、VCA也呈阴性。将细胞与类淋巴母细胞株 HK-1共同培养, 观察EB病毒对上皮细胞的再感染 ,6天后上皮细胞的EBNA 仍呈阴性。HNE1、HNE2 ，HNE3和HONE1 3组织细胞培养及建株肿瘤组织取自4倒男性鼻咽癌初诊患者，分别命名为HNE1、HNE2，HNE3和HONE1，其中HNE1 和HONE1为EBV阳性，HNE2 和HNE3 为EBV阴性。病理诊断均为低分化鳞癌。EBV抗原及 E
6、BV基因组分析EBNA检测结果发现HNE 1和HONE 1细胞30 代以前均为EBNA阳性，HNE 2和HNE 3则为阴性。晚代 HNE1和HONE1 细胞的EBNA也逐渐转为阴性，而从HONE1第5 代细胞中克隆出来的CL40亚株的EBNA则非常稳定，传至52代其EBNA阳性率仍高达85 90%，VCA 结果示HNE1、HNE2、HNE3,均为EAVCA 朗性HONE 细胞中只有0.1%为阳性。1 人体鼻咽癌上皮样细胞株和梭形细胞株的建立J. 中国科学,1978,01:113-118+121-124.2 谷淑燕,赵文平,曾毅, 唐慰平 ,赵明伦,邓惠华, 李昆. 从低分化鼻咽癌病人建立鼻咽癌上皮细胞株J. 癌症,1983,02:70-72+129-130.3 祝和成,姚开泰,李桂源等,4 株鼻咽癌上皮细胞株建立及其生物学特性 .湖南医科大学学报.1992,06,17(2),103-107.
