1、ICS 65.020.20 B31备 案 号 ： 44814-2015 DB32江 苏 省 地 方 标 准DB32/T 2736-2015铁 皮 石 斛 无 菌 播 种 苗 生 产 技 术 规 程Technical code for producing aseptic seedlings of Dendrobium officinale kimura et Migo2015 - 02 - 15 发布 2015 - 04 - 15 实施江 苏 省 质 量 技 术 监 督 局 发 布DB32/T 2736-2015I前 言本 标 准 按 GB/T1.1-2009 标 准 化 工 作 导 则 第 1
2、部 分 ： 标 准 的 结 构 和 编 写 编 制 。 本 标 准 由 苏 州 神 元 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司 提 出 。 本 标 准 起 草 单 位 ： 苏 州 神 元 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司 、 苏 州 市 铁 皮 石 斛 研 究 院 。 本 标 准 起 草 人 ： 滕 士 元 、 史 骥 清 、 郭 传 敏 、 赵 锋 、 时 剑 、 孙 贺 、 王 译 、 侯 森 广 、 张 琳 琳 。DB32/T 2736-20151铁皮石斛无菌播种苗生产技术规程1 范围本标准 规定 了铁 皮石 斛无 菌播种 苗生 产环 境的 消毒 灭菌 、 培 养基 配制 、 培养
3、 条 件调控 、 无菌 播种 苗 生 产 工 艺 流 程 ， 以 及 商 品 苗 的 质 量 分 级 、 包 装 、 运 输 等 。本 标 准 适 用 于 铁 皮 石 斛 无 菌 播 种 苗 的 生 产 。2 规 范 性 引 用 文 件下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的 。 凡是 注日 期的引 用文 件 ， 仅 注日 期的 版本适 用于 本文 件 。 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。NY/T 2306-2013 花 卉 种 苗 组 培 快 繁 技 术 规 程LY/T 1882-2010
4、 林 木 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程3 术 语 和 定 义本 标 准 采 用 下 列 定 义 。3.1铁 皮 石 斛 无 菌 播 种 苗 aseptic seedlings of Dendrobium officinale kimura et Migo以 铁 皮 石 斛 成 熟 蒴 果 的 种 子 通 过 组 织 培 养 方 法 ， 在 培 养 基 上 进 行 无 菌 播 种 、 培 养 获 得 的 种 苗 。3.2萌 发 培 养 culture of germination从 种 子 播 种 ， 萌 发 出 新 叶 的 培 养 过 程 。3.3生 长 培 养 culture of
5、 growth萌 发 培 养 结 束 ， 将 幼 苗 稀 开 转 接 至 生 长 培 养 基 ， 形 成 植 株 的 培 养 过 程 。3.4生 根 培 养 culture of rooting生 长 培 养 结 束 ， 将 幼 苗 再 一 次 稀 开 转 接 至 生 根 培 养 基 ， 形 成 根 系 ， 成 为 成 品 苗 的 培 养 过 程 。4 生 产 场 地 与 设 备按 照 NY/T 2306-2013中 的 规 定 执 行 。DB32/T 2736-201525 容 器 和 器 械 清 洗容 器 采 用 650ml兰 花 组 培 瓶 。 清 洗 按 照 NY/T 2306-201
6、3中 的 规 定 执 行 。6 培 养 基 配 制 和 贮 存按 照 NY/T 2306-2013和 LY/T 1882-2010中 的 规 定 进 行 。 其 中 固 化 剂 （ 琼 脂 等 ） 可 以 采 用 粉 末 状 ， 不 需 先 加 热 溶 化 ， 和 其 它 配 制 溶 液 混 合 均 匀 ， 在 分 装 机 内 定 容 后 ， pH调 整 至 5.75.8。 边 均 匀 搅 拌 、 边 分 装。7 灭 菌 、 接 种 、 培 养 室 操 作按 照 NY/T 2306-2013中 的 规 定 执 行 。8 无 菌 播 种 苗 生 产 流 程8.1 无 菌 播 种 苗 生 产 流
7、程 图参 见 附 录 A。8.2 蒴 果 的 采 集 及 处 理8.2.1 采 集 地 选 择采 集 地 周 围 1km范 围 内 应 无 其 它 种 类 石 斛 。8.2.2 采 收 和 保 存经自然 或人 工授 粉后 ， 蒴 果开始 转黄 时 ， 选 择饱 满 的果实 连茎 一起 采收 ， 采 收后放 于阴 凉干 燥处 备 用。8.2.3 蒴 果 处 理取完整 的蒴 果在 超净 工作 台上切 除果 柄和 花蒂 ， 按 照NY/T 2306-2013中 的规 定执行 灭菌 。 灭菌 后 的 蒴 果 在 超 净 台 上 晾 干 ， 当 天 播 种 。8.3 萌 发 培 养将灭菌 的蒴 果 ，
8、置 于无 菌 滤纸上 ， 在蒴 果花 蒂端 切 开一小 口 ， 用 镊子 夹住 花 柄端在 培养 瓶瓶 口轻 轻 抖 动 ， 边 抖 动 边 转 动 培 养 瓶 ， 将 种 子 均 匀 地 播 撒 于 萌 发 培 养 基 表 面 。 一 个 蒴 果 接 种 58 瓶 。接 种后 的培 养瓶 放于 培养室 ，前 3d为 暗培 养， 第 4d始 光照 强度 为 14.418molm-2 s-1， 第 7d后光 照 强度增 加 至 2736molm-2 s-1，光照时 间为 12h/d； 温 度25 3； 培养 6090d。8.4 生 长 培 养幼 芽 长 至 13mm时 转 接 至 生 长 培 养
9、 基 中 进 行 培 养 ， 每 瓶 150200株 。 转接后 的培 养瓶 放于 培养 室， 光 照强 度为 3672molm-2 s-1， 光 照时间 为 12h/d； 温度 为25 3 ； 培养 6090d。8.5 生 根 培 养DB32/T 2736-20153幼 苗 长 至 11.5cm时 转 接 至 生 根 培 养 基 中 进 行 培 养 ， 每 瓶 2040株 。 转 接 后 的 培 养 瓶 放 于 培 养 室 ， 培 养 条 件 同 8.4。8.6 标签每 次 接 种 后 ， 将 标 注 好 播 种 日 期 、 品 种 号 、 操 作 人 工 号 等 信 息 的 标 签 贴 于
10、 培 养 瓶 上 。8.7 炼苗当幼苗 长至 35cm高 时， 将 培养瓶 放置 于温 室自 然散 射光下 炼苗 ，光 照强 度为 144180molm-2 s-1， 温 度 255 ， 炼 苗 715d， 即 可 进 行 销 售 或 种 植 。9 商 品 苗 质 量9.1 质 量 要 求商 品 苗 应 为 非 污 染 、 无 烂 茎 、 烂 根 、 黄 叶 ； 叶 片 4片 以 上 ， 正 常 展 开 ， 叶 色 翠 绿 。 650ml兰 花 组 培 瓶 每 瓶 40-45株 。9.2 商 品 苗 分 级表1 铁 皮 石 斛 商 品 苗 分 级等级 根（条） 叶片（片） 株高（ cm） 茎粗
11、（ cm）一级苗 35 6 5.0 0.3二级苗 23 46 3 0.210 出售10.1 包装铁皮石 斛瓶 苗直 立放 置在 塑料筐 或纸 箱中 ， 包 装箱 应该结 实牢 固并 设有 透气 孔， 并 有保 持向 上 的 标 识 ， 装 箱 后 贴 上 标 签 。10.2 标签每 批 苗 应 有 标 签 ， 标 明 无 菌 苗 生 产 单 位 、 品 种 、 苗 龄 、 等 级 、 数 量 、 出 苗 日 期 、 批 号 、 标 准 号 、 苗 木 检 验 证 书 号 等 。10.3 运输当 温 度 超 过 30 或 低 于 5 时 ， 装 运 的 车 厢 应 有 空 调 ， 温 度 调 节 至 253 。 到 目 的 地 后 应 立 即 拆 封 ， 放 置 到 待 移 栽 区 域 。DB32/T 2736-20154附 录 A（ 资 料 性 附 录 ） 铁 皮 石 斛 无 菌 播 种 苗 生 产 流 程优 良 亲 本 制 种灭菌无 菌 蒴 果播种萌 发 培 养6090d 后转接生 长 培 养90120d 后 转 接生 根 培 养90120d成品苗炼苗 715d商 品 苗销售图A.1 铁 皮 石 斛 无 菌 播 种 苗 生 产 流 程
