1、罗 氏 海 盘 车 中 一 个 新 的 脑 苷 脂 类 化 合 物 罗 氏 脑 苷 D刘 涛 1 ,詹 永 成 2 3 ,裴 月 湖 31 江 苏 康 缘 药 业 股 份 有 限 公 司 ,连 云 港 222001 ;2 淮 海 工 学 院 化 工 系 ,连 云 港 222005 ;3 沈 阳 药 科 大 学 中 药 学 院 ,沈 阳 110016【 摘 要 】 目 的 :研 究 海 洋 生 物 罗 氏 海 盘 车 的 化 学 成 分 。 方 法 :采 用 硅 胶 柱 色 谱 、 凝 胶 柱 色 谱 、 制 备 HPLC等 手 段 分 离 化 合 物 ,利 用 理 化 性 质 和 波 谱 分
2、析 方 法 鉴 定 结 构 。 结 果 :从 罗 氏 海 盘 车 中 分 离 得 到 1 个 化 合 物 ,222 2羟 基 (2 R ,14 Z)二 十 三 酰 胺 232羟 基 2(2 S , 3 R , 4 E)2十 三 碳 烯 212O2 2D2吡 喃 葡 萄 糖 苷 。 结 论 :该 化 合 物 为新 化 合 物 ,命 名 为 罗 氏 脑 苷 D。【 关 键 词 】 罗 氏 海 盘 车 ;罗 氏 脑 苷 D【 中 图 分 类 号 】 R284 【 文 献 标 识 码 】 A 【 文 章 编 号 】 167223651 (2007) 0320179203【 收 稿 日 期 】 2007
3、203226【 基 金 项 目 】 江 苏 省 自 然 科 学 基 金 项 目 (BK2005045)【 3通 讯 作 者 】 詹 永 成 :工 程 师 ,博 士 ,主 要 从 事 天 然 药 物 化 学 和中 药 新 药 开 发 研 究 ,E2mail : zhanyc88 sina1com罗 氏 海 盘 车 ( Asterias rollestoni Bell1) 为 棘 皮 动物 门 海 星 纲 海 生 底 栖 动 物 ,广 泛 分 布 于 我 国 东 海及 环 渤 海 湾 海 域 ,沿 海 渔 民 常 用 作 治 疗 胃 痛 、 胃 溃疡 等 疾 病 ,也 用 作 泡 制 药 酒 ,以
4、 达 到 补 肾 壮 阳 、 固本 培 元 之 功 效 。 但 对 罗 氏 海 盘 车 的 化 学 成 分 ,国内 外 研 究 较 少 ,有 文 献 报 导 了 罗 氏 海 盘 车 中 的 微量 元 素 、 氨 基 酸 、 总 皂 苷 123 和 腺 苷 等 含 氮 物 质 3 ;我 们 对 罗 氏 海 盘 车 进 行 了 系 统 的 化 学 成 分 研 究 ,从 中 分 离 得 到 了 三 萜 皂 苷 4 、 脑 苷 脂 4 和 甾 醇 类化 合 物 5 。 本 文 报 道 从 罗 氏 海 盘 车 中 分 离 得 到 的1 个 新 的 脑 苷 脂 类 化 合 物 222 2羟 基 (2 R
5、,14 Z) 二十 三 酰 胺 232羟 基 2(2S , 3 R , 4 E)2十 三 碳 烯 212O2 2D2吡 喃 葡 萄 糖 苷 (图 1) 。Fig 1 Structure of rollcerebroside D1 实 验 部 分熔 点 测 定 仪 为 Yanaco micro2hot2stage ,熔 点 未校 正 ;质 谱 为 Shimadzu GCMS2QP 5050SA 型 质 谱 仪(EI2MS) , MAT295 型 质 谱 仪 ( HRFAB2MS) 和 LC2MSD2Trap2SL (Agilent) 型 质 谱 仪 ( ESI2MS) ;核 磁 共振 波 谱 仪
6、 为 Bruker AX2300 ,TMS 为 内 标 ;高 效 液 相色 谱 仪 为 Shimadzu LC28A (制 备 型 20 mm 250mm ,15 m) ;Sephadex LH220 为 瑞 士 Pharmacia 公 司出 品 ;硅 胶 为 青 岛 海 洋 化 工 厂 出 品 。 高 效 液 相 色谱 用 试 剂 为 色 谱 纯 ,其 他 所 用 试 剂 为 分 析 纯 。 所用 药 材 购 自 江 苏 连 云 港 ,由 淮 海 工 学 院 海 洋 学 院吴 国 友 高 级 教 师 鉴 定 为 罗 氏 海 盘 车 Asteriasrollestoni Bell1。2 提 取
7、 分 离 及 化 学 反 应罗 氏 海 盘 车 干 品 用 70 %乙 醇 提 取 ,提 取 液 减压 回 收 ,浸 膏 加 适 量 水 混 悬 ,依 次 用 石 油 醚 、 乙 酸乙 酯 及 正 丁 醇 萃 取 。 石 油 醚 部 分 经 硅 胶 柱 色 谱 分离 ,得 白 色 粉 末 ,再 经 制 备 高 效 液 相 色 谱 分 离 、Sephadex LH220 纯 化 得 该 化 合 物 。甲 醇 解 反 应 6 :取 样 品 约 15 mg ,加 019 molL - 1盐 酸 (在 82 %甲 醇 中 ) 115 mL ,水 浴 回 流 反 应 11h ,反 应 液 用 石 油 醚
8、 萃 取 ,石 油 醚 层 经 硅 胶 柱 色 谱纯 化 (石 油 醚 2乙 酸 乙 酯 = 9 1) ,得 类 白 色 固 体FAM(脂 肪 酸 甲 酯 ) ;石 油 醚 萃 取 后 的 水 液 加 氨 水碱 化 (pH = 9 10) ,用 乙 醚 萃 取 ,萃 取 液 挥 干 ,得LCB (长 链 碱 ) ;水 液 自 然 放 置 ,得 葡 萄 糖 甲 苷 结 晶 。二 甲 基 二 硫 化 物 (DMDS) 衍 生 物 制 备 7 :取 样2007 年 5 月 第 5 卷 第 3 期 Chin J Nat Med May 2007 Vol15 No13 179 品 约 2 mg 溶 于
9、二 硫 化 碳 (015 mL) 中 ,加 DMDS 015mL ,碘 2 mg ,置 于 封 管 中 70 反 应 40 h 后 ,加 入5 %硫 代 硫 酸 钠 约 2 mL 终 止 反 应 ,反 应 液 加 石 油醚 萃 取 ,萃 取 液 挥 干 ,即 得 。3 结 构 鉴 定化 合 物 为 白 色 无 定 型 粉 末 。 ESI2MS 给 出 准 分子 离 子 峰 740 M21 - ,764 M + Na + , HR2FABMS显 示 M + Na +峰 m/ z 7651332 5 ,对 应 的 分 子 式 为C42H79NO9。 1 H NMR 信 号 8140 ( d ,1H
10、 , J = 814Hz) , 13C NMR 信 号 17611 (CONH) 、 5416 (CHNH)显 示 存 在 1 个 酰 胺 键 ;1H NMR 信 号 4190 (d ,1H ,J = 716 Hz) 和 13 C NMR 信 号 10516 ,7512 ,7816 ,7117 ,7815 ,6218 提 示 化 合 物 中 存 在 1 个 2D2葡 萄糖 。 1H NMR 信 号 0186 (t ,6H , J = 6 Hz ,2 CH3)及 1124 (s , nH ,长 链 CH2)显 示 有 长 脂 肪 链 存 在 ,推定 该 化 合 物 为 1 个 脑 苷 类 化 合
11、 物 8 。 1 H NMR 信号 5190 (m ,2H) 、 5144 (m ,2H) 和 13 C NMR 信 号 13312 ,13118 ,13015 (2C) 显 示 化 合 物 中 有 2 个 双键 。化 合 物 经 甲 醇 解 得 到 长 链 脂 肪 酸 甲 酯(FAM) 、 长 链 碱 (LCB) 、 2D2葡 萄 糖 甲 苷 。 FAM 经GC2MS检 测 为 一 单 峰 ,分 子 量 ( m/ z) 382 ,确 定 分子 式 为 C24H46O3 ,提 示 脂 肪 酸 部 分 具 有 23 个 碳 ,且含 有 1 个 双 键 。 FAM 制 备 成 二 甲 基 二 硫
12、化 物(DMDS)衍 生 物 ,经 质 谱 测 定 给 出 m/ z 173 (C10 H21S)的 离 子 碎 片 峰 ,确 定 双 键 位 于 C214 ,C215 位 。双 键 邻 位 CH2碳 的 值 为 2717、 2715 ,故 该 双 键 为Z 型 9 。 由 上 可 知 LCB 部 分 含 有 13 个 碳 (4226223= 13) ,且 有 1 个 双 键 ,LCB 制 备 成 二 甲 基 二 硫 化 物(DMDS) 衍 生 物 , 经 质 谱 测 定 给 出 m/ z 173(C10H21S)的 离 子 碎 片 峰 ,双 键 的 位 置 和 构 型 确 定为 4 ,5。
13、双 键 邻 位 亚 甲 基 C化 学 位 移 为 3219 ,确 定该 双 键 为 E 型 9 。脑 苷 脂 类 化 合 物 的 绝 对 构 型 可 由 碳 、 氢 谱 数据 并 结 合 生 源 关 系 推 出 ,13C NMR 信 号 7011 (C21) , 5416 (C22) , 7215 (C23) , 17517 (C21 ) , 7215(C22 ) 与 构 型 为 (2 S , 3 R , 2 R ) 脑 苷 脂 的 数据 10 基 本 一 致 。 综 上 所 述 ,化 合 物 结 构 推 定 为 222 2羟 基 (2 R ,14 Z)二 十 三 酰 胺 232羟 基 2(2
14、S , 3R ,4E)2十 三 碳 烯 212O2(2D2吡 喃 葡 萄 糖 苷 (按 平 面 结构 推 测 ,未 研 究 其 立 体 结 构 ) 。 该 化 合 物 为 未 见 文献 报 道 的 新 化 合 物 ,命 名 为 罗 氏 脑 苷 D。4 理 化 及 波 谱 数 据罗 氏 脑 苷 D :白 色 无 定 型 粉 末 (氯 仿 2甲 醇 ) ,磷钼 酸 显 墨 绿 色 ,mp 109 111 , 25D - 1015 ( c0101 ,C5H5N) 。 1H NMR(C5D5N) :8140 (d ,1H , J =814 Hz ,N2H) ,5190 (m ,2H , H24 , H
15、25) ,5144 (m ,2H ,H214 ,H215 ) ,4189 (d ,1H ,J = 715 Hz ,H21 ) ,4105(H22 ) ,4121 ( H23 ) ,4119 ( H24 ) ,3190 ( H25 ) ,4152(H26 ) ,4135 ( H26 ) ,1124 ( s , nH ,长 链 CH2 ) , 0186(6H , CH3213 , CH3223 ) 。 13 C NMR ( C5 D5N) : 7012(C21) ,5416 (C22) ,7215 (C23) ,13312 (C24) ,13118 (C25) ,3219 (C26) ,22 32
16、 (其 他 碳 ) ,1415 (C213 ,23 ) ,17611 (C21 ) ,7217 (C22 ) ,3518 (C23 ) ,13015 (2C ,C214 ,15 ) ,10516 ( C21 ) ,7816 ( C23 ) ,7815 ( C25 ) ,7512 (C22 ) ,7117 (C24 ) ,6218 (C26 ) 。 HRFAB2MS( m/ z) 7651332 5 M + Na + 。 ESI2MS ( m/ z) 740M21 - ,764M + Na + 。参 考 文 献1 曹 吉 超 (Cao JC) ,李 华 (Li H) ,张 天 民 (Zhang
17、TM) ,等 . 海 星类 动 物 的 应 用 研 究 2 罗 氏 海 盘 车 生 殖 腺 中 无 机 元 素 及 氨 基酸 分 析 J .中 国 海 洋 药 物 杂 志 ( Chin J Mar Drugs) ,1995 ,17(1) :712 郭 承 华 ( Guo CH) ,曹 建 国 (Cao J G) ,宁 黔 冀 (Ning QJ) . 罗 氏 海盘 车 、 海 燕 、 金 氏 真 蛇 尾 鼠 皂 甙 的 制 备 及 性 质 鉴 定 比 较 J .中 国 海 洋 药 物 杂 志 ( Chin J Mar Drugs) ,2000 ,22(4) :2823013 Li GQ , De
18、ng ZW , Li J , et al. Chemical constituents from starfishAsterias rollestoni J .J Chin Pharm Sci , 2004 , 13 (2) : 8114 Zhan YC , Sun Y, Li W , et al . A new triterpene glycoside fromAsterias rollentoniJ .J Asia Nat Prod Res (已 接 收 ) 15 詹 永 成 (Zhan YC) , 裴 月 湖 (Pei YH) , 许 兴 友 (Xu XY) . 罗 氏海 盘 车 中 两
19、 个 新 的 脑 苷 类 化 合 物 - 罗 氏 脑 苷 B 和 罗 氏 脑 苷 CJ .天 然 产 物 研 究 与 开 发 ( Nat Prod Res Dev) ,2007 ,19 (1) :12316 詹 永 成 (Zhan YC) ,董 振 敏 (Dong ZM) ,刘 涛 (Liu T) ,等 . 罗氏 海 盘 车 的 化 学 成 分 研 究 J .中 国 药 物 化 学 杂 志 ( Chin JMed Chem) ,2005 ,15(2) :100210217 华 会 明 (Hua HM) ,程 卯 生 (Cheng MS) ,李 铣 (Li X) . 柳 穿 鱼中 神 经 酰 胺
20、 类 成 分 的 结 构 鉴 定 J .中 国 药 物 化 学 杂 志 ( ChinJ Med Chem) ,2000 ,10 (1) :5725918 Higuchi R , Inagaki M , Togawa K, et al. Isolation and structure ofcerebrosides from the sea cucumber Pentacta australis J .LiebigsAnn Chem , 1994 , 7 : 653265619 华 会 明 (Hua HM) , 裴 月 湖 (Pei YH) . 脑 苷 类 化 合 物 研 究 进 展J .沈 阳
21、药 科 大 学 学 报 ( J Shenyang Pharm Univ) , 2001 , 18(4) :29923061180 Chin J Nat Med May 2007 Vol15 No13 2007 年 5 月 第 5 卷 第 3 期10 Mikhail VV , Andrey BI , Alexandr AP ,et al. Trans2olefinic very2long2chain fatty acid in lipids of fresh2water sponges of lake baikalJ . Tetrahedron Lett , 1990 , 31 : 436724
22、370111 Chen JH , Gui GY, Liu J Y,et al , Pinelloside , an antimicrobialcerebroside from Pinellia ternate J . Phytochemistry , 2003 , 64 :90329061Rollcerebroside D :A New Cerebroside from Asterias rollestoniLIU Tao1 , ZHAN Yong2Cheng2 3 , PEI Yue2Hu31 Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co. , Ltd. , Lianyu
23、ngang 222001 ;2 Department of Chemical Engineering , Huaihai Institute of Technology , Lianyungang 222005 ;3 School of Traditional Chinese Materia Medica , Shenyang Pharmaceutical University , Shenyang 110016 , China【 ABSTRACT】 AIM :To study the chemical constituents of Asterias rollentias Bell. MET
24、HODS :The compound was separated bycolumn chromatography with silica gel , Pharmadex LH220 and reversed2phase silica gel. Its structure was identified by spectroscopicanalysis and chemical reactions. RESULTS : Its structure was indentified as 12O2 2D2glucopyranosyl2(2 S , 3 R , 4 E) 2 222 2hydroxy 2
25、(2 R ,14 Z) 2tricosenoylamino 242tridecene21 , 32diol (rollcerebroside D ) . CONCL USION :This compound is a new one.【 KEY WORDS】 Asterias rollentoni ; Rollcerebroside D【 Foundation Item】 This project was supported by the Natural Science Foundation of Jiangsu Province (BK2005045) 会 讯 第 三 届 国 际 药 物 制
26、 剂 论 坛随 着 生 命 科 学 、 分 子 药 物 学 、 材 料 科 学 及 信 息 科 学 的 迅 猛 发 展 ,各 学 科 间 交 叉 渗 透 ,药 物 制 剂 的 新 技 术 、 新 工 艺 、新 辅 料 、 新 材 料 、 新 设 备 不 断 涌 现 。 其 中 ,给 药 系 统 (Drug Delivery System , DDS) 的 研 发 已 然 成 为 制 药 行 业 发 展 最 快 的领 域 之 一 。 为 使 我 国 药 学 工 作 者 及 时 把 握 国 际 新 型 给 药 系 统 研 发 动 态 ,获 取 国 内 外 最 新 研 究 成 果 信 息 ,给 国
27、内 外 从事 新 型 给 药 系 统 研 发 的 专 业 人 员 提 供 展 示 的 平 台 ,促 进 国 际 交 流 与 合 作 ,推 动 我 国 药 学 科 学 和 医 药 工 业 健 康 发 展 ,中 国 药 学 会 定 于 2007 年 10 月 19 21 日 在 上 海 市 举 办 “ 第 三 届 国 际 药 物 制 剂 论 坛 ” 。 本 次 会 议 已 被 列 入 2007 庆 祝 中国 药 学 会 建 会 100 周 年 系 列 学 术 活 动 。主 办 单 位 :中 国 药 学 会承 办 单 位 :复 旦 大 学 药 学 院药 物 制 剂 国 家 工 程 研 究 中 心美
28、国 太 平 洋 大 学 药 学 院上 海 市 药 学 会会 议 主 题 :新 型 给 药 系 统 的 研 究 与 应 用日 期 :2007 年 10 月 19 21 日 。地 点 :上 海形 式 与 内 容采 用 大 会 报 告 、 壁 报 、 答 疑 及 探 讨 形 式 进 行 学 术 交 流 。 会 议 将 邀 请 国 内 外 知 名 专 家 作 主 题 报 告 、 全 球 给 药 系 统研 发 公 司 专 业 人 员 作 专 题 演 讲 ,并 安 排 国 内 优 秀 中 青 年 研 究 人 员 交 流 学 术 研 究 成 果 及 经 验 。参 会 对 象从 事 给 药 系 统 及 相 关 材 料 研 究 与 开 发 的 高 等 院 校 、 科 研 院 所 、 制 药 企 业 、 研 发 公 司 、 医 疗 机 构 及 其 他 相 关 医 药 领域 的 专 业 人 员 。(中 国 药 学 会 )2007 年 5 月 第 5 卷 第 3 期 Chin J Nat Med May 2007 Vol15 No13 181
