1、生物技术实践试题精选后期整理： 豆儿 （2016.广州市模拟）酿酒过程中若操作不慎，所酿的酒可能变酸分析回答：（1）酿酒所需的微生物是_，产生的酒精可以与_（试剂）发生显色反应（2）在变酸的酒的表面观察到的菌膜是_在液面大量繁殖而形成的若要对该菌进行初步分离纯化，比较便捷的操作是：采用_法（填“平板划线”或“稀释涂布平板” ）把它们接种到_（填“固体”或“液体” ）培养基上，经培养得到肉眼可见的_（3）实验室中常用_法对培养基及器皿进行灭菌不同培养基的具体配方不同，但一般都含有水、_、_和无机盐（ 2016 汉阳一中模拟）汉阳一中模拟）美国科学家发现了一种能将溶解在水中的铀还原成难以溶解的铀的
2、地杆菌,可缩小铀污染的范围,而其他的细菌则不能在含铀的环境中生存。科学家为了研究这种地杆菌的生理特性,需对其进行分离和培养。请回答下列问题:(1)培养基中一般含有微生物生长所需的水、无机盐、 、 等。制备培养基时常用的灭菌方法是 。接种时要对接种环进行 。(2)为了分离出能够还原铀的地杆菌,可在培养基中加入 ,从用途上看,这种培养基称为 。对地杆菌计数时,常采用的方法是 。(3)在稀释倍数为 106倍下涂布了三个平板(每次取 0.1 mL),统计菌落数分别为240、250、260,则稀释前 1 mL 菌液中所含细菌为 个。(4)获取地杆菌后如要临时保存,可将其接种在 上,等长成菌落后放在 的冰
3、箱中保存。（2016 内蒙古阿拉善盟孪井滩）近年来，纪录片舌尖上的中国引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的 发酵作用制作的美味食品。请分析回答下列问题：（1）在葡萄酒的自然发 酵过程中，酵母菌的来源是_。来源:Z_xx_k.Com（2）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制。用盐腌制时，应注意控制_；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在_%左右。（3）微生物培养时，如果想让培养基内只生长真菌，则可用含 的培养基；后期进行菌落统计时，一般选择菌落数在 间的平板进行计数。（4）制作泡菜过程中，会产生亚硝酸盐。在_条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_反应后，与
4、 N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成_色染料。（2015 新课标卷）(1)胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是_(填“-胡萝卜素”、 “-胡萝卜素”或“-胡萝卜素”)，该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子_，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为_，胡萝卜素是_( 填“ 挥发性”或“ 非挥发性”)物质。(2)工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，_(填“ 需要”或“不需要”)将新鲜的岩藻干燥。(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的_作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是_。（2015 新课标卷）已知微生物 A 可以产生油脂，微生物 B 可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用
5、于生物柴油的生产。回答有关问题：（1）显微观察时，微生物 A 菌体中的油脂通常可用_染色。微生物 A 产生的油脂不易挥发，可选用_（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法” ）从菌体中提取。（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶分微生物 B 的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以_为碳源的固体培养基进行培养。（3）若要测定培养液中微生物 B 的菌体数，可在显微镜下用_直接计数；若要测定其活菌数量，可选用_法进行计数。（4）为了确定微生物 B 产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在 35、40、45温度下降解 10g 油脂所需酶量依次为 4mg、1mg、6mg，则上述三个温度
6、中，_条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕_设计后续实验。，在_的作用下合成_，获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。（2015 海南卷）生产果汁时，用果胶酶处理果泥可提高果汁的出汁率。回答下列相关问题：（1）某同学用三种严的果胶酶进行三组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶的活性的平均值并进行比较。这一实验的目的是。（2）现有一种新分离出来的果胶酶，为探究其最适温度，某同学设计了如下实验：取试管 16 支，分别加入等量的果泥、果胶酶、缓冲液，混匀，平均分为 4 组，分别置于 0、5、10、40下保温相同时间
7、，然后，洲定各试管中的出汁量并计算各组出汁量平均值。该实验温度设置的不足之处有和。（3）某同学取 5 组试管（AE）分别加入等量的同种果泥，在 A、B 、C、D4 个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶，然后，补充蒸馏水使 4 组试管内液体体积相同；E 组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将 5 组试管置于适宜温度下保温一定时间后，测定各组的出汁量。通过AD 组实验可比较不同实验组出汁量的差异。本实验中，若要检测加入酶的量等于 0 而其他条件均与实验组相同时的出汁量，E 组设计（填“能”或“不能” ）达到目的，其原因是。（2015 山东卷）乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖
8、和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：产乳糖酶微生物 L 的筛选乳糖酶的固定化乳糖酶的提取纯化产乳糖酶微生物 L 的培养（1） 筛选产乳糖酶的微生物 L 时，宜用_作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是_。从功能上讲，这种培养基属于_。（2） 培养微生物 L 前，宜采用_方法对接种环进行灭菌。（3） 纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越_.（4） 乳糖酶宜采用化学结合法（共价键结合法）进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的_确定其应用价值。除化学结合法外，酶的固定化方法还包括_、_、离子吸附法及交联法等(
9、2015山东聊城一中期初调研)在植物组织培养过程中，激素的添加已成为一种常规的实验手段，在植物组织培养过程中已研究过的植物激素有：生长素、细胞分裂素、赤霉素等。下表为某同学研究激素的使用顺序对实验结果的影响，请回答相关问题：使用顺序 实验结果先使用 NAA，后使用 KT 有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用 KT，后使用 NAA A同时使用 B(1)植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、_和 _的关键性激素。该实验中属于细胞分裂素类的是_。(2)请将表格中空白处 A 和 B 补充完整， A 为_，B 为_。若 NAA 和 KT 的用量比值适中时，促进_的形成。(3)用于离体培养的植物器官或
10、组织称为_。若该实验材料为菊花，则应对其进行_(消毒/灭菌)。(4)接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养环境应注意调节合适的_和_。接种过程中要注意在_旁进行。（2015 江苏卷）人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。 请回答下列问题:(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是 (填序号)。酒精灯 培养皿 显微镜 无菌水(2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是 。(3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦
11、净的原因是 。(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见右图)。 图中降解圈大小与纤维素酶的有关。 图中降解纤维素能力最强的菌株是 (填图中序号)。(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株 J1 和 J4,在不同温度和 pH 条件下进行发测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株 更适合用于人工瘤胃发酵,理由是 。（2009 浙江卷）下面是有关食醋和泡菜制作的实验。请回答：（1）食醋可用大米为原料经三步发酵来制作：第一步：大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成 （填中间产
12、物） ，然后进一步分解成葡萄糖，这一过程可用 （填淀粉指示剂）来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。第二步：用 菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，玻璃发酵瓶不应完全密闭的主要原因是 。第三步：用 菌将乙醇转化成乙酸，这一过程 氧气。（2）泡菜发酵过程中，会产生多种酸，其中主要是 ，还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用 法，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺偶联成 色化合物。进行样品测定时，还要取等量水进行同样的测定，目的是 答案：（1）糊精 碘液（或 KI-I2 溶液 酵母 发酵过程中会产生大量 CO2，使瓶内压力升高而可能引起爆裂 醋化醋杆
13、 需要消耗（2）乳酸（或有机酸） （光电）比色 紫红 作为对照（2010 浙江卷）某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。请回答：(1)图中用 溶液浸泡苹果的目的是 。黑曲霉提取液中含有的 可4KMnO水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过 方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去 。(2)实验中，操作流程 A 和 B 的先后次序为 。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速 调节阀是 。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的 混合，如果出现 现象说明果胶还没有被完全水解。 为使果胶完全水解，应将流速调 。(3)实验后，将洗涤过的固定化柱在
14、低温环境中保存若干天。该固定化柱仍可用予苹果汁制作实验，说明固定化酶可被 使用答案：（1）消毒 果胶酶 吸附 未被固定的酶等（2）AB 阀 1 乙醇 浑浊（沉淀） 慢（3 ） 重复（2012 浙江卷）幽门螺杆菌（Hp ）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：请回答：（1）在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为 Hp 含有 它能以尿素作为氮源；若有 Hp，则菌落周围会出现 色环带。（2）下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是 灭菌。A高压蒸汽B紫外灯照射C70酒精浸泡D过滤（3）步骤 X 表示 。在无菌条件下操作时，先讲
15、菌液稀释，然后将菌液 到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得 菌落。（4）在培养时，需将培养皿倒置并放在 中。若不倒置培养，将导致 。（5）临床上用 14C呼气试验检测人体是否感染 Hp，旗基本原理是 Hp 能将 14C标记的 分解为 3NH和 2O。（2013 浙江卷）请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上，第、空各 2 分，其余每空各 1 分。利用紫甘薯制酒可提高其附加值。请回答：（1）为提高紫甘薯的利用率，工厂化生产时，可加入果胶酶和淀粉酶，其中果胶酶可来自 等微生物。由于酶在水溶液中不稳定，因此常将酶固定在某种介质上制成 。（2）果胶酶可将紫甘薯匀浆中的果胶水解成
16、A. 半乳糖醛酸和葡萄糖 B. 半乳糖和果糖C. 半乳糖醛酸甲酯和果糖 D. 半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯（3）紫甘薯匀浆流经 -淀粉酶柱后，取适量流出的液体，经脱色后加入 溶液，结果液体呈红色。表明该液体中含有 A. 淀粉 B. 糊精 C. 麦芽糖 D. 葡萄糖（4）在发酵前，为使酵母菌迅速发生作用，取适量的干酵母，加入温水和 。一段时间后，酵母悬液中会出现气泡，该气泡内的气体主要是 。将酵母液接种到待发酵液后，随发酵的进行，酵母菌在 条件下产生了酒精和二氧化碳。（5 ）下图表示发酵液 pH 对酒精浓度的影响。据图判断，最佳 pH 值是 答案：（1）黑曲霉（或苹果青霉） 固定化酶（2） D（3
17、） B（4） 蔗糖 2CO 无氧（5） 4.7（2015 浙江卷）某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下图所示。请回答：（4）上壤悬液泞先经 80处理 15 分钟，其目的是筛选出 （5）在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液进行 ，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到 ，其周围出现透明水解圈，圈的直径大小与 强弱相关。（6）筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养。培养时斋要振荡，其主要目的是 。液体培养基与固体培养基相比.不含有的成分是 。（7）在合适条件下，将提纯的植酸酶与海藻酸钠混合后，滴加到一定浓度的钙离子
18、溶液中，使液滴形成凝胶固体小球。该过程是对酶进行 。A.吸附 B.包埋 C.装柱 D.洗涤（8）温度与植酸酶相对酶活性的关系如图所示。下列叙述错误的是 。A.测试温度中，固定化与非固定化植酸酶的最适温度分别为 60和 45B.测试温度范围内，固定化植酸酶的相对酶活性波动低于非固定化植酸酶C.固定化与非固定化植酸酶相比，相对酶活性在 80%以上时的温度范围较宽D. 65时固定化与非固定化植酸酶的相对酶活性因蛋白质变性而位于最低点答案：(1)耐高温菌株(2)稀释 单菌落 植酸酶的活性(3)供氧 琼脂(4)B(5)D(2015湖北襄阳模拟 )某班同学用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒，其简要流程如下：Er
19、ror!发酵果酒(1)实验过程中，该小组同学发现榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是_。(2)分离酵母菌应使用_培养基，固定化酵母细胞常采用_ 法，若想使这些酵母细胞能反复使用，实验过程中一定要注意_。(3)在酸性条件下，可用_来检测发酵产物中是否有酒精产生。若想进一步检测所得果酒中酵母菌的密度，可采用_法。(4)发酵完成后，该班同学制作的果酒品质非常好，为方便后续年级使用，可将菌液_保存。(5)另一个班的同学用葡萄制作的果酒酒味醇正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，请分析出现酸味的原因_。（2015 江苏卷）右图为苹果酒的发酵装置示意图,下列叙述错误的是（ ）A. 发酵过程中酒精的产生速率越来越快B. 集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的 CO 2C. 发酵过程中酵母种群呈“J 冶型增长D. 若发酵液表面出现菌膜,最可能原因是发酵瓶漏气（2015 上海卷）在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在 a、b、c 处分别贴浸有不同抗生素（浓度相同）的无菌滤纸片，d 处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如图 3。以下判断错误的是（ ）Aa 处抑菌效果小于 b 处 Bb 处的滤纸片没有沥干Cc 处抗生素无效 D d 为对照
