1、专题一 基因工程 高二生物强化训练1,内乡高中生物组 杨庆华,高二生物强化训练1,9.人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是（ ）A大肠杆菌 B酵母菌 CT4噬菌体 D质粒DNA,A.大肠杆菌 原核生物 除了核糖体外无其他细胞器 C.T4噬菌体 非细胞结构。 D.质粒DNA 环状DNA分子 B.酵母菌 单细胞的真菌（真核生物）有内质网和高尔基体。,11.对基因组文库的描述，不正确的是( )D文库中的全部基因可以在物种间交流,课本P10基因组文库中的部分基因可以在物种间交流,基因交流就是基因重组（不仅仅指有性生殖过程中发生的） cDNA
2、文库的基因只有编码区。通过表达载体的构建（在 其上游加启动子，下游加终止子）就可以在不同的受体细 胞中表达。即实现基因交流。而基因组文库是用限制酶剪 切然后连接上运载体然后导入受体细胞得来的。是DNA 片断，这些片断可能正好是一个完整的某基因，也有可能 是某基因的一个部分，还有可能包含有几个基因或他们的 片断等，在这里，只有那些包含完整基因的片断才能够用 于基因交流。基因组文库中的是真核生物的基因的话， 由于内含子、启动子、终止子等调控基因的存在 ，导致 其在原核生物的细胞中难以表达。,22.,A、C过程中_(可以不可以)使用同一种探针 筛选含目的基因的菌株。,目的基因和除从构建的文库中分离外
3、，还可以分别利用图中_和_为模板直接进行PCR扩增,直接复制,课本P8,18.运用现代生物技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检测实验是否成功，最方便的方法是检测棉花植株是否有( )A.抗虫基因 B.抗虫基因产物 C.新的细胞核 D.相应性状,21. （4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。,课本P14目的基因的检测和鉴定 分子水平（DNA探针 DNADNA DNARNA抗原抗体杂交） 个体水平（检验性状。可以观察、实验如抗虫（相应虫食用）、抗病（相应病原体感染）、 抗盐碱接种实验）
4、,耐盐基因,一定浓度盐水浇灌,19,DNA探针 DNADNA DNAmRNA 基因每个体细胞都有（原因？）mRNA,基因选择性表达 了才能转录得到,哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核，鸡属于鸟类。,+,_,_,20,信息：A经Mst限制酶切割后可得到长度为1.15kb 和0.2kb的两个片段其中0.2kb的片段通常无法检测到 即电泳后得到一条杂交带。 S经Mst限制酶处理后只能形成一个1.35kb的DNA片段 即电泳后得到一条杂交带。 电泳时分子的运动速率与其相对分子质量和带电荷有关 所以图2中上面的是1.35kb的，下面是1.15kb的DNA片段,选做题：,利用核酸分子杂交原理，根据图中突变基因
5、的核苷酸 序列（ACGTGTT）写出作为探针的核糖核苷酸 序列 。,UGCACAA,高二生物强化训练2,一、错别字抗原 启动子 雌性 同位素的书写 常用的：18O 14C 35S 32P二、知识点混淆 1、转基因动物作器官移植的供体 科学家正试图利用基因工程方法对猪的器官进行改造， 采用的方法是将器官供体基因组导入某种调节因子， 以抑制 抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因， 再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克 隆猪器官。,调节因子：调节基因表达与否的物质。,2. 受体细胞的选择： 微生物、动植物细胞P11微生物 大肠杆菌 枯草杆菌 土壤农杆菌（细菌）酵母菌（真菌，真核生物
6、） 动物 受精卵（因动物细胞全能性表现受限） P13 植物 受精卵 体细胞（根尖、茎尖、芽、叶肉细胞）生殖细胞 3.DNA 放射性同位素标记 常用32P荧光分子 常标记脱氧核苷酸,乳腺生物反应器：雌性动物的泌乳期才能获得，受生物性别和年龄的限制； 如果用膀胱生物反应器，可从动物尿液中提取目的基因产物则不受性别和年龄限制。,下列所示的黏性末端是由几种限制性内切酶作用产生的 ( )A. 1 B. 2 C. 3 D. 4,D,按照碱基互补配对补齐,注意：回文序列，不能只读粘性末端的序列。 窍门：根据回文序列。把下面的碱基链接上然后读出。或根据中轴线对称碱基互补性读,3. 右边甲、乙两图均为DNA测序
7、仪显示的图像， 已知甲图显示的碱基顺序为TCGAAT，则乙图显 示的碱基顺序为( ) ATCGCAC BACCGTG CATTCAG DTCCGGA,B,4. 阻止病人的致病基因传给子代的方法通常是将正常基因导入病人（ ）A体细胞的细胞质 B生殖细胞的细胞质 C体细胞的细胞核 D生殖细胞的细胞核,亲子代的桥梁是生殖细胞 导入病人生殖细胞的细胞核才能通过生殖细胞（配子） 遗传给子代。,6. 利用基因工程技术将抗旱基因转移到玉米的叶绿体中 由此获得具有抗旱性状的玉米甲，然后与原品种乙混种 在自然传粉的情况下，甲乙两品种上收获的种子发育的 植株性状表现是（ ） A.均具有抗旱性状 B.均无抗旱性状
8、C.前者具有抗旱性状，后者无抗旱性状 D.前者无抗旱性状，后者具有抗旱性状,甲,乙,前者（甲）具有抗旱性状，后者（乙）无抗旱性状,9. 为对检测结果进行描述分析，需对检测样品进行荧光标记，标记部分应是 ( )A.DNA的组蛋白 B.DNA的核苷酸 C.磷酸 D.脱氧核糖,A、DNA的组蛋白 应该是染色体的组蛋白 C、磷酸 一般用于放射性同位素（32P)标记 D、脱氧核糖 难与荧光分子结合 B、脱氧核苷酸的碱基部分能与荧光分子结合,11.下列关于基因工程及其应用的叙述正确的是( )A.若要生产转基因抗病水稻，可先将目的基因导入大肠杆菌中，再转入水稻细胞B.用氨基酸序列推测合成的目的基因与原基因的
9、编码区中的外显子一致C.常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等D.作为载体要有多种限制酶的切点，但对一种限制酶而言，最好只有一个切点。,A、大肠杆菌不能感染水稻细胞 B、除三个终止密码子外，每一个密码子对应一个氨基酸一个氨基酸有若干个密码子 C、选修P6 通常是利用质粒做载体,13. 将人工合成的DNA片段拼接在一起，所必需的酶是（ ） A .限制性核酸内切酶、RNA聚合酶 B. RNA聚合酶、DNA连接酶 C. DNA连接酶 、DNA聚合酶 D. 限制性核酸内切酶、DNA连接酶,剪切（限制性核酸内切酶）后拼接（DNA连接酶）,16. 在C端加上KDEL的内质网滞留序列，为什么可以避免胰岛素
10、在植物细胞中的降解（ ） A.使胰岛素合成后在植物高尔基体中保存，以免在细胞内被降解 B.使胰岛素合成后在植物内质网中保存，以免在细胞内被降解 C.使胰岛素分子被修饰，以免在细胞内被降解 D.改变原胰岛素的氨基酸的种类，以免在细胞内被降解,17. 基因敲除是利用基因同源重组又称基因打靶的原理， 用外源片断整合到活体细胞DNA的同源序列中，使某 个基因被取代或破坏而失活，由于同源重组具有高度 特异性和方向性，外源片断也具有可操作性，故该技 术可使细胞的基因定点和定量改变。据此推测下列哪 项与生物学事实不相符（ ） A基因敲除技术是在DNA水平对细胞遗传信息进行改造的技术 B基因敲除技术可使细胞的
11、基因定点改变的原理是基因突变 C外源片断与活体细胞DNA的同源序列的碱基对越相似；基因敲除的成功率就越高 D基因敲除技术将来有可能用到癌症的治疗,敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA重组原理，用设计好的DNA片段替换动物细胞内的基因片段，从而达到基因敲除的目的。运用基因重组进行基因敲除是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法，其基本原理如图所示。,请回答下列问题： （1）在把与靶基因序列同源的目的基因导入受体细胞前，应选择 一个合适的运载体与之结合，形成的DNA分子称为 ，在这个过程中所需的工具酶有和 。 （2）如果要获得一只含目的基因的小鼠，则
12、选择的受体细胞应该 是 。,重组DNA分子,限制酶 DNA连接酶,受精卵,请回答下列问题：（3）上述途径获得的动物，其后代是否都含目的基因。为什么？ _ 。 （4）以质粒为运载体，用同一种限制酶切割质粒和目的基因，在 切割后的运载体与目的基因连接时，连接方式有_种。 （5）上述过程实现的重组类似于减数分裂中_时期的_现象。,否，在形成生殖细胞时等位基因会发生分离,3,四分体,交叉互换,（3）上述途径获得的动物，其后代是否都含目的基因。为什么？. 。,在一对同 源染色体上,同源染色体,杂合子,否，在形成生殖细胞时等位基因会发生分离,（5）上述过程实现的重组类似于减数分裂中_时期的_现象。,四分体
13、,交叉互换,18. DNA探针能用于检测( )A地方性甲状腺肿病患者 B骨软化病患者 C乙肝患者 D缺铁性贫血病患者,乙肝是由乙肝病毒感染引起的，能利用DNA探针检测； 而地方性甲状腺肿病是由缺碘造成的， 血液中钙、磷含量降低时成年人表现为骨软化病， 缺铁性贫血病是由于缺少铁造成的，故A、C、D三项 都不能用DNA探针检测。答案 B,21.,DNA片段的黏性末端就可通过 而结合。,碱基互补配对,DNA片段的可通过 而缝合。,黏,DNA连接酶,21.,该植株细胞中含有一个携带目的基因的DNA片段，因此 可以把它看作是杂合子。,人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入_。,构建表达载体：标记基因+启
14、动子+目的基因+终止子,启动子,人工改造时用限制酶处理，其目的是： 第一，去除质粒上的 (基因)，保证TDNA 进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长； 第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利 于 ； 第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。,let和tmr,目的基因(或外源DNA)准确插入,32. 现代生物科技专题必答题 一对表现型正常的夫妇，生了一 个镰刀型细胞贫血症（常染色体 隐性遗传病）患儿。在他们欲生 育第二胎时，发现妻子的双侧输 卵管完全堵塞，不能完成体内受 精。医生为该夫妇实施了体外受 精和产前基因诊断，过程如右图。 请回答： （1）过程是指在体外进行 _的处理，从而使精
15、 子与卵子结合形成受精卵；过程 称为_。,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,精子获能,胚胎移植,32. 现代生物科技专题必答题 一对表现型正常的夫妇，生了一 个镰刀型细胞贫血症（常染色体 隐性遗传病）患儿。在他们欲生 育第二胎时，发现妻子的双侧输 卵管完全堵塞，不能完成体内受 精。医生为该夫妇实施了体外受 精和产前基因诊断，过程如右图。 请回答： （2）在对胎儿进行镰刀形细胞贫 血症的产前基因诊断时，要先 从羊水中的胎儿细胞提取物质 _进行PCR扩增。然后用 对扩增产物
16、进行切割，产生多个 片段的酶切产物。据此判断， 是一种 酶。,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,限制酶,DNA,32. 现代生物科技专题必答题 一对表现型正常的夫妇，生了一 个镰刀型细胞贫血症（常染色体 隐性遗传病）患儿。在他们欲生 育第二胎时，发现妻子的双侧输 卵管完全堵塞，不能完成体内受 精。医生为该夫妇实施了体外受 精和产前基因诊断，过程如右图。 请回答： （3）不同长度的酶切产物在电泳 时移动的速率不同，形成不同的 电泳条带。该家庭成员的镰刀型 细胞贫血症基因分
17、析的电泳带谱 如，据此判断胎儿为_ （正常/患者/携带者）。,正常,（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除_，因为后者产生的_会抑制侧芽的生长。 （2）为筛选出已转化的个体，需将T2代播种在含_的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T2代）。 （3）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T1代播种在含_的培养基上，获得所需个体。,生长素,(一定浓度的)除草剂,顶芽,(一定浓度的)盐,1,野生型,降低,DNA连接酶,突变体,B、C,（九）回答下列有关基因工程的问题。（10分） 57基因工程中使用的限制酶，其特点是 下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别，Apr表示抗青霉素的抗性基
18、因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。,58将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X1混合连接，连接后获得的质粒类型有。（可多选） AX1 BX2 CX3 DX4,特异性的识别和切割DNA,ABC,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,59若将上图所示X1、X2、X3、X4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有
19、青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有、。 60如果X1用E1酶切，产生850对碱基和3550对碱基两种片段：那么质粒X2（Tcr基因的长度为1200对碱基）用E2酶切后的片段长度为对碱基。,无质粒细胞,含X-3的细胞,4750,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,61若将外源的Tcr基因两端用E2切开，再与用E2切开的X1混合连接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示，含X4的细胞数与含X1的细胞数之比为13，增大DNA连接酶用量能否提高上述
20、比值？。原因是,不能,DNA连接酶对DNA片段没有选择性,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,33.(8分)请回答基因工程方面的有关问题：（1）利用PCR技术扩增目的基本因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物中为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历
21、年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占比例为 。在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。,15/16,三,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,（2）设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。,第一组：_ _,引物I和引物II局部发生碱基互补配对而失效
22、,引物I自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,（3）PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能反映DNA聚合酶的功能，这是因为,DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双 链DNA片段的引物链上,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。
23、本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,（4）用限制酶EcoRV、MboI单独或联合切割同一种质粒，得到DNA片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、MboI的切割位点。,（4 ）,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版权所有，不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日，汉水丑生标记。,
