1、1,实验五 土壤中微生物的分离,2,实验目的,掌握从样品中分离不同种类的微生物,并进行活菌计数 巩固无菌操作的方法,3,单位时间里微生物数量或生物量(Biomass)的增加。,微生物生长:,微生物生长的测定:,个体计数 群体重量测定 群体生理指标测定,评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响;,评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果;,客观地反映微生物生长的规律;,4,第一节 微生物生长的测定,以数量变化对微生物生长情况进行测定,通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况 或样品中所含微生物个体的数量(细菌、孢子、酵母菌),培养平板计数法,5,采用培养平板计数法要求操作
2、熟练 、准确,否则难以得到正确的结果:,样品充分混匀;,每支移液管及涂布棒只能接触一个 稀释度的菌液;,同一稀释度三个以上重复,取平均值;,每个平板上的菌落数目合适,便于 准确计数;,一个菌落可能是多个细胞一起形成,所以在科研中一般用 菌落形成单位(colony forming units, CFU)来表示,而 不是直接表示为细胞数。,6,实验步骤,将10g土样装入含100ml无菌水的锥形瓶中振荡10min 取1ml移入含9ml无菌水的试管中,吹吸均匀,为稀释10倍的样品 依次进行梯度稀释 倒培养基 取合适稀释度的样品1ml涂布,7,实验安排,10-510-610-7稀释度为细菌培养 牛肉膏蛋白胨培养基 10-310-410-5 稀释度为放线菌培养,注意培养基在倒入平板前先加入数滴重铬酸钾溶液 高氏一号培养基 10-210-310-4稀释度为真菌培养 马丁氏培养基,