1、ICS 01.140.30Z 16备案号： DB 23黑 龙 江 省 地 方 标 准DB 23/T 代替 D B 水质 烷基汞的测定 液相色谱 -原子荧光联用法（报批稿） - - 发 布 - - 实施黑 龙 江 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布DB23/T I 目 次前言 II1 范 围 12 规 范 性 引 用 文 件 13 术 语 和 定 义 14 方 法 原 理 15 试 剂 和 材 料 16 仪 器 和 设 备 27 样 品 28 分 析 步 骤 39 结 果 计 算 310 准 确 度 和 精 密 度 . 411 质 量 控 制 和 质 量 保 证 . 412 注 意 事 项
2、. 4DB23/T II 前 言本 标 准 依 据 GB/T 1.1-2009标 准 化 工 作 导 则 编 写 。 本标准由黑龙江省环境保护厅提出并归口。 本标准起草单位：黑龙江省环境监测中心站、北京吉天仪器有限公司。 本标准验证单位： 哈尔滨市环境监测中心站、 大庆市环境监测中心站、 佳木斯市环保监测站、 牡丹 江市环境监测中心站、黑河市环境监测中心站和齐齐哈尔市环境监测中心站。 本标准起草人:贾立明、伍跃辉、陈威、刘元海、姚常浩、魏庆彬、陈雯雯、孙铭阳、董英莉、冯 磊、杨宏坤、孟宪宪、牟学军、冯礼、袁惠。 DB23/T 1 水质 烷 基 汞 的 测 定 液 相 色 谱 -原 子 荧 光
3、联 用 法1 范围本 标 准 规 定 了 测 定 水 中 烷 基 汞 的 液 相 色 谱 -原 子 荧 光 联 用 法 。 本 标 准 适 用 于 地 表 水 、 地 下 水 和 废 水 中 中 烷 基 汞 （ 甲 基 汞 、 乙 基 汞 ） 的 测 定 ， 当 取 样 体 积 为 500 mL时 ， 本 方 法 甲 基 汞 的 检 出 限 为 0.6 ng/L， 测 定 下 限 为 2.4 ng/L； 乙 基 汞 的 检 出 限 为 0.9 ng/L， 测 定 下 限 为3.6 ng/L。2 规范性引用文件下列文件对于本标准的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本
4、文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。HJ/T 91 地 表 水 和 污 水 监 测 技 术 规 范HJ/T 164 地 下 水 环 境 监 测 技 术 规 范3 术语和定义3.1烷基汞甲基汞和乙基汞的统称。 4 方法原理采用固相萃取柱对水样中的烷基汞进行富集处理， 经洗脱后， 提取液用液相色谱柱分离， 原子荧光 光谱仪分析检测。 5 试剂和材料除 另 有 说 明 外 ， 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯 ， 实 验 用 水 应 符 合 GB/T 6682中 二 级 水 的 规 定 。 液 相 色 谱 流 动 相 所 用 溶 剂 均 经 过 0.45m滤
5、 膜 过 滤 。试剂材料如下：a) 乙 腈 ： HPLC 级。b) 甲 醇 ： HPLC 级。c) 盐 酸 ： （ HCL） =1.19 g/mL 优级纯。d) 乙 酸 铵 (CH3COONH4)： 分 析 纯 。e) L-半 胱 氨 酸 ： 生 物 纯 。f) 氢 氧 化 钾 （ KOH） ： 分 析 纯 。DB23/T 2 g) 硼 氢 化 钾 （ KBH4） ： 分 析 纯 。 h) 过 硫 酸 钾 （ K2S2O8） :分 析 纯 。 i) 硫脲：分析纯。j) 二 乙 基 二 硫 代 氨 基 甲 酸 钠 （ DDTC） :分 析 纯 。k) 流动相： 5%乙腈 （V /V） +0.46
6、2%乙酸 铵+0. 12%L-半胱氨酸。 准确称量 50 mL 乙腈 （a ） ， 0.462 g 乙 酸 铵 （ d） ， 0.12 g L-半 胱 氨 酸 （ e） 至 1L 容 量 瓶 ， 加 水 定 容 并 混 匀 。 经 溶 剂 过 滤 器 过 滤 后 ， 于超声波清洗器中超声 20 min， 除 去 气 泡 。l) 还 原 剂 ： 0.5%氢 氧 化 钾 +1.5%硼 氢 化 钾 。 称 取 5.0 g 氢 氧 化 钾 （ f） 溶 于 少 量 水 中 ， 再 称 取 15.0 g硼 氢 化 钾 （ g） 溶 解 于 水 中 ， 混 匀 ， 定 容 至 1 L， 聚 乙 烯 瓶 保
7、 存 。m) 氧 化 剂 ： 0.5%氢 氧 化 钾 +1%过 硫 酸 钾 。 称 取 取 5.0 g 氢 氧 化 钾 （ f） 和 10 g 过 硫 酸 钾 （ h） 溶 解 于水中，混匀，定容至 1 L，聚乙烯瓶保存。n) 改性剂： 0 .05%二 乙 基 二 硫 代 氨 基 甲 酸 钠 。 称 取 0.05 g 二 乙 基 二 硫 代 氨 基 甲 酸 钠 （ j） 溶 解 于 水中并定容至 100 mL。o) 洗脱液： 5 %硫 脲 +0.5 盐 酸 +1%乙 腈 ： 称 取 5.0 g 硫 脲 （ i） ， 0.5 mL 盐酸（c）和 1.0 mL 乙腈（ a） 溶 解 于 水 中 并
8、 定 容 至 100 mL。p) 10%甲 醇 ： 准 确 移 取 10.0 mL 甲醇（b）至 100 mL 容量瓶中，加水定容，摇匀备用。q) 载 流 ： 7%盐 酸 ： 移 取 70 mL 盐酸（c）用纯水定容至 1 L。r) 标准贮备液：购置市售有证标准物质，甲醇为溶剂。s) 标准使用液：分别取适量的甲基汞、乙基汞标准贮备液至 100 mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释至 刻 度 ， 配 制 成 甲 基 汞 、 乙 基 汞 均 为 1 mg/L 的 混 合 标 准 溶 液 ， 4 保 存 ， 备 用 。 若 标 准 贮 备 液 浓 度不宜直接配制标准使用液时，必须逐级稀释至标准使用液浓度。t
9、) 载气：氩气 纯度 99.999%。u) 0.45m 一 次 性 聚 四 氟 乙 烯 （ PTFE） 微 孔 滤 膜 ， 水 系 。v) 固相萃取小柱：C 18 固 相 萃 取 小 柱 。6 仪器和设备仪器和设备如下：a) 液 相 色 谱 -原 子 荧 光 联 用 仪 。b) 超声波清洗器。 c) 固相萃取装置。 d) 抽滤装置。e) 一般实验室常用仪器和设备7 样品7.1 样品的采集和保存水样经 0.45 m 滤膜过滤后存储于塑料瓶中 2 5 条 件 下 保 存 。注：取样、制样及保存过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量变化。7.2 样品前处理分别取 5 mL 洗 脱 液 、 5 mL
10、 甲醇和 5mL 水活化 SPE 萃 取 小 柱 ， 2 mL 改 性 液 过 柱 ， 4 mL 水 冲 洗 ， 保 持萃取柱湿润的前提下富集 500 mL 水样，4 mL 洗脱液洗脱收集于进样瓶中，密封保存备用。DB23/T 3 28 分析步骤仪 器 参 考 条 件 ：a） 形态分析预处理装置条件b)泵 速 ： 60 R/min；c)色 谱 柱 ： C18 柱 150 mm4.6 mm（ i.d） ， 5 um； d） 流速：1 mL/min；e)进 样 体 积 ： 100 uL。 f)原 子 荧 光 参 考 条 件 g)总 电 流 ： 30 mA； h)负 高 压 ： 280 V； i)载
11、 气 流 速 ： 300 mL/min； j)屏 蔽 气 流 速 ： 600 mL/min。8.1 标准曲线的绘制分别准确量取标准使用液 0 L、 200 L、 400 L、 600 L、 800 L、 1000 L 于容量瓶中，实验用水 定容至 100 mL。 配 制 成 甲 基 汞 和 乙 基 汞 浓 度 分 别 为 0 g/L、 2 g/L、 4 g/L、 6 g/L、 8 g/L、 10 g/L 的 混合标准溶液，分别吸取 100 L 上 述 混 合 标 准 系 列 溶 液 按 8 的 仪 器 条 件 直 接 上 级 测 定 ， 以 峰 面 积 对 浓 度 （ g/L） 作 线 性 回
12、 归 分 析 。8.2 空白试验用实验用水代替水样，按与样品相同的步骤进行前处理和测定。8.3 样品分析吸取100 L经 7.2预 处 理 的 样 品 按 8的 仪 器 参 考 条 件 直 接 上 机 测 定 。9 结果计算以保留时间定性， 待测样品中烷基汞色谱峰的保留时间与标准溶液的保留时间相比变化范围在 5% 之内。采用外标法定量，按照公式（1）计算。C ( y b) V .（1）式中：a V 1C 水 样 中 甲 基 汞 或 乙 基 汞 的 浓 度 （ g/L） （ 以 Hg计 ） ；y 甲 基 汞 或 乙 基 汞 峰 面 积 （ mVs） ；a 标准曲线斜率；b 标准曲线截距；V1 水
13、 样 体 积 （ mL） ；V2 水样浓缩后体积 （ mL） 。10 准确度和精密度4 DB23/T 10.1 精密度测定在样品中分别加入一定量的甲基汞和乙基汞标准溶液而制得水样 1 和 水样 2， 由 6 个实验室分别对其进行 6 次 测 定 ， 水 样 1 实 验 室 内 甲 基 汞 和 乙 基 汞 相 对 标 准 偏 差 为 ： 5.5% 8.6%， 4.8% 8.4%； 实 验 室间甲基汞和乙基汞相对标准偏差为： 1.7%， 14.7%； 重复性 限甲基汞和乙基汞为： 1.26 ng/L、 1.06 ng/L； 再现性甲基汞和乙基汞为： 3.46 ng/L， 1.78 ng/L。 水
14、样 2 实验室内甲基汞和乙基汞相对标准偏差为： 3.0% 11.3%， 3.3% 7.8%； 实 验 室 间 甲 基 汞 和 乙 基 汞 相 对 标 准 偏 差 为 ： 9.1%、 7.9%； 重 复 性 限 甲 基 汞 和 乙 基 汞 为 ： 1.46 ng/L， 1.78 ng/L； 再 现 性 限 甲 基 汞 和 乙 基 汞 为 ： 11.2 ng/L， 4.91 ng/L。10.2 准确度测定在样品中分别加入一定量的甲基汞和乙基汞标准溶液而制得水样 1 和 水样 2， 由 6 个实验室分别对其进行 6 次 加 标 回 收 测 定 ， 水 样 1 加标回收率甲基汞和乙基汞在 77.2%
15、100.6%， 60.8% 96.5%； 加 回收率最终值甲基汞和乙基汞为 84.1%6.9%， 85.3%11.9%。 水 样 2 加 标 回 收 率 甲 基 汞 和 乙 基 汞 在 76.2% 106.6%， 66.8% 86.5%； 加 标 回 收 率 最 终 值 甲 基 汞 和 乙 基 汞 为 88.2%6.9%， 75.4%11.9%。11 质量控制和质量保证11.1 每测定 20 个 样 品 要 测 定 一 个 实 验 室 全 程 序 空 白 ， 全 程 序 空 白 的 测 试 结 果 要 小 于 方 法 检 出 限 。11.2 每批次样品至少测定 10%样 品 加 标 ， 当 样 品 小 于 10 个 时 ， 至 少 测 定 一 个 加 标 样 ， 加 标 回 收 率 应 控制在 60% 120%之 间 。11.3 每批样品至少测定 10%的 平 行 双 样 ， 样 品 数 量 小 于 10 个 时 ， 至 少 测 定 一 个 平 行 双 样 ， 测 试 结 果 相对偏差不大于 20%。12 注意事项12.1 流动相在使用前需经 0.45 um 水系膜过滤后超声 30 min 脱气；12.2 混合标准溶液需在使用前配置，现用现配；12.3 所有使用的玻璃仪器均需使用 5%盐 酸 浸 泡 24 小 时 以 上 。
