1、ICS65.020.20 B16备 案 号 ： 37011-2013 DB32江 苏 省 地 方 标 准DB32/T 2234-2012小麦抗全蚀病鉴定方法与抗性评价 技术规程Rules for resistance evaluation of wheat to take-all disease2012-12-28 发布 2013-02-28 实施江 苏 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布 DB32/T 2234-2012前 言为规范江苏省小麦品种抗全蚀病的鉴定方法及评价技术制定本标准。本 标 准 按 GB/T1.1-2009 标 准 化 工 作 导 则 第 1部 分 ： 标 准 的 结
2、构 和 编 写 的 规 定 编 写 。 本标准由江苏省农业科学院提出。本标准起草单位：江苏省农业科学院。 本标准起草人：陈怀谷、李伟、王宁。DB32/T 2234-20121小 麦 抗 全 蚀 病 鉴 定 方 法 与 抗 性 评 价 技 术 规 程1 范围本标准规定了小麦抗全蚀病鉴定方法和抗性评价的病原物接种体制备、 抗性鉴定方法、 病情分级和 抗性综合评价标准。本标准适用于小麦对全蚀病抗性的鉴定和评价。2 病 原 物 接 种 体 制 备2.1 接 种 菌 株 的 分 离从 小 麦 全 蚀 病 发 病 田 采 集 病 株 ， 取 小 麦 病 根 ， 剪 成 5 mm 左 右 的 片 段 ， 用
3、 1% (w/v) AgNO3 溶 液 表 面 消毒 1 分 钟 后 ， 无 菌 水 浸 洗 3 次 ， 转 入 含 有 0.1% (w/v) 链 霉 素 的 PSA (马 铃 薯 200 g， 蔗 糖 20 g， 琼 脂 20 g， 加 去 离 子 水 至 1000 mL) 平 板 上 ， 25C 培养，挑取菌落边缘菌丝尖端再培养，纯化后的菌株 置于 PSA 斜 面 4C 保 存 。 分 离 物 经 形 态 学 和 分 子 生 物 学 鉴 定 等 确 认 为 Gaeumannomyces graminis var. tritici 后 ， 进 行 菌 尖 纯 化 。 通 过 小 麦 幼 苗
4、期 致 病 性 测 定 ， 筛 选 强 致 病 力 菌 株 ， 冷 冻 保 存 备 用 。 所 用 菌 株需隔年进行致病力测定。2.2 小 麦 全 蚀 病 菌 接 种 体 制 备接种所用分离物应为当地致病力强的分离物。 室内接种鉴定的接种体为菌丝块， 田间接种鉴定的接 种体为带菌麦粒。2.2.1 菌 丝 块 接 种 体 制 备将 保 存 的 全 蚀 病 菌 菌 丝 接 种 到 马 铃 薯 蔗 糖 琼 脂 平 板 上 ， 25 培 养 4 5d， 使 菌 落 长 至 平 板 的 3/4。2.2.2 病 麦 粒 接 种 体 制 备将 麦 粒 在 室 温 下 浸 泡 24h， 沥 干 后 ， 装 入
5、 三 角 瓶 中 ， 在 121 下 灭 菌 1h， 冷 却 后 备 用 。 将 小 麦 全 蚀 病 的 菌 丝 块 接 种 于 麦 粒 培 养 基 中 ， 在 23 25 下 黑 暗 培 养 15 20d， 菌 丝 布 满 麦 粒 后 ， 将 麦 粒 从 三 角 瓶 中取出，室温下晾干备用。3 抗 病 性 鉴 定3.1 盆 栽 鉴 定3.1.1 播种盆 钵 （ 口 径 16高 12cm） 底 至 高 2/3 处 铺 蛭 石 ， 在 表 面 均 匀 对 称 接 10 个 5mm 菌 碟 ， 加 蛭 石 覆 盖 ， 厚度约 2cm。 均 匀 播 颗 露 白 麦 种 25 粒 ， 加 蛭 石 (或
6、沙) 将 种 子 覆 盖 。抗病品种对照采用太空 6 号 、 中 等 感 病 品 种 对 照 采 用 矮 抗 58。3.1.2 培 养 条 件播种后，将盆钵置于温度为 15 25C、 湿 度 80%以上的温室内培养，并使蛭石保持湿润。3.1.3 病 情 调 查病情调查于小麦播种后 21d 进行 。 调 查时将整盆植株连带蛭石浸泡于清水中， 小心清洗干净， 尽量DB32/T 2234-20122保证植株根部完整。根据病害症状描述，调查和记载每个植株的病害严重度。3.2 人 工 病 圃 鉴 定人工病圃选择具备良好的自然发病环境和灌溉条件、 地势平坦、 砂性土壤的地块。 鉴定圃内不施用 任何杀菌剂。
7、人 工 病 圃 鉴 定 小 区 畦 宽 2.5 m， 每 鉴 定 品 种 种 植 1 行 ， 行 长 1m， 行 距 0.3 m， 每 隔 20 个 品 种 设 1 组抗感对照，重复 2 次 。 在 播 种 沟 内 均 匀 撒 病 麦 粒 25 100 g/ ， 然 后 播 种 盖 土 。 病 圃 内 土 壤 肥 力 水 平和耕作管理与大田生产相同，不施用任何杀菌剂。抗病品种对照采用太空 6 号 、 中 等 感 病 品 种 对 照 采 用 矮 抗 58。 小麦的播种时间与大田生产一致， 或适当调整播期以使植株接种期和发病期能够与适宜的气候条件（湿度与温度）相遇。3.2.1 病 情 调 查人 工
8、 病 圃 鉴 定 在 小 麦 穗 期 进 行 病 情 调 查 。 每 份 鉴 定 材 料 每 行 取 20 株 小 麦 ， 根 据 病 害 症 状 描 述 ， 逐 株进行调查并记载病情级别。 调查时用铁锹等将整株小心挖出， 使根系保持完整， 在水中清洗干净， 在 白色背景下调查根系发病情况。4 病情分级4.1 盆 栽 鉴 定 病 情 分 级盆栽鉴定病情严重度分级及其对应的症状描述见表 1。表 1 盆 栽 鉴 定 小 麦 全 蚀 病 病 情 级 别 划 分 及 其 症 状 描 述严重度分级 症 状 描 述0 无可见发病症状1 病根数占总根数10%3 病根数占总根数 10%50%5 病根数占总根数
9、 50%100%7 病根数占总根数 100%，茎基部变褐，植株黄化矮化9 植株死亡4.2 人 工 病 圃 鉴 定 病 情 分 级人工病圃鉴定严重度分级及其对应的症状描述见表 3。表 2 人 工 病 圃 鉴 定 小 麦 全 蚀 病 病 情 级 别 划 分 及 症 状 描 述严重度分级 症 状 描 述0 无可见发病症状1 发 病 根 系 面 积 占 根 系 总 面 积 25%3 发病根系面积占根系总面积 25%50%5 发 病 根 系 面 积 占 根 系 总 面 积 50%7 茎基部变褐，植株黄化矮化9 出现枯白（孕）穗4.3 病 情 指 数 计 算盆栽鉴定和人工病圃鉴定采用相同的病情指数计算公式
10、。 当严重度用分级代表值表示时， 病情指数 计算按公式（1）：DB32/T 2234-20123DI nX i ai i1 100% （ 1）X i amax式中： DI：病情指数；Xi：病害分级标准各级级值； ai：各级严重度的调查单元数； Xi：调查单元总数；amax：最高级值。5 抗性评价当感病对照材料达到其相应感病程度（3 级以上），该批次抗全蚀病鉴定视为有效。根据供鉴材料 和感病对照的病情指数，计算供鉴材料的相对抗性指数，相对抗性指数计算按公式（2）：RRI=lnDIm/(100-DIm)lnDIck/(100-DIck)（ 2）式中： DIm：供鉴材料病指； DIck：对照病指。小
11、 麦 对 全 蚀 病 抗 性 评 价 标 准 见 表 3表 3 小 麦 对 全 蚀 病 抗 性 评 价 标 准相对抗病指数 抗性评价-1.20 高抗（R）-0.7 中抗（MR）0 低抗（LR）0 低感（LS）0.9 中感（MS）2.0 高感（HS）6 抗 性 综 合 评 价6.1 抗 性 评 价依 据 鉴 定 材 料 在 盆 栽 和 人 工 病 圃 中 发 病 程 度 综 合 确 定 其 对 全 蚀 病 的 抗 性 水 平 ， 在 盆 栽 和 人 工 病 圃 鉴定的结果不一致时， 以人工病圃鉴定的结果为准。 人工病圃鉴定结果的两次重复中， 以病情指数高的 为准。6.2 重 复 鉴 定初次鉴定中
12、表现为高抗、 中抗的材料， 次年用相同的病原菌进行重复鉴定。 当两年抗性鉴定结果不 一致时，以记载的严重病情级别为准。7 鉴 定 记 载 表 格小麦抗全蚀病鉴定原始记录及结果记载表格格式见表 4。 抗 性 鉴 定 记 录 保 存 2 年。DB32/T 2234-2012表 4 年 小 麦 抗 全 蚀 病 鉴 定 原 始 记 录 及 结 果 记 载 表 （ 式 样 ）盆 栽 鉴 定 人 工 病 圃 鉴 定病情级别及病情指数 病情级别及病情指数编号 品种名称 来 源1级 3级 5级 7级 9级 病情指数 抗性评价 1级 3级 5级 7级 9级 病情指数 抗性评价抗 性 总 评注 1: 鉴定地点 地势注 2: 接种病原菌分离物编号注 3: 接种日期 调查日期注 4: 播种日期鉴定技术负责人（签字）：4
