1、血红蛋白的生物学特性摘 要 有研究表明,血红蛋白不仅具有运输氧和二氧化碳的功能,而且还具有储存能量、维持血液渗透压和血压、调节血浆酸碱平衡、抗菌、类氧化酶和过氧化酶活性的作用,属于多功能蛋白。血红蛋白已成为研究蛋白质多重生物学功能的理想模式分子。关键词 血红蛋白 生物学功能中图分类号:Q74 文献标识码:A动物在呼吸时,氧气和二氧化碳都要由血液内的特殊运载蛋白来运输。这类参与动物呼吸作用的蛋白质家族统称为呼吸蛋白。Hb 是呼吸蛋白家族的成员之一。Hb 的主要功能是运输氧和二氧化碳,近年的研究表明,Hb 还具有储存能量、维持血液渗透压和血压、调节血浆酸碱平衡、抗菌、类氧化酶和过氧化酶活性的作用,
2、属于多功能蛋白。Hb 已成为研究蛋白质多重生物学功能的理想模式分子。1 Hb 的结构特点血红蛋白(hemoglobin,Hb)是生物体内负责运载氧的蛋白质,也是红细胞中唯一一种非膜蛋白。Hb 由四个亚基构成,每个亚基由一条肽链和一个血红素分子构成,肽链在生理条件下盘绕折叠成球形结构称之为珠蛋白,珠蛋白把血红素分子抱在里面。血红素是一个具有卟啉结构的小分子,在卟啉分子中心,由卟啉中四个吡咯环上的氮原子与一个 Fe2 配位结合,珠蛋白肽链中第 8 位的组氨酸残基中的吲哚侧链上的氮原子从卟啉分子平面的上方与 Fe2 配位结合,Fe2 居于环中,Fe2 的 6 个配位键中有 4 个与吡咯环的 N 配位
3、结合,1 个与近端的 HisF8结合,第 6 个用来结合 O2 等外源性配体 ,未结合配体时该配位键是空的,故生理状态下 Hb 的血红素-铁是“五配位”形式。当 Hb 不结合氧分子时,就有一个水分子从卟啉环下方与 Fe2 配位结合,4 个珠蛋白亚基之间的相互作用力很强,因此没结合氧的血液呈淡蓝色。当 Hb 与氧结合时,则一个氧分子就顶替了水分子的位置形成氧合血红蛋白(HbO2),使血液呈鲜红色。每个珠蛋白结合 1 个血红素,其 Fe2 可逆地结合 1 个氧分子。因 Hb 所含亚基不同可将其分为不同的亚型 ,人体发育的不同阶段,红细胞内所含的血红蛋白亚型也不同。正常人出生后有血红蛋白 A( 2
4、2)、血红蛋白 A2( 2 2)、胎儿血红蛋白( 2 2)三种类型。2 血红蛋白基因的表达及进化血红蛋白基因属于奢侈基因,是指导合成组织特异性蛋白的基因。Hb 的不同肽链是由不同的遗传基因控制的。每个珠蛋白分子有二对肽链,一对是 链由 141 个氨基酸残基构成,含较多组氨酸,其中 87 位(即 F8)的组氨酸与血红素铁结合 ,另一对是非 链,有 、 、 、 及 5 种。 链含 146 个氨基酸残基、 93 位的半胱氨酸易被氧化产生混合二硫化物及其它硫醚类质,可降低 Hb 稳定性。 链由 146 个氨基酸残基组成,仅有 10 个氨基酸与 链不同。 链虽由 146 个氨基酸组成,但与 链有 39
5、个氨基酸不同,且含有 4 个异亮氨酸,为 、 与 链所缺。人类编码 珠蛋白的基因位于第 16 号染色体短臂(16p13.3),每条染色体上有 2 个 基因 1 和 2; 珠蛋白基因位于第 11 号染色体短臂 1 区 2 带(11p1.2)。 和 珠蛋白基因位于第 11染色体的 11p13 和 11pter 中间, 、 、 呈连锁关系。现在普遍认为原始血红蛋白基因与藻蓝素基因共同起源于同一始祖血蛋白基因,通过内含子的插入、滑链错配和缺失等不同机制逐渐演化出更多的血红蛋白基因。植物、动物共同的血红蛋白基因继续分别进化为植物血红蛋白基因和动物血红蛋白基因。动物血红蛋白基因有些丢失中心内含子进化为节肢
6、动物血红蛋白基因,某些节肢动物的血红蛋白基因通过编码区的改变和调控区的变化继续进化成脊椎动物的、等球蛋白基因。3 血红蛋白的生物学功能Hb 除具有运输 O2 和 CO2 的功能外,还具有运输硫化物、调节血浆酸碱平衡、维持血浆渗透压和血压、抗菌免疫等多种生物学功能,是目前研究最多的呼吸蛋白分子。3.1 Hb 的载氧功能Hb 的载氧功能与其亚基结构的 2 种状态有关。在含氧丰富的肺中,亚基结构呈松弛状态(R 状态),O2 极易与血红素结合成 HbO2,HbO2 将氧运载至需氧组织;在缺氧组织中,亚基处于紧张状态(T 状态), 血红素不能与氧结合,HbO2 快速解离, 将 O2 释放。Hb 与 O2
7、 结合的过程是一个非常神奇的过程。首先一个 O2 与 Hb 的一个亚基结合 ,与 O2 结合之后的珠蛋白结构发生变化,引起整个 Hb 结构的变化,这种变化使第二个 O2 更容易与 Hb 的另一个亚基结合,以此类推直到构成 Hb 的四个亚基分别与四个 O2 结合。而在组织内释放氧的过程也是这样,一个 O2 的离去会刺激另一个 O2 的离去,直到完全释放所有的 O2,这种现象称为协同效应。血红素分子结构由于协同效应,Hb 与 O2 的结合曲线呈 S 形,在特定范围内随着环境中氧含量的变化,其结合率有一个剧烈变化的过程,生物体内组织中的氧浓度和肺组织中的氧浓度恰好位于这一突变的两侧,因而在肺组织,H
8、b 可以充分地与 O2 结合,在体内其它组织处则可以充分地释放所携带的 O2。当环境中的氧含量过高或过低的时,氧结合曲线却非常平缓,Hb 与 O2 的结合率没有显着变化,因此健康人即使呼吸纯氧 ,血液运载氧的能力也不会有显着的提高,从这个角度讲,对健康人而言吸氧所产生心理暗示要远远大于其生理作用。3.2 Hb 的维持血压功能研究发现,Hb 在通过血液运输氧的同时 ,可以释放自身产生的 NO 来补充因代谢而失去的 NO。NO 能扩张毛细血管 ,控制毛细血管内的血流量 ,起到稳定血压的作用。Hb 所释放的 NO 具有一股“ 冲刺力” 的作用,能够帮助 O2 到达人体的各种组织,并且这种 NO 又能
9、帮助Hb 清除 CO2 等废物。3.3 Hb 的抗菌免疫功能法国学者 Nedjar-Arroume 等利用纯化的 Hb 片段研究发现,Hb 片段对大肠杆菌、肠炎沙门氏菌、藤黄微球菌 A270 和无毒李斯特菌具有明显的抑菌活性 。新加坡学者 Jiang 等 研究发现 Hb 能有效抗金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌等细菌,具有杀灭致病细菌的作用。周新娥 等在大鼠体内的试验证明,人 Hb 及其片段具有体外抑制细菌的作用, 而且 Hb 在大鼠体内能减轻大肠杆菌感染炎症的程度。免疫学认为,当人体受到细菌入侵时,首先启动细胞免疫,即在识别异己的基础上,调动免疫细胞杀死入侵细菌。细胞免疫反应涉及多个步骤,需要很
10、长时间才能完成。近年研究发现,当人体与入侵微生物作战时,红细胞内的 Hb 会释放出活性氧,活性氧能迅速杀死入侵的致病微生物。并且,病原体越厉害, Hb 产生的活性氧就越多。虽然 Hb 自动氧化率很低 , 但是产生活性氧的能力很强,这可能与超氧化物岐化酶的活性有关。Kawano 等研究发现当 Hb 自动氧化成高铁血红蛋白时,具有一种类过氧化物酶的活性,能催化产生超氧阴离子,进而产生有毒的衍生物,如羟基自由基等起到灭菌的作用。Decker 等认为 ,动物机体可任意利用入侵微生物的毒力因子,使自身的 Hb 自动氧化而获得强力的制造活性氧的能力, 产生大量的活性氧介导抗菌功能, 有效地杀灭入侵微生物。
11、并认为这一直接抗菌机制的存在可能已超过了 50 亿年并不断地被强化。活性氧对抑制能产生胞外蛋白酶等毒力因子的有毒细菌十分有效,即便某些病原菌对抗生素产生了抗药性,但仍有可能被 Hb 产生的活性氧所杀死。 Hb 抑菌功能的发现对临床治疗已产生抗生素抗药性的病原菌尤为重要。Hb 已被学术界认为是动物体内的一种重要的免疫分子。3.4 Hb 能维持血浆渗透压稳定Hb 能维持血浆酸碱平衡和渗透压稳定 ,具有波尔效应。Hb 分布于血浆和血细胞内,在血细胞内的 Hb 分子量较小,一般在 2 万至 12 万,而血浆中的 Hb 分子量较大,从 40 万至几百万。溶解血浆中的 Hb 大分子实际上是由 Hb 分子聚
12、集而成的 ,血浆中溶解的大分子数目增加使血浆胶体渗透压增加,而胶体渗透压增加会影响组织液的生成及肾脏的滤过作用等,起调节血浆渗透压的作用。4 结语和展望Hb 等呼吸蛋白的主要功能是运载 O2,但基因结构的变异导致 Hb 等呼吸蛋白的结构多变并衍生出更多的功能,成为多功能蛋白。随着 Hb 等呼吸蛋白的抗菌免疫能力以及类氧化酶、过氧化酶活性等多种功能的不断发现,越来越引起研究者的兴趣。今后,对 Hb 的研究将着重探索其新功能及作用机理,尤其是在非特异性免疫反应中所发挥的作用。对 Hb 的深入研究,将有助于拓展人们对 Hb 所肩负的多重生物学功能的认知,也可为人们开发抗菌、抗病毒药物提供新的思路。注释 汪青,项荣花,包永波 ,林志华.动物血红蛋白研究进展J.宁波大学学报(理工版),2011.24(2):20-24. 王镜岩 ,朱胜庚,徐长法.生物化学( 上册)M. 北京:高等教育出版社,2002:257-270. 周新娥,欧阳运薇,潘小玲 ,等.人血红蛋白及其片段体内外抗菌活性研究J. 四川大学学报:医学版,2008.39(3):355-359. 张亚南,樊廷俊 ,徐彬,荆昭.动物呼吸蛋白的研究进展J.山东大学学报(理学版),2009.44(9):1-5. 郭祖宝 .动物体内呼吸色素的种类及其分布J. 生物学教学,2006.31(1):64.
